山楂葉總黃酮對糖尿病大鼠血糖、血脂代謝的影響*

朱柳瑩，吳忠祥，李苗苗 ，涂 星 ，魯 強 ，萬夢思，舒朝輝， 張 倦，張敏麗，閔 清**

(1．湖北科技學院臨床醫學院，湖北 咸寧 437100；2．湖北科技學院藥學院)

隨著生活水平的提高，糖尿病及其并發癥已成為嚴重危害人們健康的一種常見病和多發病。糖、脂代謝紊亂是糖尿病并發癥的一個重要因素[1，2]，積極改善糖尿病糖代謝及脂代謝異常對降低患者的死亡率和提高生活質量有十分重要意義。因此，尋找降低血糖、血脂的藥物一直備受廣大醫藥工作者的重視。山楂葉總黃酮(hawthorn leaves flavonoids，HLF)系薔薇科植物山楂葉的主要活性成分之一，現研究表明山楂葉總黃酮對心血管系統有明顯的藥理作用。如擴張冠狀動脈，降血脂、降血壓、抗氧化以及降血糖等[3]，但對糖尿病大鼠糖脂代謝是否有影響報道不多。本研究采用高糖高脂飼料喂養并腹腔注射STZ(40mg/kg)[4]建立糖尿病大鼠模型，探討不同劑量山楂葉總黃酮對糖尿病大鼠血糖血脂代謝的影響，為臨床合理使用HLF及其開發利用提供了一定的參考依據。

1 材料與方法

1.1 試驗藥品 山楂葉總黃酮，購于山西省晉城中晉藥業有限公司，純度95.4%。

1.2 動物 健康雄性SD大鼠，體重(290±10)g，共50只，購于湖北省醫科院實驗動物研究中心(合格證號：SCXK(鄂)2008-0005)。

1.3 試劑 甘油三酯(TG)、膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)等測定試劑盒均購于南京建成試劑盒公司，鏈脲佐菌素(STZ)為美國Sigma產品。

1.4 儀器 三諾血糖儀及配套試紙(長沙三諾生物傳感技術有限公司，2303N1)；TGL-16C高速臺式離心機(上海安亭科學儀器廠)；TBA-40F2自動生化分析儀(東芝醫療系統中國有限公司)。

1.5 方法

1.5.1 大鼠糖尿病模型建立 將實驗大鼠于本實驗室適應性喂養一周后開始實驗。先隨機選取10只作為正常對照組， 40只用于建立糖尿病大鼠模型組。正常組以普通飼料喂養，造模大鼠以高糖高脂飼料[5,6]喂養，飲用水均為專用去離子水。4周后，將用于造模的40只大鼠禁食12h后，腹腔注射STZ(40mg/kg)檸檬酸緩沖液，正常對照組10只大鼠腹腔注射等濃度檸檬酸緩沖液。1周后，取大鼠尾靜脈血進行血糖測定，血糖>16.7mmol/L為造模成功[7]。

1.5.2 隨機分組給藥 將造模成功的大鼠隨機分成模型組和HLF組(低、中、高劑量)，其中低、中、高劑量給藥組，各組分別給予50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg山楂葉總黃酮5ml/d灌胃，模型組以及正常組以5ml/d生理鹽水灌胃，定期檢測大鼠體重和血糖水平，連續6周。

1.5.3 生化指標檢測 取材前，大鼠禁食不禁水12h，戊巴比妥麻醉下，從腹主動脈取血，進行血液分離，將分離的血清置于-80℃冰柜中保存，按試劑說明書測定血糖和血脂等相關生化指標[8]。

2 結 果

2.1 各組大鼠的一般狀態 正常組大鼠飲水飲食及大小便均無明顯異常。模型組和低、中、高劑量給藥組大鼠均出現飲水飲食明顯增多、尿量增多、體重下降，毛松、毛色暗黃、懶動等癥狀。給藥組經山楂葉總黃酮治療后狀況好轉，模型組癥狀明顯，并出現少數大鼠死亡現象。

