不同麻醉方法對婦科惡性腫瘤根治術患者NK細胞的影響

喻淑慶，張鐵軍

(1.湖北省婦幼保健院麻醉科，湖北 武漢 430070；2.武漢大學口腔醫院麻醉科，湖北 武漢 430070)

不同麻醉方法對婦科惡性腫瘤根治術患者NK細胞的影響

喻淑慶1，張鐵軍2

(1.湖北省婦幼保健院麻醉科，湖北 武漢 430070；2.武漢大學口腔醫院麻醉科，湖北 武漢 430070)

目的 探討不同全身麻醉方法對婦科惡性腫瘤根治術患者外周血自然殺傷細胞(NK細胞)的影響。方法 將60例ASAⅠ或Ⅱ級擇期行婦科惡性腫瘤根治術的患者納入本研究。將患者隨機分為三組(n=20)，Ⅰ組患者采用全憑靜脈麻醉，以咪達唑侖、瑞芬太尼、順苯磺酸阿曲庫銨、異丙酚靜脈注射誘導，異丙酚及瑞芬太尼靜脈輸注維持麻醉。Ⅱ組患者采用靜吸復合麻醉，誘導方法與Ⅰ組患者相同，七氟醚吸入、異丙酚及瑞芬太尼靜脈輸注維持麻醉。Ⅲ組患者采用吸入全麻，以七氟醚吸入、瑞芬太尼、順苯磺酸阿曲庫銨靜脈注射誘導，七氟醚吸入及瑞芬太尼靜脈輸注維持麻醉。三組患者術后均行靜脈自控鎮痛，采用視覺模擬評分法評價患者疼痛程度。所有患者均于麻醉誘導前30 min(T0)、麻醉后1 h(T1)、3 h(T2)、5 h(T3)、手術結束時(T4)、手術結束后24 h(T5)、48 h(T6)、72 h(T7)采集外周靜脈血，采用流式細胞儀測定NK細胞(CD3-CD16+CD56+)的百分比。結果 三組患者一般情況各指標、手術時間、出血量比較差異無統計學意義(P＞0.05)，且三組患者術后VAS評分差異無統計學意義(P＞0.05)。與T0比較，Ⅲ組患者在T1～5的NK細胞百分比均顯著下降(P＜0.05)，且Ⅱ組和Ⅲ組患者在T6的NK細胞百分比亦低于T0水平(P＜0.05)。Ⅱ組在T4～5的NK細胞百分比顯著高于Ⅲ組(P＜0.05)。Ⅲ組在T2～6的NK細胞百分比均顯著低于Ⅰ組(P＜0.05)。結論 全身麻醉藥物的使用對婦科惡性腫瘤根治術患者的NK細胞均有一定的抑制作用，但丙泊酚麻醉產生的抑制作用最輕。

全身麻醉；NK細胞；婦科惡性腫瘤

自然免疫中以NK細胞的抗腫瘤作用最為顯著。無論是在腫瘤發生早期還是腫瘤轉移過程中，NK細胞均起著殺傷腫瘤細胞的關鍵作用，因此，NK細胞功能降低對于腫瘤患者來說有可能是致命的[1]。據報道，氯胺酮，硫噴妥鈉等麻醉藥物可以抑制NK細胞的活性，降低機體對腫瘤細胞轉移的敏感性[2]。因此，選擇對腫瘤患者NK細胞功能影響小的麻醉方法無疑有著重要的臨床意義。本研究擬探討不同全麻方法對接受根治手術的婦科惡性腫瘤患者NK細胞的影響，從而找出更適合這類患者的全身麻醉方法。

1 資料與方法

1.1 一般資料 經醫院倫理委員會批準，選擇ASAⅠ或Ⅱ級擇期行婦科惡性腫瘤根治手術患者60例，所有患者術前均簽訂知情同意書。排除標準包括術前患有內分泌系統、免疫系統及循環系統疾病，近期接受過放化療及內分泌治療，術前使用過激素或免疫抑制劑，術中及術后需要輸血者，術前擬診而術中冰凍活檢排除惡性腫瘤的患者亦被排除在本研究之外。

