人附睪分泌蛋白4對卵巢癌復發(fā)的臨床診斷價值

馬瀟瀟 任瑞鋒 張素萍 李 俊 趙海英 管 燕

人附睪分泌蛋白4對卵巢癌復發(fā)的臨床診斷價值

馬瀟瀟 任瑞鋒 張素萍 李 俊 趙海英 管 燕

目的 評估人附睪分泌蛋白4(HE4)對判斷卵巢癌復發(fā)的敏感性和特異性。方法 42例可疑卵巢癌復發(fā)患者和42例良性附件病變患者，在二次手術前24 h內留取血清樣品集中檢測HE4和CA125水平。結果 CA125診斷卵巢癌復發(fā)的敏感性和特異性分別為38.09%和57.14%。HE4以70 pmol/L 和150 pmol/L作為診斷界點，診斷卵巢癌復發(fā)的敏感度分別為76.19%和28.57%。特異性均為100.00%。結論 HE4判斷卵巢癌復發(fā)優(yōu)于CA125，以70 pmol/L作為診斷界點可以獲得絕對的特異性。

人附睪分泌蛋白4；糖類抗原-125；卵巢癌復發(fā)

(ThePracticalJournalofCancer，2014，29：1544～1547)

晚期卵巢癌即使經過手術和幾個月的化療，總體2年無復發(fā)生存率為33.6至95.8%之間[1]。監(jiān)測腫瘤復發(fā)的策略目前仍未統(tǒng)一。目前多數婦科腫瘤醫(yī)師在完成初次治療后的第一年里對患者每3個月進行一次CA125聯(lián)合CT或MRI成像加體格檢查的組合評價[2]。

由于CA125經常在非惡性腫瘤疾病升高所以其具有很高的假陽性率[3]。

因此，近年來為了提高檢測卵巢癌的特異性和靈敏性，有許多對新型生物標志物，如人附睪蛋白4(HE4)單獨或聯(lián)合CA125的組合的研究[4-6]。HE4是近年來用于診斷早期卵巢癌一個新標記物，比CA125具有更高的靈敏度(76.9%)[7]。近期美國食品和藥物管理局(FDA)批準HE4與CA125檢測相結合用于監(jiān)測上皮性卵巢癌復發(fā)或疾病進展[8]。然而，目前為止只有兩個關于HE4應用于監(jiān)測卵巢癌復發(fā)[4，9]的研究。這兩項研究均未單獨計算HE4監(jiān)測復發(fā)卵巢癌的敏感度和特異性。本研究為首個前瞻、對照比較CA125和HE4在卵巢癌復發(fā)組(研究組)與良性附件病變組(對照組)患者中表達的敏感性和特異性的研究。

1 資料與方法

1.1 資料來源

本研究自2010年11月至2013年6月，前瞻性入選華北石油管理局總醫(yī)院婦科可疑卵巢癌復發(fā)的患者(研究組)和良性附件病變組(對照組)，本研究經醫(yī)院倫理委員會批準。入選標準如下：①年齡18～80歲；②符合2009年國際婦產科聯(lián)盟(FIGO)標準；③獲得了患者的知情同意。排除標準包括：①嚴重肝腎功能不全，嚴重心力衰竭，血液疾??；心臟異常、血液、腎臟、呼吸和(或)肝功能異常；②存在其他的惡性腫瘤。

1.2 主要儀器和試劑

DENLEY DRAGON Wellscan MK 3 全自動酶標儀：芬蘭Thermo 公司生產；Alisei 全自動酶免疫分析儀：意大利 SEAC 公司生產；HE4試劑盒和質控品由瑞典CanAg公司提供；CA125試劑盒和質控品由瑞士Roche公司提供。HE4 水平檢測采用ELISA 雙抗體夾心法；CA125水平的測定采用電化學發(fā)光免疫分析法。CA125參考值為 0～35 U/ml，CA125>35 U/ml 判斷為CA125陽性。血清HE4 參考值為 0～150 pmol/L，設定兩個界值HE4>70 pmol/L和 HE4>150 pmol/L 判斷為 HE4 陽性。

