川崎病患兒血清IL-10、IL-18和TNF-α與冠狀動脈損傷的關系

劉 霞，王 鷹，何 睛

（桂林市人民醫院檢驗科，廣西 桂林 541002）

川崎病患兒血清IL-10、IL-18和TNF-α與冠狀動脈損傷的關系

劉 霞，王 鷹，何 睛

（桂林市人民醫院檢驗科，廣西 桂林 541002）

目的探討川崎病(KD)患兒外周血血清白細胞介素-10(IL-10)、白細胞介素-18(IL-18)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平的動態改變及其與冠脈損傷的關系。方法選取我院2009年1月至2012年12月期間住院的KD患兒73例，根據冠狀動脈損傷情況分為無冠狀動脈損傷組(NCAL組)和伴冠狀動脈損傷組(CAL組)，以同期門診體檢健康兒童30例作為正常對照。采用ELISA法檢測患兒血清IL-10、IL-18和TNF-α水平，并與正常對照組進行比較分析，其中KD患兒分別于急性期和亞急性期各檢測一次。結果KD患兒急性期和亞急性期的血清IL-10、IL-18和TNF-α水平均顯著高于對照組，KD急性期的IL-10、IL-18和TNF-α水平均顯著高于其亞急性期(P＜0.01)。IL-10水平在NCAL組顯著高于CAL組，CAL組顯著高于對照組；CAL組的IL-18和TNF-α水平顯著高于NCAL組，NCAL組顯著高于對照組(P＜0.01)。結論IL-10、IL-18和TNF-α可作為KD早期診斷的重要指標，動態觀察其濃度變化具有預測冠狀動脈損傷的價值。

川崎病；白細胞介素-10；白細胞介素-18；腫瘤壞死因子-α；冠狀動脈損傷

川崎病(KD)又稱皮膚黏膜淋巴結綜合征，是一種急性發熱性系統性血管炎綜合征，冠脈損傷是最嚴重的并發癥，其發病機制較復雜，免疫系統的高度活化和免疫損傷性血管炎是KD的顯著性特征。本研究旨在探討白細胞介素-10(IL-10)、白細胞介素-18 (IL-18)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)在KD患兒血清中的變化及與冠狀動脈病變的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2009年1月至2012年12月在本院兒科住院的73例川崎病患兒(KD組)，36例為無冠狀動脈損傷組(NCAL組)，37例為伴冠狀動脈損傷組(CAL組)，診斷及冠狀動脈損傷符合《諸福棠實用兒科學》(第7版)的診斷標準[1]。其中男性39例，女性34例，發病時平均年齡為(42±10)個月。選取同期門診體檢健康兒童30例作為正常對照組，其中男性16例，女性14例，平均年齡(40±9)個月。兩組兒童在年齡、性別方面差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 標本采集 KD患兒于急性期(0～2周)與亞急性期(2～4周)和正常對照組體檢時采集靜脈血3 ml，以3 000 r/min離心10 min，分離血清置-20℃冰箱保存備用。

1.3 檢測方法 采用ELISA方法檢測，IL-10、IL-18和TNF-α檢測試劑盒由深圳晶美生物工程有限公司提供，其中IL-10試劑批號為20130306，IL-18試劑批號為20130327，TNF-α試劑批號為20130424，嚴格按說明書進行操作。酶標儀為芬蘭Labsystem公司Multiskan MK3型。

1.4 統計學方法 應用SPSS13.0統計學軟件進行數據分析，檢測結果以均數±標準差()表示，組間分析采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組血清IL-10、IL-18和TNF-α水平比較 KD急性期三個指標顯著高于KD亞急性期，KD亞急性期三個指標顯著高于正常對照組(P＜0.01)，見表1。

表1 三組血清IL-10、IL-18和TNF-α水平比較（，pg/ml）

表1 三組血清IL-10、IL-18和TNF-α水平比較（，pg/ml）

注：KD急性期與KD亞急性期比較，aP＜0.01，KD亞急性期與對照組比較，bP＜0.01。

KD組急性期亞急性期正常對照組73 73 30 28.6±7.1a15.3±4.9b6.5±1.8 170.2±51.3a94.5±31.6b 58.2±15.4 15.2±4.6a9.8±2.7b5.9±1.5

2.2 CAL組、NCAL組急性期和正常對照組血清IL-10、IL-18和TNF-α水平比較 IL-10水平NCAL組顯著高于CAL組、CAL組顯著高于正常對照組；IL-18和TNF-α水平CAL組顯著高于NCAL組、NCAL組顯著高于正常對照組(P＜0.01)，見表2。