1.2 麻醉方法 所有患者均于術日晨8點入手術室，開放上肢靜脈，手術由同一組婦科醫生實施。根據全麻方式不同將患者隨機分為三組(n=20)：Ⅰ組患者采用全憑靜脈麻醉，以咪唑安定0.03～0.05 mg/kg、瑞芬太尼1～2 μg/kg、順苯磺酸阿曲庫銨0.15 mg/kg、丙泊酚2～2.5 mg/kg靜脈注射麻醉誘導，術中靜脈輸注丙泊酚4～6 mg·kg-1·h-1及瑞芬太尼0.2～0.3 μg·kg-1·min-1維持麻醉。Ⅱ組患者采用靜吸復合全麻，以咪唑安定0.03～0.05 mg/kg、瑞芬太尼1～2 μg/kg、順苯磺酸阿曲庫銨0.15 mg/kg、丙泊酚2～2.5 mg/kg靜脈注射麻醉誘導，術中靜脈輸注瑞芬太尼0.2～0.3 μg·kg-1·min-1，并吸入2%～3%濃度的七氟醚維持麻醉，手術結束前1 h改用丙泊酚4～6 mg·kg-1·h-1靜脈輸注維持麻醉。Ⅲ組患者采用吸入誘導，以8%七氟醚、新鮮氣體流量5 L/min吸入，入睡后靜脈給予順苯磺酸阿曲庫銨0.15 mg/kg，瑞芬太尼1～2 μg/kg，術中吸入2%～3%濃度的七氟醚，靜脈輸注瑞芬太尼0.2～0.3 μg·kg-1·min-1維持麻醉。所有患者入室后采用Philips監護儀監測心電圖(ECG)、無創血壓(SBP、DBP)、脈搏血氧飽和度(SpO2)。監測患者直腸溫度，并調節室內溫度維持患者體溫于36.5℃～37.7℃。氣管插管后監測呼氣末二氧化碳分壓(PETCO2)維持在35～45 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)。

1.3 外周血NK細胞檢測 患者入室后另開放一上肢靜脈單獨用于采血，分別于麻醉誘導前30 min (T0)、麻醉后1 h(T1)、3 h(T2)、5 h(T3)、手術結束時(T4)、手術結束后24 h(T5)、48 h(T6)、72 h(T7)時采集靜脈血2 ml，加入EDTAk2抗凝管中，做好標記并置入4℃冰箱中待測。所有標本于采集后6 h內進行檢測，步驟如下：取100 μl抗凝全血，加入抗體CD3FITC/ CD16+56PE/CD45PerCP/CD19APC 20 μl(BD公司)，混勻后室溫避光放置20 min，加入1:10稀釋的FACS溶血素2 ml加，混勻后室溫避光放置10 min，4℃離心機中離心5 min，轉速1 500 r/min，去上清液，加入磷酸鹽緩沖液(PBS)2 ml，再次離心5 min，轉速1000 r/min，去上清液，加500 μl PBS懸浮。采用流式細胞儀(Bechman Coulter公司，美國)檢測外周血NK細胞(CD3-CD16+CD56+)百分比。

1.4 統計學方法 采用SPSS16.0統計學軟件包進行分析，計量資料以均數±標準差(±s)表示，組間比較采用單因素方差分析，計數資料比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組患者一般情況比較 三組患者術前術中一般情況的比較差異無統計學意義(P＞0.05)，見表1。

表1 三組患者一般情況各指標的比較(n=20，)

表1 三組患者一般情況各指標的比較(n=20，)

組別ASA分級構成(例)Ⅰ級Ⅰ組Ⅱ組Ⅲ組年齡(歲) 50±9 50±9 51±8體重(kg) 50±10 50±8 49±10手術時間(h) 3.5±1.1 3.7±0.9 3.8±0.7出血量(ml) 624±57 654±66 604±73 8 7 9Ⅱ級12 13 11

2.2 三組患者外周血NK細胞百分比比較 與T0比較，三組患者在T1～5的NK細胞百分比均顯著下降(P＜0.05)，且Ⅱ組和Ⅲ組患者在T6的NK細胞百分比亦低于T0水平(P＜0.05)。Ⅱ組在T4～5的NK細胞百分比顯著高于Ⅲ組(P＜0.05)。Ⅲ組在T2～6的NK細胞百分比均顯著低于Ⅰ組(P＜0.05或0.01)，見圖1。

