解聚素-金屬蛋白酶19水平與神經膠質瘤診斷及預后的相關性

王 輝 張梅美 陳春輝 張旺明

解聚素-金屬蛋白酶19水平與神經膠質瘤診斷及預后的相關性

王 輝 張梅美 陳春輝 張旺明

目的 探討解聚素-金屬蛋白酶19水平與神經膠質瘤診斷、預后的相關性。方法 收集初診為原發神經膠質瘤的患者49例，回顧性分析膠質瘤ADAM-19的表達與臨床因素的相關性，并結合遠期隨訪結果對膠質瘤ADAM-19的表達水平與生存時間進行比較。結果 ADAM19的相對表達率在各組間的表達從小到大排列為對照組(0.57±0.13)<膠質瘤Ⅰ～Ⅱ級(1.24±0.46)<膠質瘤Ⅲ～Ⅳ級(3.78±0.85)。膠質瘤分型Ⅰ～Ⅱ組，ADAM-19低表達人數及所占比例明顯高于高表達人數及比例(17/20 vs 3/20)；相反的趨勢可見于WHO分型Ⅲ～Ⅳ組(6/29 vs 23/29)。ADAM-19高表達組的平均生存時間為(28.44±2.41)個月，明顯低于低表達組(43.58±4.27)個月，P<0.05。結論 膠質瘤ADAM-19的表達與預后、WHO分級相關。

膠質瘤；ADAM19；臨床因素；預后

(ThePracticalJournalofCancer,2014,29:1529～1531)

膠質瘤是神經系統最常見的腫瘤，臨床上70%的惡性腦腫瘤為膠質瘤[1]，具有預后差(5年生存率僅25%),高侵襲性及過度增殖的特點[2]。因此，找到影響膠質瘤發生發展的關鍵基因并以之作為靶點抑制腫瘤增殖、分化、甚至逆轉其病理生理過程已成為目前的研究熱點[3]。解聚素-金屬蛋白酶19(ADAM19)是解聚素-金屬蛋白酶家族成員之一，在多種腫瘤中高表達并與腫瘤的惡性程度相關[4]。Wildeboer等[5]證實ADAM19在原發性腦腫瘤中高表達，且其表達水平及活性與腫瘤的侵襲性相關。因此，本研究收集我院及珠江醫院初診為膠質瘤的患者49例，以外傷性腦損傷患者為對照組，采用免疫印跡法檢測膠質瘤患者ADAM19的表達，并分析其與膠質瘤的診斷及預后的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集我院及珠江醫院2009年3月-2014年3月初診為原發神經膠質瘤的患者49例，其中男性30例，女性19例，中位年齡47歲(11～79歲)；位于額葉14例，顳葉19例，其他區域16例。所有患者均行開顱腫瘤次全切術，且術前未接受放療。術后，所有患者均接受放化療。放療方案如下：60 Gy/月，分次放射，1.8～2.0 Gy/次。化療方案如下：口服蒂清(替莫唑胺膠囊)，每1個治療周期為28天，在治療周期內連續服用5天，首次用藥劑量需根據患者身高、體重直接讀取150 mg/m2所對應的劑量。第2個周期和2個周期以上用藥劑量根據周期內的第22天所測血像確定下一周期的治療劑量。(ANC<1.0×109/L，PLT<50×109/L，劑量為100 mg/m2；1.0×109/L80分，19例患者<80分。根據2007年WHO中樞神經系統腫瘤分級：Ⅰ～Ⅱ級20例，Ⅲ～Ⅳ級29例。病理類型：6例Ⅰ級的患者均為毛細胞性星形細胞瘤；14例Ⅱ級患者中，12例為彌散性星形細胞瘤，2例為少突膠質細胞瘤。Ⅲ級患者17例，均為多形性成膠質細胞瘤；Ⅳ級患者12例，均為多形性惡性膠質瘤。對照組10例，均為外傷性顱腦損傷患者，且所有對照組患者均通過組織病理學排除腦惡性腫瘤的可能。將術中所取腦組織標本迅速凍存至-80 ℃冰箱內，用以Western-blot檢測。所有患者均進行隨訪，隨訪時間為6～60個月，中位隨訪時間為27個月。終末時間點設定為患者死亡。