表2 CAL組、NCAL組急性期和正常對照組血清IL-10、IL-18和TNF-α水平比較（，pg/ml）

表2 CAL組、NCAL組急性期和正常對照組血清IL-10、IL-18和TNF-α水平比較（，pg/ml）

注：CAL組與無CAL組比較，aP＜0.01；NCAL組與對照組比較，bP＜0.01。

組別CAL組NCAL組正常對照組例數37 36 30 IL-10(pg/ml) 22.4±3.6a34.1±7.7b6.5±1.8 IL-18(pg/ml) 232.8±62.5a124.0±37.3b58.2±15.4 TNF-α(pg/ml) 22.7±5.8a10.5±3.0b5.9±1.5

3 討 論

KD是一種以全身血管炎為主要病變的兒童急性發熱、出疹性疾病，它常導致發病患兒冠狀動脈炎、冠狀動脈瘤及血栓形成等臨床表現，對發病患兒的遠期生存質量有著顯著的影響[2]。KD發病機理較為復雜，免疫反應及其產生的細胞因子活性在川崎病的發生、發展和冠狀動脈損傷起著關鍵性作用。近年來，KD的發病率有逐年上升趨勢，是兒童后天獲得性心臟病最常病因之一，因此，臨床對KD的關注度越來越高。研究表明，IL-10、IL-18和TNF-α等細胞因子濃度的變化與KD發生和發展相關。

IL-18是近幾年來新發現的一種分子量為18～19 KD的多肽類物質，其來源主要由單核-巨噬細胞產生，其生物學效應為促進T淋巴細胞增殖及增強CD8+T細胞和NK細胞的細胞毒性作用，同時還具有強大誘生TNF-α和IFN-γ等細胞因子的能力，導致其在介導細胞浸潤、炎性反應和組織器官損傷中起到非常重要的作用，因此IL-18是多種免疫性疾病的重要細胞因子。IL-18在KD發病機制中所起作用可能是在感染病原體的誘發下，激活的炎癥細胞分泌包括IL-18在內的多種活性遞質，此時若易感染個體出現異常的免疫級聯反應，IL-18過度分泌，并誘導產生大量IFN-γ和TNF-α等細胞因子，從而造成血管免疫炎性反應，最終導致KD的發生[3]。IL-18在KD急性期水平顯著高于其亞急性期，CAL組水平顯著高于NCAL組(P＜0.01)，證實其與KD的發生及冠脈的損傷成正相關，這與張本山等[4]的報道一致。

TNF-α是一種具有廣泛生物活性的多肽調節因子，主要由單核-巨噬細胞產生，參與機體多種炎性反應。它的主要生物學效應為作用于血管內皮細胞，導致血小板活化因子及IL-1的釋放，對炎性細胞粘附、浸潤及中性粒細胞脫顆粒，促凝血，在血栓形成、動脈粥樣硬化和DIC等疾病發病機制中有一定意義[5]。血液循環系統中持續釋放的高濃度TNF-α對血管內皮細胞有直接的毒性作用，其機制為通過增強內皮細胞和白細胞上的粘附分子表達，使血液中白細胞與血管內皮細胞之間的粘附作用增強，誘發機體凝血機制，經一系列連鎖反應，產生血栓并阻塞血管，引起血管損傷[6]。麥惠玲[7]研究認為，TNF-α作為一種主要促炎細胞因子，參與了川崎病炎癥和免疫反應發生和發展過程，并與冠狀動脈損傷呈正相關，在川崎病致冠狀動脈損傷的防治并對病情的預后作科學的評估中具有重要循證醫學依據。

IL-10是由Th2細胞分泌的細胞因子合成抑制因子，其來源主要為單核/巨噬細胞、B細胞，其功能為主要調節T、B細胞、NK細胞等的產生，抑制多種免疫活性細胞細胞因子的表達，阻止炎性細胞因子的分泌，還能抑制細胞粘附分子的產生，防止血栓形成等，防止心肌缺血、缺血再灌注損傷，保護心肌，對免疫細胞和免疫分子有雙向調節作用[8]。本研究中KD急性期IL-10水平顯著高于其亞急性期、KD亞急性期水平顯著高于正常對照組(P＜0.01)，并且NCAL組水平顯著高于CAL組(P＜0.01)，表明IL-10分泌是機體免疫系統的一種代償性反應，在KD全身免疫系統過度活化中起重要的負反饋調節作用，對KD炎性細胞因子所介導的內皮細胞損傷具有保護作用。若循環系統中IL-10水平偏低，其濃度不足以拮抗IL-18、TNF-α等炎性因子的作用而引起冠狀動脈損傷，因此血清中IL-10水平可能與KD是否發生冠狀動脈損傷或損傷的嚴重程度有關[9]。

