不同程度頸動(dòng)脈硬化患者中血清ox－LDL水平變化及意義

邢 影，張首平，李松濤，李 飛，侯玲玲＊

不同程度頸動(dòng)脈硬化患者中血清ox－LDL水平變化及意義

邢 影1，張首平2，李松濤1，李 飛1，侯玲玲2＊

（1.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)一科，吉林長(zhǎng)春130033；2.吉林大學(xué)第四醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，吉林長(zhǎng)春130011）

動(dòng)脈粥樣硬化性疾病（AS）為一大類以血管病變?yōu)榛A(chǔ)的疾病，屬于全身血管性疾病。近來(lái)AS成了醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)問(wèn)題，大量研究顯示氧化低密度脂蛋白（ox－LDL）的增加而非LDL的增加在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生及發(fā)展中都起了關(guān)鍵性作用，ox－LDL還在AS的基礎(chǔ)上進(jìn)一步形成動(dòng)脈粥樣硬化斑塊、血管狹窄、甚至斑塊脫落及血栓形成中起到重要的促進(jìn)作用。故明確ox－LDL在AS中的功能及作用機(jī)制，盡早采取有效的治療措施，對(duì)于阻止或延緩動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展，一定程度上改善患者的臨床預(yù)后具有重要意義。

1 資料與方法

1.1研究對(duì)象

收集臨床病例時(shí)間為2013年1月－2013年12月期間，地點(diǎn)為吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)一科，病人來(lái)源為因各種神經(jīng)科疾病并伴有動(dòng)脈粥樣硬化的住院病人240人和同期門診健康體檢者80人。

1.2入選與排除標(biāo)準(zhǔn)

入選標(biāo)準(zhǔn)：所有入選患者均經(jīng)頸動(dòng)脈多普勒彩色超聲證實(shí)存在不同程度頸動(dòng)脈粥樣硬化（CAS），并根據(jù)彩色多普勒超聲儀器檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)劃分結(jié)果，選取動(dòng)脈內(nèi)－中膜光滑，且頸動(dòng)脈內(nèi)－中膜厚度（IMT）＜1.0mm者為正常對(duì)照；1.0mm≤頸動(dòng)脈內(nèi)－中膜厚度（IMT）＜1.2mm定義為頸動(dòng)脈內(nèi)膜增厚；當(dāng)IMT≥1.2mm或達(dá)到臨近部位IMT值的1.5倍以上，且增厚的血管內(nèi)膜向管腔內(nèi)部凸起有粥樣斑塊樣物質(zhì)形成，定義為頸動(dòng)脈斑塊；根據(jù)中國(guó)CDFI診斷標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)頸動(dòng)脈彩超檢查，頸內(nèi)動(dòng)脈狹窄段收縮期峰值流速≥155cm／s，頸內(nèi)動(dòng)脈狹窄段血管舒張期末流速≥60cm／s，頸內(nèi)動(dòng)脈狹窄段收縮期峰值流速／頸總動(dòng)脈遠(yuǎn)段收縮期峰值流速≥2.0，頸內(nèi)動(dòng)脈狹窄段收縮期峰值流速／狹窄遠(yuǎn)段血管收縮期峰值流速≥1.6可定義為頸動(dòng)脈血管狹窄率達(dá)到50%以上。狹窄組患者均經(jīng)過(guò)頸部CTA證實(shí)。軟斑表現(xiàn)為動(dòng)脈內(nèi)膜突入到血管腔內(nèi)的弱回聲或混合性回聲型。硬斑表現(xiàn)為斑塊表面光滑，回聲強(qiáng)，且后方有明顯的聲影或聲衰減。潰瘍斑表現(xiàn)為斑塊形態(tài)不規(guī)則，表面不光滑，潰瘍邊緣回聲較低，有時(shí)呈壁龕樣影像。

排除標(biāo)準(zhǔn)：近2個(gè)月內(nèi)未應(yīng)用炎癥抑制藥物如非甾體類抗炎藥、類固醇、免疫抑制劑及鴉片類藥物等可影響血清中氧化型低密度脂蛋白水平的藥物，同時(shí)除外動(dòng)脈夾層、放療后頸部血管狹窄、纖維肌發(fā)育不良、動(dòng)脈瘤等疾病導(dǎo)致的血管狹窄等疾病。

1.3分組

1.3.1 對(duì)照組 80例，為同期門診健康體檢者，其中男性40例、女性40例，平均年齡55.60±5.89歲，均無(wú)高血壓、冠心病、糖尿病、吸煙及酗酒史、卒中家族史等腦血管危險(xiǎn)因素。

