丹參合參附注射液對重癥胰腺炎相關肺損傷保護作用的實驗研究※

丁憲群楊勝波牛 剛張 建梅小才

丹參合參附注射液對重癥胰腺炎相關肺損傷保護作用的實驗研究※

丁憲群1楊勝波2牛 剛1張 建1梅小才1

目的探討丹參合參附注射液對重癥胰腺炎（SAP）的防治作用。方法SD大鼠72只，隨機分為對照組（A組）、胰腺炎組（B組）和丹參合參附組（C組）。5%牛磺膽酸鈉胰腺被膜下均勻注射制作SAP模型。放免法檢測肺組織腫瘤壞死因子（TNF-α）、白介素-10（IL-10）含量，測定肺組織濕/干比值，并光鏡下觀察胰腺、肺組織病理變化。結果與A組比較，B組各時相肺組織TNF-α含量明顯升高（P＜0.05），IL-10含量明顯降低（P＜0.05），肺組織濕/干比值明顯增高（P＜0.05），胰腺、肺組織炎癥明顯。與B組比較，C組各時相肺組織TNF-α含量明顯降低（P＜0.05），IL-10含量明顯升高（P＜0.05），肺組織濕/干比值明顯降低（P＜0.05），胰腺、肺組織明顯炎癥減輕。結論丹參合參附注射液對SAP肺損傷有防治作用，其中改善微循環，調節肺組織內炎性因子TNF-α、IL-10含量是其作用機制之一。

重癥胰腺炎；肺損傷；丹參合參附注射液

重癥急性胰腺炎（SAP）病情兇險，容易導致全身炎癥反應綜合征（SIRS）和多器官功能不全綜合征（MODS），病死率高。急性肺損傷是SAP最常見的并發癥，也是其重要的致死因素之一，可迅速惡化演變為急性呼吸窘迫綜合征（ARDS），成為SAP早期死亡的主要原因[1]。考慮可能以多種促炎因子（TNF-α、IL-1、IL-10、PAF）介導的全身炎癥反應綜合征（SIRS）有關臨床表明丹參和參附注射液治療胰腺炎有明確療效，本實驗通過觀察丹參和參附注射液對SAP肺損傷的防治作用并探討其作用機制，報告如下。

1 材料與方法

1.1 動物分組與處理SD大鼠72只，體重200～250g，雌雄不限，隨機分為對照組（A組）、胰腺炎組（B組）、丹參合參附組（C組）。各組又按模型制備后6、9、12h 分為三組，每組8只。

1.2 藥品和試劑丹參注射液（正大青春寶公司）、參附注射液（雅安三九藥業有限公司）、牛黃膽酸鈉（Sigma公司）、TNF-α、IL-10放射免疫試劑盒（ebioscience公司）

1.3 方法動物實驗前12h禁食不禁飲。術前使用1%戊巴比妥鈉0.3ml/100g腹腔注射麻醉。B組與C組采用胰腺被膜下均勻注射法制作模型[2]，開腹后自胰尾至胰頭方向被膜下均勻注射 5%牛磺膽酸鈉1ml，A組操作同前，但僅胰腺被膜下注射等量生理鹽水。C組制模后立即股靜脈分支緩慢注射 20%丹參合參附注射液各0.12ml/100g，A組及B 組則注射等量生理鹽水。

1.4 檢測指標各組動物分別于模型成功后6、9、12h經心尖采血處死，開胸取右肺用于肺組織濕/干比值[3]，取左肺組織300mg左右，加入生理鹽水2ml，使用分散均質機制成肺組織均漿，用離心機離心3000r/min，15min，取上清液-20℃保存，放免法測定TNF-α、IL-10含量。取部分右肺和胰腺組織，HE染色后光鏡觀察其病理變化。1.5 統計學處理利用SPSS 17.0統計軟件進行統計分析，計量資料均以均數±標準差（±s）表示，各組間比較采用單因素方差分析，取α=0.05，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組肺組織濕/干比值變化，見表1。

表1 各組肺組織濕/干比值變化[(±s),n=8]

表1 各組肺組織濕/干比值變化[(±s),n=8]

