液態保健品中總多糖含量測定方法研究

白少偉 徐 媛 龐文生 胡 娟

福建中醫藥大學藥學院，福建 福州 350122

以藥食兩用、保健中藥為原料研制保健食品，配方中原料藥的主要成分包括皂苷和多糖等多種化合物，多糖不僅是一類非特異性免疫增強劑而且有降血糖、降血脂、降血清過氧化脂質和降低膽固醇濃度、抗血凝、抗癌等作用［1］。總多糖通常作為增強免疫力、抗疲勞的功能性指標成分［2］。本文利用多糖溶于水，不溶于醇的特點，將樣品中多糖經乙醇沉淀分離后，以D－葡萄糖為標準，通過苯酚－硫酸法測定其含量［3］。

1 儀器與試劑

UV－1800紫外可見分光光度計 (上海美譜達儀器有限公司)，數顯恒溫水浴鍋，臺式離心機。D－無水葡萄糖(中國藥品生物制品鑒定所)，濃硫酸、苯酚、無水乙醇等試劑均為分析純;水為超純水。

2 方法與結果

2.1 試樣處理 精密吸取5.0ml樣品于50ml離心管中，加適量無水乙醇，混勻，使樣品中乙醇的終濃度為90%，4℃靜置1h，于4000r/min離心10min，棄去上清液。這樣分多次收集沉淀。沉淀物用適量乙醇洗滌至無色。以4000r/min離心10min，棄去上清液，沉淀加熱除去乙醇，用水溶解，定容于100ml容量瓶中，搖勻，作為供試溶液。

2.2 標準曲線的制備 精密稱取干燥恒重的無水葡萄糖對照品10mg，加水溶解，定容到10ml，得1.0mg/ml的葡萄糖對照品貯備液。精密吸取對照品貯備液0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.8ml，置10ml具塞試管中，分別向各管內加水使至體積為2.0ml，再依次向各試管加5%苯酚溶液1.0ml，搖勻，依次迅速加入濃硫酸5.0ml，搖勻;以水作為空白，于分光光度計490nm波長處測定吸光度，以葡萄糖濃度(mg/ml)為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線。回歸方程y=0.0209x+0.0199，r=0.9991。

2.3 樣品測定 精密吸取供試溶液2.0ml，置于具塞試管中，按“2.2項”方法測定吸光度，計算供試溶液濃度。

2.4 計算

式中X－樣品中總多糖含量以無水葡萄糖計，g/100ml;C－由回歸方程計算得供試溶液濃度，mg/ml;V－供試溶液定容體積，ml;M－樣品取樣體積，ml。

表1 多糖含量測定結果

3 討論

3.1 文獻表明蛋白質對多糖的測定影響并不大，而增加去蛋白步驟會造成多糖的進一步損失。因此，本方法建立中未考慮去蛋白步驟［4］。

3.2 醇沉的提取方法和以苯酚－硫酸顯色的含量測定方法，操作簡便易行，檢測數據真實、可靠，可作為該配方質量的檢測方法。

［1］Wensheng Pang，Siding Lin，Juan Hu．Antitussive Activity of Pseudostellaria heterophylla Pax Extracts and Improvement in Lung Function via Adjustment of Multicytokine Levels［J］．Molecules 2011，16(11):3360－3370．

［2］于村．保健食品中多糖測定的研究［J］．中國衛生檢驗雜志，2000，10(3):281－282．

［3］鄔衛東，張曉文．硫酸－苯酚法測定枸杞膠囊中多糖的含量［J］．內蒙古中醫藥，2003，22(6):39－39．

［4］趙寧，問亞琴，潘秋紅．苯酚－硫酸法測定干紅葡萄酒中的多糖含量［J］．中外葡萄與葡萄酒，2011，35(5):9－12．