珍珠母鎮(zhèn)靜催眠作用及其不同炮制品對小鼠腦內(nèi)5-羥色胺濃度的影響

劉 冬，代婷婷，查榮博，曲 鵬，李 影,2，杜 鶴，趙思遠(yuǎn)，宋 利，張 輝*，孫佳明*

(1.長春中醫(yī)藥大學(xué)，長春 130117；2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材學(xué)院，長春 130118)

珍珠母(Margaritiferaconcha)是常用中藥材，為蚌科動(dòng)物三角帆蚌Hyriopsiscumingii(Lea)、褶紋冠蚌Cristariaplicata(Leach)或珍珠貝科動(dòng)物馬氏珍珠貝Pteriamartensii(Dunker)的貝殼，具有平肝，潛陽，定驚，止血的功效，用于治療頭眩、耳鳴、心悸失眠等癥[1]。主要的成分為CaCO3，含量在90%以上，有機(jī)質(zhì)含量3.5%左右，另含少量的鎂、鐵離子、氨基酸。為探查珍珠母不同炮制品的鎮(zhèn)靜催眠作用及作用機(jī)制，本實(shí)驗(yàn)通過觀察不同炮制品對氯苯丙氨酸造模小鼠腦內(nèi)5-HT濃度的影響,為進(jìn)一步研究珍珠母的炮制機(jī)理提供了具體的科學(xué)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 動(dòng)物 雄性健康實(shí)驗(yàn)級小鼠60只，體質(zhì)量(20±2) g。由長春中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部提供。

1.2 藥物 珍珠母烘烤品和超微粉為本實(shí)驗(yàn)室自制。

1.3 試劑與儀器 對氯苯丙氨酸(PCPA)，購自Sigma公司；安定注射液，5-HT酶聯(lián)反應(yīng)(ELISA)試劑盒購于南京建成生物工程有限公司。酶標(biāo)儀(日本TARAKA公司)；CO2培養(yǎng)箱，METTLER TOLEDO電子天平(SARTORIUS AG)；CR20B2型冷凍高速離心機(jī)(日本日立)；GVDV300三頻恒溫超聲波清洗器(江蘇昆山超美)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 小鼠自主活動(dòng)次數(shù)的測定 將60只雄性小鼠隨機(jī)分6組，每組10只,空白組、模型組、陽性組、珍珠母生品組、烘烤品組和超微粉組。模型組按小鼠30 mg/100 g體質(zhì)量用量腹腔注射PCPA[2]，空白組腹腔注射相同體積的生理鹽水。腹腔注射30 h后，小鼠出現(xiàn)晝夜節(jié)律消失，模型成功[3]。樣品按生藥量218.75 g/kg體質(zhì)量給藥，空白組和模型組給同體積生理鹽水，陽性組為安定劑量按0.04 mg/20 g。1次/d，連續(xù)給藥7 d。

2.2 珍珠母不同炮品對小鼠自主活動(dòng)的影響 給藥1周后，禁食12 h，將小鼠放入自主活動(dòng)儀中適應(yīng)環(huán)境2 min后開始觀察并記錄5 min內(nèi)小鼠的活動(dòng)次數(shù)。……