1.2 方法

計量資料(Western-Blot)武漢華美生物工程有限公司CUSABIO?完成，實驗方法參照既往文獻[5]。

1.3 統計學方法

計量資料(Wstern-Blot)以均數±標準差的形式表示，采用One-Way ANOVA單因素方差分析進行比較。組內比較根據方差齊性采用LSD法或Games-Howell法進行比較。計數資料采用非參數檢驗的Chi-Square檢測進行評估。采用Kaplan-Merier曲線對生存率進行分析。統計學軟件為SPSS 13.00。

2 結果

2.1 Western-blot結果

ADAM19在膠質瘤不同WHO等級腦組織、對照組中的表達差異具有明顯統計學意義(F=15.773,P=0.021)。組間多重比較可知：ADAM19的相對表達率在各組間的表達從小到大排列為對照組(0.57±0.13)

2.2 ADAM19與臨床因素的相關分析

性別、年齡、腫瘤分布、KPS積分與ADAM19表達無明顯相關性；而WHO腫瘤分級與ADAM19表達明顯相關(P<0.05)。見表1。

2.3 生存分析

ADAM19高表達組的平均生存時間(28.44±2.41月，95%CI:23.72-33.18)明顯低于低表達組(43.58±4.27月，95%CI:35.22-51.94),P=0.038。見圖2。

1A為adam19蛋白表達電泳圖，1B為兩者的相對表達率。

圖1 不同分組間ADAM19相對表達率的變化趨勢表1 ADAM19與臨床因素的相關性分析

圖2 不同ADAM19表達水平與總生存率的生存分析

3 討論

膠質瘤是臨床最常見的神經系統惡性腫瘤，其侵襲性強，預后差，對現有治療手段不敏感[6]。因此，在此背景下，臨床迫切需要一種靈敏的分子標志物用以監測療效、判斷預后并據此進行個體化治療[7]。然而，由于膠質瘤的發病、發生發展的潛在分子機制尚未明確，因此，目前對于膠質瘤的治療亦無法做到個體化，從而導致患者間療效差異極大。

解聚素-金屬蛋白酶19(ADAM19)是解聚素-金屬蛋白酶家族成員之一，在多種腫瘤中高表達，并與腫瘤的惡性程度相關[8]。既往研究證實ADAM19在肺癌、絨毛膜癌、卵巢癌中均有顯著升高，并與臨床療效、預后相關[9]。然而，盡管體外實驗已證實ADAM19可調控膠質瘤細胞株的分化、增殖、浸潤等，但尚無臨床數據對其與膠質瘤患者分級、預后的相關性進行深入探討[10]。本研究結果證實：ADAM19在膠質瘤患者腦組織中的表達明顯高于對照組，且與WHO分級相關，即WHO分級越高，膠質瘤ADAM19的表達越高。此外，通過長期隨訪可知：膠質瘤ADAM19高表達者的預后較低表達者差，而既往研究亦已證實WHO分級與預后明顯相關。因此，該結果與之前的研究類似。

盡管膠質瘤的發生發展機制復雜，涉及多靶點、多基因及各種因素綜合作用，但ADAM家族在膠質瘤發病中的重要性日趨凸顯。其中，ADAM8，17，10均已得到證實，其在膠質瘤患者中的表達明顯升高[10]，并由此引發一系列的病理生理過程，從而調控腫瘤增殖、侵襲。因此，本研究的臨床意義在于臨床醫師可根據膠質瘤的ADAM的表達進行遠期預測，從而制定更為有效的治療方案。此外，ADAM家族或可稱為日后治療膠質瘤的有效靶點，從而提高和改善膠質瘤的治療現狀。

[1] Mercer RW,Tyler MA,Ulasov IV,et al.Targeted therapies for malignant glioma: progress and potential〔J〕.Biodrugs,2009,23(1):25-35.

