兩種細(xì)菌鑒定法在臨床血液檢驗(yàn)中的應(yīng)用價值研究分析

【摘要】目的：對比直接藥敏檢驗(yàn)與常規(guī)藥敏檢驗(yàn)在臨床血液細(xì)菌檢驗(yàn)與鑒定中的應(yīng)用價值。方法：選擇我院2010年6月～2012年6月接收治療的發(fā)熱合并全身感染的患者300例，以無菌操作對所有患者在發(fā)熱或感染的高峰期時采集陽性血液標(biāo)本300份，并對每份樣品同時進(jìn)行兩種方法的鑒定。分析兩種檢測方法的細(xì)茵鑒定結(jié)果及藥敏性。結(jié)果：在菌種檢出率中，腸桿菌屬的檢出率最高，而在細(xì)菌抗生素敏感度的檢出符合率的比較中，運(yùn)用兩種方法的藥敏檢驗(yàn)結(jié)果總的符合率高。結(jié)論：直接藥敏檢驗(yàn)具有多重優(yōu)勢，值得在臨床上加以廣泛應(yīng)用和推廣。

【關(guān)鍵詞】細(xì)菌鑒定；血液檢驗(yàn)

【中圖分類號】R44 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B【文章編號】1004-4949（2014）08-0156-01

臨床上抗生素的濫用導(dǎo)致各種細(xì)菌的耐藥性及其對抗生素的敏感性發(fā)生變異，增加了臨床檢驗(yàn)工作的困難。不同和細(xì)菌有不同的抗藥敏感性，因此，采用合適的測定方法準(zhǔn)確測定出引起患者疾病的細(xì)菌及其抗藥敏感性，對臨床患者的診斷和治療具有重要的意義。目前臨床常用的細(xì)菌檢測檢驗(yàn)方法有常規(guī)檢驗(yàn)、直接藥敏檢驗(yàn)、血清學(xué)凝集檢驗(yàn)、鏡檢等。本確定采用常規(guī)檢驗(yàn)、直接藥敏檢驗(yàn)兩種細(xì)菌檢驗(yàn)方法檢測血液中細(xì)菌的抗藥性，現(xiàn)將研究結(jié)果報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇我院2010年6月～2012年6月接收治療的發(fā)熱合并全身感染的患者300例。觀察組患者男168例，女132例。年齡22～68歲，平均年齡（34.5±6.6）歲。所有患者在入院前48h內(nèi)未接受相關(guān)治療或服用任何藥物，無血液系統(tǒng)疾病或凝血功能障礙，也無嚴(yán)重肝、腎、心等器質(zhì)性病變，且患者在性別、年齡及病情等一般資料上無顯著性差異（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

以無菌操作對所有患者在發(fā)熱或感染的高峰期時采集陽性血液標(biāo)本300份。每人采集20ml，每位患者采集一次。采集好的血液樣品盡快送至檢驗(yàn)科，并進(jìn)行冷藏保存，并對每份樣品同時進(jìn)行直接檢驗(yàn)和常規(guī)檢驗(yàn)。

1.2.1常規(guī)檢驗(yàn)，將所有陽性樣分別接種于血平板、麥康凱平板和巧克力平板，在35℃5.0%C02下孵育18～24 h后，取菌落涂片并進(jìn)行革蘭染色。根據(jù)檢測結(jié)果選擇酶。采用Walkaway 40系統(tǒng)進(jìn)行鑒定與藥敏試驗(yàn)[2]。

1.2.2直接藥敏檢驗(yàn)，將所有樣本直接接種于全自動血培養(yǎng)儀中，進(jìn)行自動培養(yǎng)和檢測。當(dāng)系統(tǒng)檢出陽性時，用無菌注射器抽取10m陽性樣品進(jìn)行密度分離細(xì)菌，于離心機(jī)中以1500r/min離心5min后，取其上清液。將所得上清液繼續(xù)以3000r/min離心15min后，去其上清液。將剩余液體再進(jìn)行密度梯度離心分離細(xì)菌。所得液體用PBS洗滌沉淀兩次后重懸。