圖1 三組患者外周血NK細胞百分比的比較(n=20)

3 討論

NK細胞屬于淋巴細胞一族，是有別于T細胞、B細胞的一類非特異性免疫活性細胞。NK細胞主要分布于外周血中，占外周血單核細胞總數的5%～10%，骨髓和淋巴結中也含有少量的NK細胞，但其含量要低于外周血。NK細胞表面上有很多分子標記物，目前常用于檢測NK細胞的分子標記有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1分子，本研究即通過檢測CD3-CD16+56+分子的百分比來表示NK細胞的百分比。

NK細胞是天然免疫的重要組成部分，通過其直接殺傷作用和分泌免疫刺激因子如干擾素IFN-γ控制局部腫瘤的生長以及腫瘤轉移。動物實驗表明，NK細胞的抗腫瘤轉移作用與干擾素調節因子-1的表達有重要關系，干擾素調節因子-1是由IFN-γ誘導產生的轉錄因子，是NK細胞發揮免疫監督和抗腫瘤作用的重要介質之一[3]。目前一些抗腫瘤研究的免疫治療策略就是以NK細胞為靶向的，比如某些抗體策略和繼承性細胞轉移。

婦科惡性腫瘤以宮頸癌、子宮內膜癌、卵巢癌等最為常見。目前手術切除腫瘤及盆腔淋巴結清掃仍是主要治療方法，一般選擇在全麻下進行手術。某些全麻藥物可影響NK細胞的功能以及炎性介質的基因表達和分泌，尤其對腫瘤患者，麻醉藥抑制NK細胞功能可能加速殘余腫瘤細胞的轉移[4]。許多動物實驗和臨床實驗研究都表明某些麻醉藥物可導致NK細胞活性降低。較早的一項研究表明，氟烷和安氟醚可抑制由干擾素INF誘導的大鼠脾臟NK細胞毒性的增強[5]。Melamed等[6]給用不同麻醉藥物麻醉后的大鼠注入腫瘤細胞，觀察其肺轉移情況，發現除異丙酚以外，硫噴妥鈉、氟烷以及氯胺酮都可以抑制NK細胞的活性，增加腫瘤轉移的發生。Dugan等[7]利用大鼠氟烷性肝炎模型研究NK細胞介導的嚴重肝損害，發現盡管吸入麻醉藥抑制NK細胞活性的機制并不很清楚，但很可能是吸入麻醉藥誘導CD8+細胞抑制NK細胞的細胞毒性的結果。Liu等[8]將80例在吸入麻醉下接受神經外科開顱手術的患者納入其研究，并檢測其外周血中性粒細胞、單核細胞、T細胞亞群、NK細胞以及B細胞的百分比，結果表明同中性粒細胞、單核細胞、T細胞亞群的變化一樣，NK細胞百分比在麻醉后顯著降低。Inada等[9]發現，異丙酚可抑制小鼠腹膜巨噬細胞PGE2的產生，從而使NK細胞分泌INF-γ增多，有利于發揮其抗腫瘤作用。

本研究中麻醉后三組患者均出現不同程度的NK細胞減少，Ⅰ組患者麻醉后T2～6的NK細胞百分比顯著高于Ⅲ組，且較早恢復至術前水平，Ⅱ組患者在麻醉后T1～5的NK細胞百分比與Ⅰ組比較差異無統計學意義，但T6時要顯著高于Ⅰ組，表明Ⅱ組患者NK細胞百分比恢復要晚于Ⅰ組，因而Ⅰ組對NK細胞的抑制較小，有利于發揮其抗腫瘤作用。

綜上所述，全身麻醉藥物的使用對婦科惡性腫瘤根治術患者的NK細胞均有一定的抑制作用，但丙泊酚麻醉產生的抑制作用最輕。因此選擇丙泊酚進行麻醉維持的方法對這類患者最為有利。

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R730.56

B

1003—6350（2014）18—2757—03

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2013-09-15)

張鐵軍。E-mail：ztjzl@163.com