2010年～2012年某區127株淋球菌抗生素敏感性的分析

黃海花 張煥梅 梁佩嬋

（廣東省江門市皮膚醫院皮膚科，廣東 江門 529000）

2010年～2012年某區127株淋球菌抗生素敏感性的分析

黃海花 張煥梅 梁佩嬋

（廣東省江門市皮膚醫院皮膚科，廣東 江門 529000）

目的了解江門地區2010年～2012年淋球菌對抗生素的敏感性及變化趨勢。方法采用瓊脂稀釋法測定6種抗生素對127株淋球菌的最小抑菌濃度（MIC）及質粒介導的高度耐四環素淋球菌（TRNG），采用紙片酸度法檢測菌株是否產β-內酰胺酶（PPNG）。結果淋球菌對大觀霉素及頭孢克肟的敏感率均為100%，頭孢曲松為77.95%，環丙沙星敏感率最低，其耐藥率高達92.13%；127株淋球菌中檢出PPNG菌株48株（37.80%），TRNG菌株51株（40.16%）。結論淋球菌對青霉素、四環素和環丙沙星的耐藥率較高，大觀霉素及頭孢克肟可作為治療本地區淋病的首選藥物。

淋球菌；抗生素；敏感性

淋病由淋病奈瑟菌（即淋球菌）感染引起，主要表現為泌尿生殖系統的化膿性感染，因其潛伏期短、傳染性強及可導致多種并發癥而受到日益關注，它既是較常見的一種性傳播疾病，也是我國法定乙類傳染病。目前，隨著抗生素的大量使用及細菌的變異，淋球菌耐藥菌株日益增多，且不同時間、不同地域淋球菌對藥物的敏感性有所不同，因此連續監測淋球菌對抗生素的敏感性對本地區淋病的臨床治療具有重要意義，現將我院2010年～2012年江門地區127株淋球菌對6種抗生素敏感性檢測結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

①菌株來源：127株淋球菌從我院性病門診有癥狀淋病患者中分離，所有菌株經革蘭染色、氧化酶和過氧化氫酶試驗、糖發酵試驗確證，-70 ℃冰箱凍存備用。②抗生素：青霉素（SmithKline公司）、四環素（Sigma公司）、環丙沙星（Bayer Leverkussen公司）、頭孢曲松和頭孢克肟（Roche公司）及大觀霉素（普強公司）6種抗菌藥物由中國疾病預防控制中心性病控制中心提供。

1.2 方法

①抗生素敏感性測定：采用瓊脂稀釋法測定6種抗生素對淋球菌的最小抑菌濃度（MIC），各抗生素用適當緩沖液溶解后配成溶液，倍比稀釋，其在培養基平皿上的濃度范圍分別為青霉素、四環素0.125～32 μg/mL，環丙沙星0.25～32 μg/mL，頭孢曲松0.001～0.5 μg/mL，頭孢克肟0.015～1 μg/mL，大觀霉素0.5～32 μg/mL。試驗菌株和標準菌株先在無選擇性培養基上傳代2次，用16～18 h的新鮮培養物制成107～108cfu/mL菌懸液，用多頭點接種器蘸取菌液接種于各抗生素瓊脂平皿上，35 ℃培養24 h后觀察結果，記錄MIC50和MIC90，每批試驗均由已知MIC值的世界衛生組織（WHO）參照菌株作質控，按WHO西亞太地區淋球菌耐藥監測項目推薦的標準判斷敏感性[1]。②β-內酰胺酶測定：采用紙片酸度定量法，以標準菌株E株作為陽性對照，標準菌株A株作為陰性對照。③高度耐四環素菌株（TRNG）測定：采用瓊脂稀釋法，當四環素MIC≥16 μg/mL，可判為TRNG菌株。

1.3 統計學方法

采用SPSS13.0統計軟件進行χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 敏感性測定

127株淋球菌對青霉素、四環素和環丙沙星的耐藥率較高，而對大觀霉素及頭孢克肟全部敏感，見表1。

表1 江門地區127株淋球菌對6種抗生素耐藥性監測

2.2 PPNG菌株測定

127株淋球菌中產青霉素酶淋球菌（PPNG）48株（37.80%），2010年～2012年PPNG菌株檢出率分別為34.38%（11/32）、38.64%（17/44）、39.22%（20/51），差異無統計學意義（χ2=0.22，P=0.90）。

2.3 TRNG菌株測定

127株淋球菌中高水平耐四環素淋球菌（TRNG）51株（40.16%），2010年～2012年TRNG菌株檢出率分別為37.50%（12/32）、40.91%（18/44）、41.18%（21/51），差異無統計學意義（χ2=0.13，P=0.94）。

