反相高效液相色譜法同時測定復方氨酚烷胺片中4種組分的含量

陳 健

反相高效液相色譜法同時測定復方氨酚烷胺片中4種組分的含量

陳 健

目的建立采用RP-HPLC同時測定復方氨酚烷胺片中4種組分（對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因和馬來酸氯苯那敏）含量的方法。方法色譜柱為Agilent ZORBAX-C18（250mm×4.6mm，5μm），流動相為甲醇-0.01mol/l乙酸銨溶液（13:87，PH=3.0）。柱溫為30℃，進樣量為20μl，流速為1.0ml/min，檢測波長為220nm。結果對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因和馬來酸氯苯那敏的線性范圍分別為2.05～205.0μg/ml、20.7～517.5μg/ml、5.1～102.0μg/ml、5.2～52.0μg/ml，線性關系良好；該方法的專屬性、精密度、穩定性及平均加樣回收率均符合分析測定要求。結論本文建立的RP-HPLC法方便快速準確，可用于同時測定復方氨酚烷胺片中4種組分的含量。

復方氨酚烷胺片；RP-HPLC法；含量測定

復方氨酚烷胺片是由對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、人工牛黃、咖啡因組成的復方制劑，適用于緩解普通感冒及流行性感冒引起的發熱、頭痛、打噴嚏、鼻塞、咽痛等癥狀。《中國藥典》規定了對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺和咖啡因的含量測定方法[1]，分別為滴定法和紫外分光光度法，方法檢驗誤差及操作難度均較大。本文建立了一種同時測定復方氨酚烷胺片中對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因和馬來酸氯苯那敏含量的反相高效液相色譜法（RP-HPLC），此方法操作簡便，快速經濟，結果準確，現介紹如下。

1 儀器與試劑

Agilent1200高效液相色譜系統；Agilent1200可變波長掃描紫外檢測器；對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因和馬來酸氯苯那敏對照品均由中國藥品生物制品檢定所提供；復方氨酚烷胺片（每片含對乙酰氨基酚250mg、鹽酸金剛烷胺100mg、咖啡因 15mg、馬來酸氯苯那敏 2mg）為吉林省吳太醫藥集團有限公司產品；甲醇為色譜純，乙酸銨、磷酸為分析純，實驗用水為娃哈哈純凈水。

2 方法與結果

2.1 色譜條件色譜柱：Agilent ZORBAX-C18（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：甲醇-0.01mol/L乙酸銨溶液（13:87，PH=3.0）；柱溫為30℃；進樣量為20μl；流速為1.0ml/min；檢測波長為220nm。理論板數以各組分峰計，均不低于3500，各相鄰色譜峰的分離度均大于1.5。

2.2 專屬性實驗供試品溶液的配制：取復方氨酚烷胺片5片，精密稱定，研細，精密稱取細粉總量的1/50，置于100ml容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。陰性對照溶液的配制：按照該片劑處方比例制備不含測定成分的陰性樣品，按上述方法制成陰性對照溶液。

將供試品溶液和陰性對照溶液分別進樣檢測，結果見圖1，顯示片劑中輔料及其它組分對測定組分無干擾。

2.3 線性關系的考察精密稱定對乙酰氨基酚約100mg、鹽酸金剛烷胺約 100mg、咖啡因約 25mg和馬來酸氯苯那敏約25mg，置于同一100ml容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，作為儲備液。分別精密移取儲備液0.1ml、0.5ml、1.0ml、2.0ml、5.0ml、10.0ml、15.0ml、20.0ml于50ml容量瓶中，均用流動相稀釋至刻度并搖勻，進樣檢測。以樣品濃度（X）對峰面積（Y）進行線性回歸，得對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因和馬來酸氯苯那敏的回歸方程分別為：Y=31.52X＋5.67；Y=52.33X＋210.50；Y=26.48X＋6.54；Y=5.09X＋48.31。4種組分的線性關系均良好，線性范圍分別為2.05～205.00μg/ml、20.7～ 517.5μg/ml、 5.1～ 102.0μg/ml、 5.2～52.0μg/ml。

2.4 精密度試驗取2.3項下2.0ml儲備液稀釋至50ml作為樣品液，重復進樣6次，記錄樣品中4種組分峰面積，結果表明，4種組分峰面積的RSD分別為0.52%、0.83%、0.48%和0.69%，顯示精密度良好。

2.5 穩定性試驗取2.4項下樣品液，分別于室溫下放置0h、2h、4h、6h、8h、12h后進樣測定。結果顯示，4種組分峰面積的 RSD分別為 0.46%、0.91%、0.60%和0.73%，表明該片劑溶液在12h內穩定性良好。

2.6 加樣回收試驗精密量取9份已知含量的供試品溶液4ml于10ml容量瓶中，分別加入2.4項下樣品溶液3ml（n=3）、4ml（n=3）、5ml（n=3），加流動相稀釋至刻度，搖勻，進樣檢測各組分峰面積，計算得到4種組分的平均加樣回收率分別為99.6%、99.0%、99.5%、99.4%。

2.7 樣品含量測定供試品溶液平行進樣3次，根據4種組分的平均峰面積，利用2.3項下所得線性方程求出供試品溶液中4種組分的濃度，以“標識含量%”表示分別為99.8%、99.2%、100.4%、98.7%。

3 結論

本文建立的 RP-HPLC法可同時測定對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺、咖啡因和馬來酸氯苯那敏的含量，并具有方便、快速、準確、經濟的優點，可為復方氨酚烷胺片中4種主要組分的定量測定提供依據。

圖1 RP-HPLC色譜圖

[1] 中華人民共和國國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].中國醫藥科技出版社,2010.

R927.2

A

1673-5846(2014)01-0042-02

江蘇省第二中醫院，江蘇南京 210017