2.2 山楂葉總黃酮對糖尿病大鼠體重的影響 大鼠經過高脂高糖4周喂養以后，各組體重無明顯差異。給予STZ 1周以后，正常組大鼠體重有所增加，而給予STZ的所有大鼠體重都有所降低。給予山楂葉總黃酮后，正常組大鼠體重不斷增加，模型組大鼠體重一直降低，糖尿病“三多一少”癥狀明顯，模型組大鼠體重與正常相比有明顯統計學意義(P<0.01)。低、中、高劑量HLF組大鼠體重在給藥第3周時較實驗前有所下降，給藥4周后，體重下降緩慢，給藥5周后體重有所回升，較模型組顯著(P<0.05),到給藥6周后與模型組比較非常顯著(P<0.01),用藥各組呈劑量效應關系，見表1。

表1 山楂葉總黃酮對糖尿病大鼠體重的影響

2.3 山楂葉總黃酮對糖尿病大鼠血糖的影響 給予STZ處理前，正常對照組、模型組與HLF組大鼠血糖無顯著差異(P﹥0.01)，給予STZ處理后，模型組與正常對照組比較差異顯著(P<0.01)，說明糖尿病模型建立成功。給藥后，HLF各組隨著實驗時間的增加，血糖在逐漸下降，同時隨著山楂葉總黃酮劑量的升高，血糖下降越來越明顯，有一定的量效關系，與模型對照組相比，差異顯著，而模型對照組小鼠血糖仍維持在較高的水平，說明HLF具有顯著降低血糖的作用。見表2。

表2 山楂葉總黃酮對糖尿病大鼠血糖的影響

2.4 山楂葉總黃酮對糖尿病大鼠血脂的影響 動物實驗6周后檢測糖尿病大鼠血清TG、TC、HDL-C,LDL-C.與正常組相比明顯偏高(P<0.05)，說明糖尿病大鼠的血脂水平比正常組高；低、中、高劑量給藥組與模型組相比TG、TC、LDL-C水平逐漸下降，HDL-C水平逐漸升高，且隨著HLF劑量的升高，降血脂作用越來越明顯，呈一定的量效關系，說明山楂葉總黃酮具有一定降低血脂的作用。見表3。

表3 山楂葉總黃酮對糖尿病大鼠血脂的影響

3 討 論

在糖尿病發病過程中，由于胰島素分泌絕對或相對不足，使體內糖、脂等多種代謝紊亂，進而導致多種并發癥的發生，嚴重危害人們的身心健康。糖尿病治療的主要難題是防止并發癥，盡管目前通過一些藥物能很好地控制血糖，但仍然無法避免并發癥的發生，說明還是要了解糖尿病并發癥的發病機制以及治療策略。脂代謝異常是糖尿病并發癥發生的重要因素，糖、脂代謝異常的關系是研究糖尿病并發癥的重要內容，這也是為什么糖尿病患者比非糖尿病患者更易患動脈硬化性疾病的原因[9，10]。能否糾正糖脂代謝紊亂是治療糖尿病及其并發癥的重要環節。

本研究用高糖高脂飼料喂養和大鼠腹腔注射鏈脲佐菌素誘發糖尿病模型，伴有明顯的血脂TG、TC、LDL-C等升高，HDL-C降低，經過山楂葉總黃酮給藥6周治療結果表明：能明顯降低血糖水平，與糖尿病模型組相比差異有顯著性。而且能適當增加糖尿病大鼠的體重。同時，山楂葉總黃酮用藥6周后，糖尿病大鼠血清中TC、 TG、 LDL-C明顯升高而HDL-C水平明顯降低的作用；在一定程度上糾正了糖尿病糖脂代謝紊亂。本研究結果與報道[11]一致，而且從結果可以看出山楂葉總黃酮對血糖的影響較溫和，給藥后立即降低血糖的程度較輕，但長期給藥的降血糖效果是肯定的。

在實驗過程中，本研究也觀察到糖尿病大鼠出現典型的“三多一少”癥狀，飲水、飲食量明顯高于正常對照組，而且糖尿病大鼠的體重明顯減低給予不同劑量山楂葉總黃酮后大鼠體重也逐日增加。糖尿病大鼠還出現皮毛脫落無光澤、體虛，對外界刺激的敏感，尾巴潰爛變黑， 類似于臨床上的糖尿病足。但山楂葉總黃酮給藥組該類癥狀較輕，說明山楂葉總黃酮對糖尿病大鼠病變以及并發癥具有良好的控制作用。

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