注：與A組比較△P＜0.05，△△P＜0.01；與B組比較▲P＜0.05

組別 6h 9h 12h A組 3.24±0.21 3.31±0.24 3.35±0.27 B組 4.66±0.48△5.92±0.51△△6.94±0.92△△C組3.81±0.26▲△4.14±0.38▲△4.96±0.65▲△

2.2 各組大鼠肺組織TNF-α和IL-10含量的變化，見表2。

表2 各組大鼠不同時段肺組織TNF-α和IL-10含量的變化[(±s),n=8,ng/mg]

表2 各組大鼠不同時段肺組織TNF-α和IL-10含量的變化[(±s),n=8,ng/mg]

注：與A組比較 △P＜0.05，△△P＜0.01；與B組比較 ▲P＜0.05

組別 6h 9h 12h 6h 9 h 12h TNF-α IL-10B組 0.94±0.06 1.02±0.26 1.08±0.31 21.55±3.54 20.96±3.91 122.94±0.06 A組 2.94±0.24△△ 3.84±0.62△△ 4.51±0.46△△ 14.94±2.96△△ 12.11±2.46△ 10.81±2.35△△C組 1.45±0.22▲△ 1.98±046▲△ 2.11±0.40▲△ 20.54±3.26▲△ 17.55±4.78▲△ 16.78±4.26▲△

2.3 各組大鼠胰腺及肺組織病理學改變肺：A組大鼠肺臟各時相點未見明顯變化，B組及C組6h后肺組織充血明顯，9h后白細胞增多，與血管內皮黏附，部分間質白細胞浸潤，肺泡間隔水腫增厚，并隨時間延長而加重，C組病理變化較B組輕。胰腺：A組胰腺結構清晰，腺泡細胞無水腫，無炎癥細胞浸潤，無壞死及出血灶，B組腺泡腫脹壞死，融合成大片狀，間質有充血水腫，中性粒細胞及單核細胞浸潤明顯，C組較B組腺泡破壞較輕，炎癥細胞浸潤減少，出血滲出明顯減輕。

3 討論

重癥急性胰腺炎是臨床常見危重疾病，病情重，死亡率高，是臨床治療的重點及難點。在所有的嚴重急性胰腺炎當中，最快收到牽連的器官是肺臟，近年來，在該方面雖有很多新方法不斷涌現，來治療肺損傷，但是關于SAP肺損傷仍是早期最關鍵和并發癥和主要的死亡原因。

本研究表明，與B組比較，C組各時相肺組織濕/干比值均明顯降低，證實經丹參合參附注射液處理后能明顯減輕肺部組織充血水腫程度，也證實了丹參和參附注射液能有效改善微循環，從而減少急性胰腺炎時肺損傷。實驗證明，與A組比較，B組各時相胰腺及肺組織損傷均較重，TNF-α含量明顯增高，而IL-10含量明顯降低；與B組比較，C組各時相胰腺及肺組織，損傷均減輕，TNF-α含量明顯降低，而IL-10含量明顯升高，由此證明，丹參和參附注射液能在一定程度上改善SAP肺損傷時肺組織內TNF-α、IL-10含量，可通過炎性介質因子的調節起到對SAP肺損傷保護作用。

綜上所述，本研究顯示，丹參合參附注射液聯合用藥對重癥SAP所致的大鼠急性肺損傷具有保護作用，機制也可能改善微循環，調節炎性介質因子作用有關。

[1] 盧建喜,楊濤.丙泊酚對重癥急性胰腺炎相關肺損傷保護作用的實驗研究[J].浙江創傷外科,2012,17(3):312.

[2] Xue JG,Wang Y,Xu WD. An improved model of acute h emorrhagic necrotizing pancreatitis in roots[J].Chin J Exp Surg,1994, 11:313.

[3] 王剛,孫備,孟慶輝,等.血小板活化因子胰腺水解酶對大鼠重癥急性胰腺炎肺損傷的影響[J].中華實驗外科雜志,2006,23:3435.

R576

A

1673-5846(2014)01-0205-02

1 貴陽中醫學院第二附屬醫院肝膽外科，貴州貴陽 550000

2 貴陽中醫學院臨床二系，貴州貴陽 550000

貴州省科學技術聯合基金項目（黔科合中藥字【2010】LKZ7003）

丁憲群（1963-1），女，本科，學士，肝膽外科主任，主任醫師。研究方向：中醫學結合肝膽胰脾疾病。