趨化因子受體CXCR7在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及意義

袁 軍，張勝超，鄭如恒

趨化因子受體CXCR7在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及意義

袁 軍，張勝超，鄭如恒

（復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院青浦分院胸外科，上海201700）

目的探討非小細(xì)胞肺癌組織中趨化因子受體CXCR7的表達(dá)及其臨床意義。方法采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)經(jīng)外科手術(shù)切除的86例非小細(xì)胞肺癌組織及34例癌旁組織標(biāo)本中CXCR7的表達(dá)情況。結(jié)果全部非小細(xì)胞肺癌組織均異常表達(dá)CXCR7，高表達(dá)率達(dá)52.3%（45／86），在對(duì)照組中CXCR7均為陰性表達(dá)。CXCR7在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的高表達(dá)率為62.96%（34／54），在無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的高表達(dá)率為34.38%（11／32），兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；CXCR7的高表達(dá)率均隨TNM分期的增高而逐漸增高，且Ⅱ、Ⅲ期的高表達(dá)率明顯高于Ⅰ期，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論CXCR7高表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌的淋巴轉(zhuǎn)移及臨床分期相關(guān)，提示CXCR7與非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生發(fā)展存在相關(guān)性。

肺癌；趨化因子受體；CXCR7

（Chin J Lab Diagn，2014，18：1954）

目前，肺癌是對(duì)人類(lèi)健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一。趨化因子／受體參與多種生物學(xué)過(guò)程，腫瘤、炎癥以及免疫機(jī)制等也需要趨化因子及其受體網(wǎng)絡(luò)緊密的將其聯(lián)系起來(lái)，在腫瘤的發(fā)生、侵襲及轉(zhuǎn)移等多個(gè)環(huán)節(jié)均發(fā)揮著重要的作用［1］。過(guò)去認(rèn)為，趨化因子CXCL12的唯一受體是CXCR4，然而，最近的研究發(fā)現(xiàn)尚存在CXCR7這一新的受體，在腫瘤發(fā)展過(guò)程中，CXCL12／CXCR7生物軸起著重要作用［2］。本文通過(guò)檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）組織中的CXCR7表達(dá)情況，探討CXCR7在NSCLC發(fā)生發(fā)展中的作用。

1 材料與方法

1.1材料

收集我院2011年1月至2013年6月接受手術(shù)治療的NSCLC患者標(biāo)本86例，術(shù)前均未接受化療。其中男52例，女34例，年齡38－80歲，平均年齡（59.3±11.6）歲；肺鱗癌51例，肺腺癌23例，肺腺鱗癌12例；伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的54例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的32例；按WHO肺癌TNM標(biāo)準(zhǔn)分級(jí)、分期：低分化42例，中分化33例，高分化11例；I期28例，Ⅱ期24例，Ⅲ期34例。另取34例患者的癌旁組織（距癌組織5cm以上）作為對(duì)照組。

1.2方法

1.2.1 免疫組織化學(xué)染色

采用免疫組織化學(xué)SP法，由福州邁新公司提供SP試劑盒。所獲標(biāo)本經(jīng)10%甲醛溶液固定后，常規(guī)石蠟包埋，切片，厚度為4μm。高壓抗原熱修復(fù)，3%H2O2阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，滴加1∶100小鼠抗人單克隆抗體，4℃過(guò)夜，PBS沖洗，滴加生物素標(biāo)記二抗工作液，室溫孵育10min；滴加鏈霉菌抗生物素－過(guò)氧化物酶溶液，室溫孵育10min，PBS沖洗；DAB顯色，蘇木素復(fù)染。陽(yáng)性對(duì)照用已知的陽(yáng)性切片，陰性對(duì)照采用PBS代替一抗。

1.2.2 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

以細(xì)胞質(zhì)和（或）細(xì)胞膜出現(xiàn)黃色或棕黃色顆粒為陽(yáng)性。評(píng)定和分析標(biāo)準(zhǔn)：每例均隨機(jī)觀察≥5個(gè)高倍視野（＞400），每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，陽(yáng)性細(xì)胞率＝陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)／觀察細(xì)胞數(shù)×100%。陽(yáng)性細(xì)胞率計(jì)分標(biāo)準(zhǔn)：0分為＜5%，1分為6%－25%，2分為26%－50%，3分為51%－75%，4分為75%以上。染色強(qiáng)度：1分為淺黃色，2分為棕黃色，3分為棕褐色。陽(yáng)性細(xì)胞率乘以染色強(qiáng)度即為最后得分：0分為陰性（－），1－2分為弱陽(yáng)性（＋），3－6分為中度陽(yáng)性（＋＋），超過(guò)6分為強(qiáng)陽(yáng)性（＋＋＋）。低表達(dá)為（－）和（＋），高表達(dá)為（＋＋）和（＋＋＋）。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，兩樣本率的比較釆用四格表資料的χ2檢驗(yàn)，多樣本率的比較采用行×列表資料的χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1CXCR7在非小細(xì)胞肺癌組織和正常組織中的表達(dá)

全部NSCLC組織均異常表達(dá)CXCR7蛋白，NSCLC組織中的高表達(dá)率達(dá)52.3%（45／86）；在對(duì)照組中CXCR7均為陰性表達(dá)。

2.2CXCR7與NSCLC臨床病理特征的關(guān)系

組間差異比較結(jié)果顯示，CXCR7高表達(dá)率與入組患者的年齡、性別、腫瘤大小、組織學(xué)分型及分化程度無(wú)關(guān)（P＞0.05）。CXCR7在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的高表達(dá)率為62.96%（34／54），在無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的高表達(dá)率為34.38%（11／32），兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；CXCR7的高表達(dá)率均隨TNM分期的增高而逐漸增高，且Ⅱ、Ⅲ期的高表達(dá)率明顯高于Ⅰ期，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.0 5）。見(jiàn)表1。