所有可疑復發(fā)的卵巢癌患者均行盆腔超聲檢查、CT或MRI檢查中的至少一個。所有患者于手術前一天獲取用于腫瘤標志物分析的血液樣品。

研究組中入選的卵巢癌復發(fā)患者均行二次手術，由婦科腫瘤病理學家進行病理檢查。

1.3 統(tǒng)計學方法

應用統(tǒng)計軟件SPSS 18.0進行統(tǒng)計學分析，首先進行正態(tài)分布檢驗。經檢驗CA125和HE4數據均不符合正態(tài)分布，HE4和CA125水平以中位數(四分位數間距)表示；以病理診斷為“金標準”進行四格表分析，計算敏感度和特異度。應用受試者工作特征(ROC)曲線得到診斷卵巢癌復發(fā)的診斷界值，并由ROC曲線下面積綜合評價CA125和HE4的診斷準確性。

2 結果

2.1 兩組患者一般情況(表1)

2.2 兩組患者HE4和CA125水平

研究組CA125中位數為68 (23～133)U/ml；HE4中位數為103.6 pmol/L(58～187)。研究組中CA125水平高于診斷界點16例(38.09%)，HE4水平高于診斷界點(70 pmol/L)32例(76.19%)，而HE4水平高于診斷界點150 pmol/L 12例(28.57%)。

對照組CA125中位數為25 U/ml(13～162)；HE4中位數為19 pmol/L(10～42)。對照組患者中CA125水平高于診斷界點18例(42.9%)，HE4水平高于診斷界點70和150 pmol/L未檢測到。

研究組中CA125單獨檢測對判斷卵巢癌復發(fā)的靈敏度38.09%，而HE4以70和150 pmol/L作為診斷界點的敏感性分別是76.19%和28.57%。在這兩種情況下，HE4的特異性是絕對的(100.00%)，而CA125的特異性僅為57.14%，陽性預測值47.06%，見表2。

表1 兩組患者一般情況(例，%)

表2 HE4和CA125診斷準確性/%

CA125和HE4診斷卵巢癌復發(fā)的ROC分析：HE4的陽性預測值(PPV)是100%，診斷界點定為70和150 pmol/L時陰性預測值(NPV)是80.77%和58.33%。CA125診斷卵巢癌復發(fā)的ROC曲線：ROC曲線下面積為0.558(95%，CI 0.417-0.699)(圖1)。HE4診斷卵巢癌復發(fā)的ROC曲線：ROC曲線下面積為0.901(95%，CI 0.813-0.980)(圖2)。

圖1 CA125診斷卵巢癌復發(fā)的ROC曲線

圖2 HE4診斷卵巢癌復發(fā)的ROC曲線

3 討論

目前監(jiān)測卵巢癌復發(fā)的策略尚未統(tǒng)一。Rustin等發(fā)現，高達70%的患者在卵巢癌復發(fā)的癥狀和體征出現之前5個月血清CA125水平已經升高，其預測疾病進展的敏感性為80%～90%[10-11]。雖然串聯(lián)數個指標監(jiān)測可早期發(fā)現卵巢癌術后復發(fā)，但卻增加漏診率。唯一對比根據CA125水平同傳統(tǒng)的臨床指標監(jiān)測卵巢癌復發(fā)的隨機、對照、多中心試驗的結果顯示兩種治療方案在總體生存率方面未見明顯統(tǒng)計學差異[12]。此外還有一些關于CA125作為腫瘤血清標志物監(jiān)測卵巢癌復發(fā)的文獻報道。CA125抗原不僅在卵巢癌患者血清中高表達，也在非惡性疾病升高從而導致其特異性降低[13]。因而急需新的監(jiān)測卵巢癌復發(fā)或疾病進展的標志物應用于臨床。

作為單個腫瘤標記物，HE4與CA125相比在檢測早期階段的惡性腫瘤方面具有更高的靈敏度(76.9%)[7]。HE4在漿液性和子宮內膜樣卵巢癌中高表達，提示其可用于區(qū)分不同的腫瘤類型[14]。有研究證實 HE4在非惡性婦科疾病中與CA125 具有相似的敏感性，且假陽性率更低[5，15]。