1.3.2 實(shí)驗(yàn)組 240例，為伴有頸動(dòng)脈硬化的各種類型神經(jīng)科疾病住院患者。實(shí)驗(yàn)組患者依據(jù)頸部血管彩超進(jìn)行血管內(nèi)膜增厚程度分級(jí)：分為頸動(dòng)脈內(nèi)膜增厚組即1.0mm≤IMT＜1.2mm（A組80例，男女各40例，年齡平均在56.60±5.37歲）、頸動(dòng)脈斑塊組即IMT≥1.2mm，但血管徑狹窄率＜50%（B組80例，其中軟斑及混合斑塊B1組40例，男女各20例，年齡平均在55.50±5.28歲；硬斑B2組40例，男女各20例，年齡平均在54.90±5.78歲）、頸動(dòng)脈狹窄組即血管徑狹窄率＞50%（C組80例，男女各40例，年齡平均在56.60±5.86歲）三組。實(shí)驗(yàn)組所有受試人群再次按照臨床癥狀劃分為腦血管病組及非腦血管病組。在實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組中，年齡及性別比較后差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.4主要試劑與儀器

標(biāo)準(zhǔn)品，樣本稀釋液，檢測(cè)抗體－HRP，20x洗滌緩沖液，ELISA試劑盒（底物A，底物B，終止液，上海科興生物科技有限公司），恒溫箱（北京福意電器有限公司），分光光度計(jì)（上海元析儀器有限公司），Vivid7型彩色多普勒超聲儀（美國(guó)GE公司）；CTA（德國(guó)KUKA公司）.

1.5實(shí)驗(yàn)方法

1.5.1 檢測(cè)部位：選取3個(gè)位點(diǎn)：頸總動(dòng)脈的遠(yuǎn)端（頸內(nèi)外動(dòng)脈分叉連線下方1－1.5cm處），頸內(nèi)動(dòng)脈起始處（分叉上方1－1.5cm處），頸動(dòng)脈分叉處。

1.5.2 記錄各組患者頸內(nèi)動(dòng)脈收縮期及舒張期血流速度，計(jì)算比值，判定血管狹窄的程度。

1.5.3 所有受試患者均按要求在入院后次日清晨空腹?fàn)顟B(tài)下采集靜脈血約2ml，標(biāo)本采集后存放于真空管中，經(jīng)離心處置，提取血清并存放于－20℃以下溫度保存，應(yīng)用Elisa試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，所用數(shù)據(jù)均行正態(tài)分布檢驗(yàn)，正態(tài)分布的計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ˉx±s）表示；兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較應(yīng)用方差分析，兩兩比較采用LSD法；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.01為差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1血清中ox－LDL水平在不同程度動(dòng)脈硬化組中的比較

研究結(jié)果顯示，頸動(dòng)脈內(nèi)膜增厚組（A組）、頸動(dòng)脈斑塊組（B組）、頸動(dòng)脈狹窄組（C組）三組患者血清中ox－LDL水平均較對(duì)照組增高，其中，C組的ox－LDL水平高于B組，B組的ox－LDL水平高于A組，表明頸動(dòng)脈硬化患者血清中ox－LDL水平隨CAS程度的加重而增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（見(jiàn)圖1）。

圖1 血清中ox－LDL水平在對(duì)照組及不同程度動(dòng)脈硬化組中的比較

2.2血清中ox－LDL水平在軟斑、混合斑組（B1組）及硬斑組（B2組）的分布規(guī)律

研究結(jié)果顯示，B1組的血清ox－LDL水平高于B2組，表明血清ox－LDL水平與頸動(dòng)脈斑塊的穩(wěn)定性呈負(fù)相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（見(jiàn)圖2）。

圖2 血清中ox－LDL水平在B1和B2組中的比較

2.3血清中ox－LDL水平在腦血管病組及非腦血管病組的分布規(guī)律

研究結(jié)果顯示：腦血管病組及非腦血管病組的血清中ox－LDL水平無(wú)明顯差異，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（見(jiàn)圖3）。

圖3 血清中ox－LDL水平在各亞組中的比較

3 討論

動(dòng)脈粥樣硬化性腦卒中目前呈年輕化趨勢(shì)，發(fā)病率及死亡率逐年增高，嚴(yán)重威脅著人類的健康［1］，許多危險(xiǎn)因素促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展，據(jù)研究發(fā)現(xiàn)在動(dòng)脈粥樣硬化的形成初始階段是ox－LDL的增加起了關(guān)鍵性作用，進(jìn)一步形成動(dòng)脈粥樣硬化斑塊，ox－LDL甚至參與血管狹窄，斑塊脫落及血栓形成，導(dǎo)致相當(dāng)嚴(yán)重的后果［2］。