3 討論

趨化因子指的是具有趨化作用的細(xì)胞因子，能將免疫細(xì)胞吸引至免疫應(yīng)答部位，參與免疫調(diào)節(jié)和免疫病理反應(yīng)。一般認(rèn)為，不同的器官由于不同趨化因子的存在，因此產(chǎn)生不同的趨化或募集作用，驅(qū)使腫瘤細(xì)胞向相應(yīng)器官選擇性地轉(zhuǎn)移。CXCL12／CXCR4軸可通過(guò)活化胞內(nèi)信號(hào)通路使得多種腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖加快。在未發(fā)現(xiàn)CXCR7時(shí)，認(rèn)為在某些情況下，CXCL12和CXCR4功能和分布的匹配尚不能做到，即當(dāng)CXCLl2發(fā)揮作用時(shí)，CXCR4的有效濃度不是很高［3］。CXCR7屬于趨化因子受體家族CXCR類(lèi)的成員之一，在正常的細(xì)胞表面基本不表達(dá)或僅有微弱的表達(dá)，但在腫瘤細(xì)胞的表面的表達(dá)明顯的上調(diào)。在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中，CXCR7同樣起著重要的作用［4］。Miao［5］等通過(guò)免疫組織化學(xué)法檢測(cè)出人類(lèi)大多數(shù)常見(jiàn)腫瘤，比如肺癌、乳腺癌、宮頸癌、腎癌和橫紋肌肉瘤，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在各種腫瘤組織中均有CXCR7表達(dá)。

表1 不同臨床病理指標(biāo)的NSCLC中CXCR7蛋白的表達(dá)

本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用免疫組化方法觀察到，在NSCLC組織中CXCR7呈異常表達(dá)，CXCR7的高表達(dá)率達(dá)52.3%，而在癌旁組織中未見(jiàn)CXCR7表達(dá)，提示CXCR7可能與NSCLC的發(fā)生有關(guān)。Hartmann等［6］研究表明，癌細(xì)胞上的CXCR4－CXCR7在跨膜轉(zhuǎn)移過(guò)程中首先與CXCLl2相互作用，產(chǎn)生并激活整合LFA－l和VLA－4，再黏附到CXCL12＋內(nèi)皮細(xì)胞上，CXCR4和CXCR7均獨(dú)立發(fā)揮作用。本研究還發(fā)現(xiàn)，CXCR7的高表達(dá)也與NSCLC的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，提示通過(guò)檢測(cè)CXCR7有助于了解NSCLC的淋巴轉(zhuǎn)移、臨床分期等情況，可能成為判斷病人預(yù)后的指標(biāo)之一。Grymula等［7］對(duì)橫紋肌肉瘤研究發(fā)現(xiàn)，在CXCL12的激活下，高表達(dá)的CXCR7可以使（M A PK）p42／44及AKT磷酸化通路激活，使細(xì)胞的移動(dòng)能力、遷移方向、細(xì)胞黏附力及金屬蛋白酶（M M P）的表達(dá)量受到調(diào)節(jié)。在免疫缺陷小鼠體內(nèi)經(jīng)CXCR7轉(zhuǎn)染的人肺癌細(xì)胞株能長(zhǎng)成較大的腫瘤，siRNA下調(diào)CXCR7表達(dá)的細(xì)胞株腫瘤體積則相對(duì)較小，說(shuō)明CXCR7能夠使腫瘤細(xì)胞的存活和增殖加快。研究發(fā)現(xiàn)，在非小細(xì)胞肺癌中CXCR7高表達(dá)者腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)率明顯增高［8］。

總之，CXCR7的高表達(dá)與NSCLC的發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移均有著十分密切的關(guān)系，有望成為評(píng)估NSCLC進(jìn)展和判斷預(yù)后的一個(gè)重要的指標(biāo)。在今后，應(yīng)加強(qiáng)在NSCLC中CXCR7與腫瘤轉(zhuǎn)移的具體作用機(jī)制及信號(hào)通路的實(shí)驗(yàn)研究。

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Expression and significance of chemokine receptor CXCR7 in non small cell lung cancer

YUAN Jun，ZHANG Shengchao，ZHENG Ru－h(huán)eng.（Department of Thoracic Surgery，Zhongshan Hospital Affiliated to Fudan University Qingpu Branch，Shanghai 201700，China）

ObjectiveTo investigate the expression of chemokine receptor CXCR7in non small cell lung cancer and its clinical significance.MethodsImmunohistochemistry was used to detect the expression of 86cases of non small celllung cancer surgical operation excision and 34cases of paracancerous tissues in CXCR7.ResultsAll the non small cell lung cancer tissues were abnormal expression of CXCR7，the high expression rate was 52.3%（45／86）.There had negative expression of CXCR7in the control group were.The high expression of CXCR7in lymph node metastasis rate was 62.96%（34／54），in the absence of high expression of lymph node metastasis rate was 34.38%（11／32），the difference was statistically significant（P＜0.05）.The high expression of CXCR7increased as the TNM staging was gradually increased，and the high expression ofⅡ，Ⅲperiod was significantly higher than that of I，the difference was statistically significant（P＜0.05）.ConclusionThe high expression of CXCR7and lymph node metastasis and clinical staging of non small cell lung cancer and correlation，suggesting that CXCR7in non small cell lung cancer and had significant correlation development.

lung cancer；chemokine receptor；CXCR7

R734.2

：A

袁軍（1974－），男，主治醫(yī)師，研究方向：肺癌綜合治療。

2014－02－15）

1007－4287（2014）12－1954－03