取20μL懸液涂片并進(jìn)行革蘭氏染色，于顯微鏡下倒置觀察：若發(fā)現(xiàn)呈鏈狀G+菌，則進(jìn)行藥敏初試驗(yàn)（MH平板）。按藥敏結(jié)果選擇酶，并配配菌液濃度至（6.2×108）cfu/L， 接種菌液1～2滴于NC21綜合板上進(jìn)行細(xì)菌藥敏測定。若為一般菌種（真菌例外），用無菌拭子將菌液均勻涂抹在MH平板上，貼上藥敏紙片[2]。

1.3觀察指標(biāo)

觀察藥敏試驗(yàn)與細(xì)菌鑒定，判斷敏感、耐藥和中度敏感[2]

1.4統(tǒng)計學(xué)分析

采取統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS19.0對上述匯總數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和處理，計數(shù)資料采取率（%）表示，組間對比采取x2檢驗(yàn)（或者采用T檢驗(yàn)）；對比以P<0.05為有顯著性差異和統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

在經(jīng)過直接藥敏檢驗(yàn)后，300份樣品中檢出185份陽性樣品，菌種檢出率中，埃希氏菌、克雷柏桿菌及沙門菌等腸桿菌屬的檢出率最高，總的檢出率達(dá)85.6%，在細(xì)菌抗生素敏感度的檢出符合率的比較中，運(yùn)用兩種方法的藥敏檢驗(yàn)結(jié)果總的符合率高，其中檢測G+球菌敏感、中度敏感、耐藥符合率分別為96.2%、92.0%、96.8%；兩種方法檢測G-桿菌敏感、中度敏感、耐藥的符合率分別為96.8%、93.3%、99.2%兩種檢測方法間敏感度均無明顯差異，不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

3討論

近年來，臨床抗生素的濫用，使得細(xì)菌的耐藥性不斷增加，且耐藥性出現(xiàn)比較大的分化。在臨床感染中，多重耐藥菌感染引發(fā)患者全身感染的病例占絕大多數(shù)。因此，在臨床上采取及時、高效地檢測方法對致病細(xì)菌進(jìn)行鑒定與藥敏性測定，以提高患者用藥的合理性，是治療細(xì)菌性感染患者的關(guān)鍵。臨床檢驗(yàn)血液細(xì)菌的方法多為藥敏檢測，但是這些傳統(tǒng)的方法鑒定細(xì)菌及其藥敏性所需的時間一般需要二至三天，甚至有些細(xì)菌在常規(guī)的細(xì)菌檢驗(yàn)中無法得出確切的檢驗(yàn)結(jié)果，從而導(dǎo)致誤診或延誤了患者的最佳治療時期。因而臨床上迫切需要既能準(zhǔn)確地鑒定細(xì)菌及耐藥性同時又能夠快速得出結(jié)論的細(xì)菌檢驗(yàn)方法。

從本研究采用的直接藥敏檢驗(yàn)與常規(guī)檢驗(yàn)的對比中，可以看出，采用直接藥敏檢驗(yàn)G+球菌及G-桿菌的檢出率和符合率均很高，符合率均超過90%，兩者檢驗(yàn)方法的結(jié)果無明顯差異（p>0.05）表明采用直接藥敏檢驗(yàn)對G+球菌及G-桿菌的鑒定與藥敏性測定均有好的效果。直接藥敏檢驗(yàn)對腸桿菌屬的檢出符合率達(dá)100%，表明直接藥敏檢驗(yàn)對腸桿菌屬具有較高的敏感性。從檢驗(yàn)所需的時間上看，直接藥敏檢驗(yàn)所需的平均時間為10h左右，其所需的時間遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于常規(guī)檢驗(yàn)，為患者的及時治療提供了更多的機(jī)會。此外，直接藥敏檢驗(yàn)在操作上較常規(guī)檢驗(yàn)更為簡便， 操作所耗材料更少。

總而言之，直接藥敏檢驗(yàn)具有多重優(yōu)勢，值得在臨床上加以廣泛應(yīng)用和推廣。

參考文獻(xiàn)

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