KD血管損傷的機制較復雜，有許多重要理論和學說，免疫炎癥因子是其重要原因之一。血管內皮細胞與血液循環系統中免疫活性細胞間相互粘附和聚集是導致炎癥反應向血管深層浸潤的初始因素，提示血液粘附分子可能介導KD全身循環中的免疫效應細胞向血管局部浸潤，在血管損傷的病理生理發生機制中起重要作用[10-11]。

總之，IL-10、IL-18和TNF-α可作為KD早期診斷的重要實驗室指標，作為循證醫學證據，在KD致CAL的預測和預后評估中具有重要的臨床價值。

[1]胡亞美,江載芳.實用兒科學[M].7版.北京:人民衛生出版社, 2005:698-705.

[2]龔本新,盧宏柱.川崎病患兒血清促炎因子檢測的臨床意義[J].醫學信息,2010,23(12):4481-4482.

[3]劉翠蘭,唐 艷,李 娜.IL-10、IL-18在川崎病患兒血清中水平及其臨床意義[J].中國醫藥指南,2012,10(4):177-178.

[4]張本山,鄭敏翠,李婉麗,等.川崎病患兒IL-10和IL-18表達水平對冠狀動脈的影響[J].中國醫藥導刊,2012,14(5):861-862.

[5]孫 慧,陳榮光,鄭紅梅.川崎病患兒血清IL-6、TNF-α與冠狀動脈損傷的關系[J].湖北醫藥學院學報,2012,31(2):147-149.

[6]李 軍,楊世偉,曹黎明,等.川崎病患兒血清可溶性血管細胞粘附因子-1,腫瘤壞死因子-α水平變化的意義[J].實用兒科臨床雜志,2007,22(9):669-671.

[7]麥惠玲.川崎病患兒治療前后血清腫瘤壞死因子-α的變化及其意義[J].海南醫學,2010,21(22):75-76.

[8]于 俠,孫景輝,王振華.白細胞介素-10基因多態性與感染性疾病的關系研究[J].中國優生與遺傳雜志,2006,14(2):5-6.

[9]孫 飛,沈文娟,馮俊杰.川崎病急性期患兒血清IL-10水平的變化[J].新醫學,2010,41(10):664-665.

[10]Brogan PA,Shah V,Rlein N,et al.Vbeta-restricted T cell adherence to endothelial cells a mechanism for superantigendependent vascular injury[J].Arthritis Rheum,2004,50(2):589-597.

[11]Moiseeva EP,Leyland ML,Bradding P.CADM1 is expressed as multiple alternatively spliced functional and dysfunctional isoforms in human mast cells[J].Mol Immunol,2013,53(4):345-354.

Association among serum IL-10,IL-18 and TNF-α levels in children with Kawasaki disease and coronary artery lesion.

LIU Xia,WANG Ying,HE Jing.
Department of Clinical Laboratory,People's Hospital of Guilin,Guilin 541002,Guangxi,CHINA

ObjectiveTo explore the changes in serum levels of IL-10、IL-18 and TNF-α in children with Kawasaki disease(KD)and its association with coronary artery lesion.MethodsSerum samples were collected from 73 children with KD from Jan 2009 to Dec 2012,which were divided into non-coronary artery lesion group(NCAL) and coronary artery lesion group(CAL)according to the coronary artery damage.Thirty healthy children underwentoutpatient medical examination at the same period were selected as controls.The levels of serum IL-10,IL-18 and TNF-α were detected by ELISA,and then the results were compared.ResultsThe levels of IL-10,IL-18 and TNF-α in children with acute KD and subacute KD were higher than those in the control group;and those with acute KD were higher in than those with subacute KD(P＜0.01).The level of IL-10 in NCAL group was higher than that in CAL group,which in CAL group was also higher than that in the control group.The levels of IL-18 and TNF-α in CAL group were higher than those in NCAL group,which in NCAL group were higher than that in the control group (P＜0.01).Conclusion IL-10、IL-18 and TNF-α could be important indexes for early diagnosis of KD,and the dynamic observation of their changes could predict the coronary artery lesion.

Kawasaki disease(KD);IL-10;IL-18;TNF-α;Coronary artery lesion

R725.9

A

1003—6350（2014）14—2095—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.14.0811

2013-12-27)

劉 霞。E-mail：zhaoxia1008@163.com