本研究的結(jié)果顯示A、B、C三組患者血清中ox－LDL水平均較對(duì)照組增高，其中，C組高于B組，B組高于A組，說(shuō)明了血清中ox－LDL增高導(dǎo)致內(nèi)膜損傷并進(jìn)一步增厚，具有促進(jìn)動(dòng)脈發(fā)生粥樣硬化的作用。這一結(jié)論與大多數(shù)文獻(xiàn)相符。已有的研究指出了在AS發(fā)展的進(jìn)程中主要的“有害的”物質(zhì)被定為ox－LDL［3］。有學(xué)者［4］用兔頸總動(dòng)脈制造了LDL和ox－LDL導(dǎo)致血管內(nèi)膜增厚的兩種體內(nèi)模型，驗(yàn)證了ox－LDL對(duì)動(dòng)脈內(nèi)膜增厚起了正相關(guān)的作用。大量文獻(xiàn)指出：血清中ox－LDL誘導(dǎo)的毒性作用存在于動(dòng)脈粥樣硬化的起始階段，并積極促進(jìn)動(dòng)脈硬化加重發(fā)展的各個(gè)階段［5］。甚至在急性冠脈綜合征及血栓事件中也起著重要的促進(jìn)作用［6］。

同時(shí)研究結(jié)果顯示血清中ox－LDL在動(dòng)脈狹窄組中的表達(dá)水平明顯高于健康對(duì)照組、內(nèi)膜增厚組以及斑塊組，說(shuō)明了血清中ox－LDL水平增高可促進(jìn)動(dòng)脈狹窄的發(fā)生及加重。有研究發(fā)現(xiàn)，頸動(dòng)脈狹窄患者的血漿ox－LDL水平顯著高于健康人群［7］。另外頸動(dòng)脈狹窄大于50%的患者ox－LDL水平顯著高于正常人群，且更容易發(fā)生心腦血管事件［8］。還有研究者提出ox－LDL水平可能是動(dòng)脈狹窄的一個(gè)度量指標(biāo)［9］。有人［10］通過(guò)實(shí)驗(yàn)向家兔靜脈注入放射性標(biāo)記的LDL，證明了血漿中的LDL和ox－LDL可以被動(dòng)脈內(nèi)膜攝取，且ox－LDL累積在內(nèi)膜的程度遠(yuǎn)多于LDL，動(dòng)脈粥樣硬化斑塊積聚大量的ox－LDL，從而促進(jìn)AS的進(jìn)展，甚至斑塊堵塞血管。

在B1與B2兩組中，血清中ox－LDL在前者中表達(dá)水平明顯高于后者中；這說(shuō)明了血清中ox－LDL水平增高可促進(jìn)動(dòng)脈斑塊的形成及加重，血清中ox－LDL水平增高可加重斑塊的不穩(wěn)定性，另一方面不穩(wěn)定斑塊中也可以向血液中釋放游離的ox－LDL，導(dǎo)致血液中ox－LDL水平進(jìn)一步增高。有學(xué)者通過(guò)實(shí)驗(yàn)得出結(jié)論，早期動(dòng)脈粥樣硬化病變，ox－LDL在血管平滑肌細(xì)胞有陽(yáng)性的BAX表達(dá)，從而促進(jìn)這些細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞凋亡；在斑塊形成的過(guò)程中，ox－LDL陽(yáng)性表達(dá)的內(nèi)膜領(lǐng)域表現(xiàn)出較高的BAX免疫反應(yīng)，而這可能導(dǎo)致斑塊不穩(wěn)定和破裂［11］，由此可見(jiàn)ox－LDL與斑塊的性質(zhì)關(guān)系密切。

同時(shí)，為了檢測(cè)ox－LDL與腦血管病的發(fā)生有無(wú)關(guān)系，我們分析了入組患者中以腦血管病起病的患者和非血管病入院患者血清中ox－LDL的變化水平，結(jié)果顯示：腦血管病組及其他疾病組的血清中ox－LDL水平無(wú)明顯差異，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這表明血清中ox－LDL水平的增減與腦血管病癥狀無(wú)相關(guān)性，說(shuō)明ox－LDL是AS的形成的促進(jìn)因素，但ox－LDL水平并不能作為檢測(cè)腦血管病發(fā)病癥狀的敏感指標(biāo)。因本實(shí)驗(yàn)的樣本量較小，還有待于日后進(jìn)一步大量臨床試驗(yàn)的論證。

綜上，本研究通過(guò)測(cè)定不同程度AS與健康對(duì)照組患者的血清ox－LDL水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)患者血清ox－LDL水平與頸動(dòng)脈粥樣硬化嚴(yán)重程度呈正相關(guān)；ox－LDL水平增高可增加動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的不穩(wěn)定性，ox－LDL的升高可促進(jìn)斑塊的碎裂及脫落，血清中ox－LDL水平與腦血管病癥狀無(wú)相關(guān)性。因此，它可以作為評(píng)估患者動(dòng)脈粥樣硬化程度及斑塊穩(wěn)定性的一個(gè)重要指標(biāo)。這些都有待于日后大樣本的實(shí)驗(yàn)及臨床觀察及進(jìn)一步研究驗(yàn)證。

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2014－03－19）

1007－4287（2014）12－2003－03

吉林省科技支撐計(jì)劃重點(diǎn)科技攻關(guān)項(xiàng)目（20130206055SF）

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