目前僅有兩個關于HE4監(jiān)測卵巢癌的研究。Havrilesky等[4]入選卵巢癌復發(fā)患者27例，使用生物標志物組合(包括HE4，MMP7和Glycodelin)預測復發(fā)的敏感性為100%，單獨使用CA125的敏感性為 96%。生物標志物組合中至少有一種在患者出現臨床癥狀、體征之前升高(提前時間范圍6～69周)，其中CA125升高的占 14/27例(52%)[4]。Anastasi等入選卵巢癌復發(fā)患者5例，HE4在CA125升高前5～8個月已經升高[9]。盡管這兩個研究未對單獨使用HE4作為監(jiān)測指標的敏感性和特異性進行研究。仍提示HE4可能是卵巢癌復發(fā)的早期重要指標。

本研究為首個前瞻、對照比較CA125和HE4在卵巢癌復發(fā)患者中表達敏感性和特異性的研究。結果顯示CA125靈敏度35.29%低于Havrilesky等的研究結果(96%)。但是，回顧分析文獻資料中CA125的敏感性，根據38篇文獻采用35 U / ml的作為診斷界點敏感性為65%，前置時間中位數為3個月(1～7個月)[16]。

本研究結果顯示HE4在鑒別惡性疾病方面比CA125更有效。此外，特異性和陽性預測值均為100%。文獻中未見關于HE4診斷復發(fā)性卵巢癌的敏感性和特異性的數據同本研究比較。Havrilesky等[4]使用生物標志物組合(包括HE4)研究其預測卵巢癌復發(fā)的敏感性，但該研究未考慮單個標記物的敏感性。

既往有許多研究都試圖確定HE4的診斷界點但是結果不一致[17-18]。本研究中HE4設置兩個診斷界點：150 pmol/L(按照制造商的指示)，和70 pmol/L( Moore等所建議的)[6]。使用HE4>1.8 ng/ mL作為診斷界點檢測早期敏感性達到82.7%，而檢測惡性程度高的敏感性為92.5%。Anastasi等HE4使用150 pmol/L作為診斷界點診斷卵巢癌有96.9%的敏感性[9]。另一方面，Moore等的使用70 pmol/L作為HE4診斷界點用于檢測早期卵巢癌，可以獲得95%的特異性和72.9%的靈敏度[17]。與此相反，Montagnana等使用30 pmol/L作為早期卵巢癌的診斷界點，發(fā)現靈敏度和特異度分別是98%和100%[18]。本研究結果顯示，HE4在診斷卵巢癌復發(fā)方面較CA125具有更高的敏感性和特異性。根據本研究中ROC曲線，最佳HE4檢測卵巢癌復發(fā)診斷界點是67.1 pmol/L。

總之，HE4的絕對特異性可能是至關重要的，可以避免不必要的探查性手術和(或)影像學檢查，并可選擇卵巢癌復發(fā)的高?；颊咿D院至到高度專業(yè)化的腫瘤中心。HE4尤其適用于監(jiān)測CA125陰性的卵巢癌患者。

[1] Heintz AP，Odicino F，Maisonneuve P，et al.Carcinoma of the ovary.FIGO 26th annual report on the results of treatment in gynecological cancer〔J〕.Int J Gynaecol Obstet，2006,95(Suppl1)：S161-S192.

[2] Bast Jr RC.CA125 and the detection of recurrent ovarian cancer：a reasonably accurate biomarker for a difficult disease〔J〕.Cancer，2010，116(12)：2850-2853.

[3] Grover S，Quinn MA，Weideman P，et al.Factors influencing serum CA125 levels in normal women〔J〕.Obstet Gynecol，1992，79 (4)：511-514.

[4] Havrilesky LJ，Whitehead CM，Rubatt JM，et al.Evaluation of biomarker panels for early stage ovarian cancer detection and monitoring for disease recurrence〔J〕.Gynecol Oncol，2008，110(3)：374-382.

[5] Hellstrom I，Raycraft J，Hayden-Ledbetter M，et al.The HE4〔WFDC2〕protein is a biomarker for ovarian carcinoma〔J〕.Cancer Res，2003，63(13)：3695-3700.

[6] Moore RG，Brown AK，Miller MC，et al.The use of multiple novel tumor biomarkers for the detection of ovarian carcinoma in patients with a pelvic mass〔J〕.Gynecol Oncol，2008，108(2)：402-408.