3 討 論

美國疾病控制中心認為當一種抗生素的耐藥菌百分率超過5%時，該藥就不作為臨床治療的一線藥物，隨著抗生素的廣泛使用及細菌的變異，淋球菌的耐藥菌株也日益增多。研究發現，淋球菌耐藥性由質粒和染色體介導，隨著質粒介導的高度耐青霉素菌株的出現及傳播，我國早已不推薦青霉素作為治療淋病的首選藥物，本次監測的127株淋球菌中75.59%耐青霉素，低于曹文苓[2]等報道的90.90%（χ2=8.22，P=0.00），低于本地區2008年報道[3]的92.50%（χ2=9.56，P=0.00），對青霉素敏感的淋球菌株近年來出現增加趨勢，原因目前尚不清楚，但2010年～2012年PPNG菌株分別為34.38%、38.64%、39.22%，仍維持在較高水平。TRNG是質粒介導的高水平耐四環素的菌株，監測發現88.97%淋球菌株耐四環素，其中TRNG51株（40.16%），其MIC502012年為16 μg/mL，雖然青霉素和四環素不再作為治療淋病的首選藥物，但是PPNG和TRNG流行率仍是淋球菌耐藥性流行病學的重要監測指標。監測中未發現對環丙沙星敏感菌株，其耐藥率高達92.13%，與牛玉峰[4]報道的95.80%相符（χ2=1.49，P=0.29），與本地2008年報道的62.50%相比明顯增長（χ2=27.63，P=0.00），且其MIC90由2010年的8 μg/mL上升到2012年的16 μg/mL，說明近幾年本地區淋球菌對環丙沙星的耐藥快速增加，耐喹諾酮類淋球菌的流行維持在較高水平，研究發現[5]其耐藥機制主要是由于DNA促旋酶A亞單位（gyrA）和拓撲異構酶IV（parC）基因內的氟喹諾酮耐藥決定區突變所致，我們在臨床治療中應盡量避免使用此類藥物。

大觀霉素屬于氨基糖苷類抗生素，其對PPNG、TRNG菌株及耐喹諾酮類藥物的淋球菌株敏感性都較好，本地區2009年～2012年連續4年監測暫未發現耐大觀霉素菌株，同吳愛明[6]的報道相近，且MIC90為32 μg/mL仍在敏感性范圍，其仍可作為本地區治療淋病的首選藥物，耐大觀霉素菌株世界范圍內雖少見，但國內外已陸續報道發現耐大觀霉素菌株，因此仍需密切觀察。監測發現頭孢曲松的抗菌活性仍較強，127株淋球菌中敏感株為77.95%，略高于劉小鳳[7]報道的珠海地區的62.90%，且頭孢曲松MIC90為0.06 μg/mL時仍在敏感范圍，其可作為本地區治療淋病的一線藥物。目前本地雖未發現耐頭孢曲松菌株，但香港[8]已有應用頭孢曲松治療淋病失敗的報道，且在2011年日本[9]報道發現首例對頭孢曲松高度耐藥菌株，海南地區[10]也檢出了耐頭孢曲松的淋球菌株，本研究發現其MIC90也由2010年的0.03 μg/mL上升至2012年的0.06 μg/mL，所以臨床還應密切監測耐頭孢曲松淋球菌株的流行狀態。監測中我們發現作為口服類用藥的第三代頭孢菌素藥物頭孢克肟

100%對淋球菌敏感，也可作為本地治療淋病的首選藥物，早在2010年美國疾病控制中心淋病治療指南中就已明確指出單純性子宮頸、尿道和直腸淋球菌感染可單次頓服頭孢克肟400 mg治療，國內陳潔華在2011

年也報道了其在治療單純性女性生殖系統淋球菌感染中療效顯著，但目前有關頭孢克肟的監測報道較少，臨床中應給予高度關注。

[1] The WHO Western Pacific Gonococcal Ant imicrobial Surveillance Programme.Survei llance of antibiotic resistance in Neisseria gonorrh oeae in the WHO Western Pacific Region,2004[J].Commun Dis Intell,2006,30(1):129-132.

[2] 曹文苓,黎小東,畢超,等.某地區淋球菌對6種抗生素耐藥性的結果分析[J].國際檢驗醫學雜志,2011,32(19):2205-2206.

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[4] 牛玉峰.120株淋球菌對5種抗菌藥耐藥情況分析[J].檢驗醫學與臨床,2011,8(13):1580-1581.

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[6] 吳愛明.姜堰市淋球菌耐藥性分析[J].中國誤診學雜志,2012, 12(5):1119-1120.

[7] 劉小鳳,伍昆,,吳興中,等.珠海地區淋球菌對抗生素的耐藥性分析[J].皮膚性病診療學雜志,2011,18(3):163-165.

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[9] Ohnishi M,Golparian D,Shimuta K,et al.Is Neisseria gonorrhoeae initiating a future era of untreatable gonorrhea:detailed characterization of the first strain with high-level resistance to ceftriaxone[J].Antimicrob Agents Chemother,2011,55(7):3538-3545.

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The Analysis of Antimicrobial Susceptibility of 127 Neisseria Gonorrhoeae in A District from 2011~2012

HUANG Hai-hua, ZHANG Huan-mei, LIANG Pei-chan
(Department of Dermatology, Jiangmen Skin Hospital, Jiangmen 529000, China)

ObjectiveTo survey the susceptibility and trend of Neisseria gonorrhoeae to antibioticagets in Jiangmen from 2010 to 2012.Methods127 Neisseria gonorrhoeae strains were observed for their susceptibility to six antibiotics, agard lution method was used to detect minimal inhibitory concentration (MIC) of antimicrobial agents and high-level tetracycline-resistance of Neisseria gonorrhoeae(TRNG),the production of β-lactamase was dectermined by paper acidometric method.ResultsThe percentage of Neisseria gonorrhoeae strains sensitive to Spectinomycin,cefixime and ceftriaxone was 100%,100% and 77.95%,the percentage of Neisseria gonorrhoeae strains resistent to ciprofloxacin was 92.13%;48(37.80%) strains were penicillinase-producing Neisseria gonorrhoeae (PPNG),51(40.16%) strains were TRNG.ConclusionThe Neisseria gonorrhoeae isolates are highly resistant to penicillin,tetracycline and ciprof loxacin,spectinomycin and cefixime should be used the first-line drugs for the treatment of Neisseria gonorrhoeae in Jiangmen.

Neisseria gonorrhoeae; Antibiotics; Susceptibility

R378.16

B

1671-8194（2014）22-0012-02