活體電轉化技術在新生小鼠視網膜中的應用

肖麗容，陳大年，閆乃紅

四川大學華西醫院眼科/眼科學研究室，成都 610041

活體電轉化技術在新生小鼠視網膜中的應用

肖麗容，陳大年，閆乃紅

四川大學華西醫院眼科/眼科學研究室，成都 610041

活體電轉化技術是在高電壓的脈沖作用下，瞬態增加細胞膜的滲透性從而將外源基因高效導入細胞的方法。與病毒載體等其他方法相比，活體電轉化技術具有安全、高效、快速、穩定及應用范圍廣等優點，近年來在很多組織和器官中得到廣泛使用，包括在眼科研究領域。文章介紹了活體電轉化技術在新生小鼠視網膜中的應用，通過新生小鼠視網膜下注射的方法，經幾次高電壓的脈沖，將高濃度的綠色熒光蛋白表達質粒導入新生小鼠視網膜細胞內。通過冰凍切片觀察綠色熒光蛋白在視網膜中的表達。結果表明綠色熒光蛋白在視網膜外核層高表達，證實了活體電轉化技術可以將外源基因高效、快捷的導入視網膜，從而為研究視網膜發育及功能提供一種有效的手段。

活體電轉化；新生小鼠；視網膜；冰凍切片

近年來，隨著基因測序及芯片分析等方法的發展，大量可能與哺乳動物視網膜發育及疾病相關的基因被發現，現在比以往更需要一種快速、簡便的方法去分析基因的功能[1～3]。在活體動物中，基因功能的研究主要通過轉基因或基因敲除來實現，而轉基因和基因敲除是一項費時、費力且花費巨大的工作[4,5]，利用病毒載體來攜帶目的基因導入機體雖然省時省力，但存在免疫原性低、潛在毒性、靶向特異性差等缺點[6,7]。……