[7] Abdel-Azeez HA，Labib HA，Sharaf SM，et al.HE4 and mesothelin：novel biomarkers of ovarian carcinoma in patients with pelvic masses〔J〕.Asian Pac J Cancer Prev，2010，11(1)：111-116.

[8] Fleming ND，Cass I，Walsh CS，et al.CA125 surveillance increases optimal resectability at secondary cytoreductive surgery for recurrent epithelial ovarian cancer〔J〕.Gynecol Oncol，2011，121(2)：249-252.

[9] Anastasi E，Marchei GG，Viggiani V，et al.HE4：a new potential early biomarker for the recurrence of ovarian cancer〔J〕.Tumor Biol，2010，31(2)：113-119.

[10] Rustin GJ，Nelstrop AE，Tuxen MK，et al.Defining progression of ovarian carcinoma during follow-up according to CA125：a North Thames Ovary Group Study〔J〕.Ann Oncol，1996，7(4)：361-364.

[11] Rustin GJ，Marples M，Nelstrop AE，et al.Use of CA125 to define progression of ovarian cancer in patients with persistently elevated levels〔J〕.J Clin Oncol，2001，19(20)：4054-4057.

[12] Rustin GJ，van der Burg ME，Griffin CL，et al.Early versus delayed treatment of relapsed ovarian cancer (MRC OV05/EORTC 55955)：a randomised trial〔J〕.Lancet，2010，376(9747)：1155-1163.

[13] Jacobs I，Bast Jr RC.The CA125 tumour-associated antigen：a review of the literature〔J〕.Hum Reprod，1989，4(1)：1-12.

[14] Scholler N，Crawford M，Sato A，et al.Bead-based ELISA for validation of ovarian cancer early detection markers〔J〕.Clin Cancer Res，2006，12(7)：2117-2124.

[15] Hellstrom I，Hellstrom KE.SMRP and HE4 as biomarkers for ovarian carcinoma when used alone and in combination with CA125 and/or each other〔J〕.Adv Exp Med Biol，2008，622：15-21.

[16] Geurts SM，de Vegt F，van Altena AM，et al.Considering early detection of relapsed ovarian cancer：a review of the literature〔J〕.Int J Gynecol Cancer，2011，21(5)：837-845.

[17] Moore RG，Jabre-Raughley M，Brown AK，et al.Comparison of a novel multiple marker assay vs the Risk of Malignancy Index for the prediction of epithelial ovarian cancer in patients with a pelvic mass〔J〕.Am J Obstet Gynecol，2010，203(3)：228.e1-6.

[18] Jacob F，Meier M，Caduff R，et al.No benefit from combining HE4 and CA125 as ovarian tumor markers in a clinical setting〔J〕.Gynecol Oncol，2011，121(3)：487-491.

(編輯：吳小紅)

Clinical Diagnostic Value of Human Epididymal Secretory Protein 4 in the Recurrence of Ovarian Cancer

MAXiaoxiao，RENRuifeng，ZHANGSuping，etal.

GeneralHospitalofNorthChinaPetroleumAdministrationBureau，Renqiu，062552

Objective To evaluate the sensitivity and specificity of human epididymal secretory protein 4(HE4)in detecting recurrent ovarian cancer.Methods Serum samples were obtained 24 h before surgery from 42 cases of suspicious recurrent ovarian cancer and 42 patients with benign adnexal leison.HE4 and carbohydrate antigen 125(CA125) levels were detected.Results Sensitivity and specificity of CA125 in detecting recurrent ovarian cancer were 38.09 and 57.14 %，respectively.Two HE4 cut-off value were 70 pmol/L and 150 pmol/L.The HE4 sensitivity were 76.19 and 25.87 %，respectively.The HE4 specificity was 100 %.Conclusion HE4 is superior to CA125 in detecting ovarian cancer recurrence，70 pmol/L cut-off of HE4 can achieve absolute specificity.

Human epididymis protein 4(HE4)；Carbohydrate antigen 125(CA125)；Recurrent ovarian cancer

華北油田礦區(qū)臨床醫(yī)學研究課題(編號：2013-HB-G-19-3)

062552 華北石油管理局總醫(yī)院婦產科

管 燕

10.3969/j.issn.1001-5930.2014.12.011

R737.31

A

1001-5930(2014)12-1544-04

2014-10-09

2014-10-29)