[2] OrtegaAznar A,JimenezLeon P,Martinez E,et al.Clinicopathological and molecular aspects of diagnostic and prognostic value in gliomas〔J〕.Rev Neurol,2013,56(3):161-170.

[3] Ni SS,Zhang J,Zhao WL,et al.ADAM17 is overexpressed in nonsmall cell lung cancer and its expression correlates with poor patient survival〔J〕.Tumour Biol,2013,34(3):1813-1818.

[4] Kanda K,Komekado H,Sawabu T,et al.Nardilysin and A- DAM proteases promote gastric cancer cell growth by activating intrinsic cytokine signalling via enhanced ectodomain shedding of TNFα〔J〕.EMBO Mol Med,2012,4(5):396-411.

[5] Wildeboer D,Naus S,Amy Sang QX,et al.Metalloproteinase disintegrins ADAM8 and ADAM19 are highly regulated in human primary brain tumors and their expression levels and activities are associated with invasiveness〔J〕.J Neuropathol Exp Neurol，2006，65(5):516-527.

[6] McGowan PM,Ryan BM,Hill AD,et al.ADAM17 expression in breast cancer correlates with variables of tumor progression〔J〕.Clin Cancer Res,2007,13(8):2335-2343.

[7] Kornfeld JW,Meder S,Wohlberg M,et al.Overexpression of TACE and TIMP3 mRNA in head and neck cancer: association with tumour development and progression〔J〕.Br J Cancer,2011,104(1):138-145.

[8] Slaby O,Sachlova M,Brezkova V,et al.Identification of microRNAs regulated by isothiocyanates and association of polymorphisms inside their target sites with risk of sporadic colorectal cancer〔J〕.Nutr Cancer，2013，65(2):247-254.

[9] Chan MW,Huang YW,Hartman-Frey C,et al.Aberrant tr- ansforming growth factor beta1 signaling and SMAD4 nuclear translocation confer epigenetic repression of ADAM19 in ovarian cancer〔J〕.Neoplasia，2008，10(9):908-919.

[10] Chesneau V,Becherer JD,Zheng Y,et al.Catalytic properties of ADAM19〔J〕.J Biol Chem，2003，278(25):22331-22340.

(編輯：甘 艷)

Relationship between ADAM19 and the Prognosis and Diagnosis of Glioma

WANGHui,ZHANGMeimei,CHENChunhui,etal.

XiangyaPingkuanCooperationHospital,Pingxiang,337000

Objective To evaluate the association between ADAM19 and the prognosis and diagnosis of glioma.Methods 49 patients with glioma were collected.The association between the expression of ADAM19 in glioma and clinical factors were retrospectively analyzed.The expression of ADAM19 and survival were compared during follow up.Results The expression of ADAM19 showed the highest level in WHO Ⅲ～Ⅳ class compared with those of the control group and WHOⅠ～Ⅱ class.In addition,patients with low expression of ADAM19 showed more percentage in WHO Ⅰ～Ⅱ class than those of WHO Ⅲ～Ⅳ Class,a reverse trend could be observed in WHO Ⅲ～Ⅳ class.Mean survival time of patients with high ADAM19 expression was (28.44±2.41)months,which was significantly less than that of low ADAM19 expression (43.58±4.27)months,P<0.05. Conclusion ADAM19 expression in glioma is correlated with prognosis and WHO class.

Glioma;ADAM19;Clinical factors;Prognosis

337000 江西省萍鄉市湘雅萍礦合作醫院(王 輝，張梅美，陳春輝)；510280 南方醫科大學珠江醫院(張旺明)

10.3969/j.issn.1001-5930.2014.12.006

R73-36

A

1001-5930(2014)12-1529-03

2014-11-12

2014-11-21)