梅毒抗體檢測方法的比較

【摘要】 分別用梅毒酶聯免疫吸附試驗（TP-ELISA）、梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）和梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA）三種方法檢測梅毒抗體，比較他們在梅毒診斷中的臨床應用價值。

【關鍵詞】梅毒：檢測：TP-ELISA TRUST TPPA

【中圖分類號】R446.6 【文獻標識碼】B【文章編號】1004-4949（2014）08-0507-01

梅毒是由蒼白（梅毒）螺旋體引起的慢性、系統性性傳播疾病。梅毒在全世界流行，據WHO估計，全球每年約有1200萬新發病例，主要集中在南亞、東南亞和次撒哈拉非洲[1]。近年來梅毒在我國增長迅速，已成為報告病例數最多的性病。所報告的梅毒中，潛伏梅毒占多數，先天梅毒報告病例數也在增加。我院目前使用的初篩試驗主要是TP-ELISA。因此方法具有敏感性高、特異性好、價格便宜、易于標準化等優點，廣泛的應用在梅毒患者初篩試驗中，如果出現陽性再做TPPA和TRUST這兩個補充試驗。為此我們收集了100例來院做過兩次梅毒檢測TP-ELISA陽性的被檢測者血清，進行梅毒酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）和梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA）。并對三種方法進行比較和分析。具體如下：

1、材料和方法

1.1、標本來源：

2014年上半年20-60歲來我院做過兩次梅毒三項試驗，在TP-ELISA陽性血清標本中隨機抽取100例。

1.2、儀器：

上海比朗TYDZ-IIITRUST震蕩儀，KHB-360酶標儀，洗板機。

1.3、試劑：

TRUST由上海榮盛生物科技有限公司提供，TPPA由日本瑞必歐株式會社提供，TP-ELISA由北京萬泰生物藥業股份有限公司提供。以上試劑均在有效期內使用。

1.4、方法：

TP-ELISA：表達了梅毒螺旋體相應特異性抗體，采用雙抗原夾心法形成抗原-抗體-酶標結合抗原復合物，加入底物產生顯色反應，通過酶標儀測定吸光度（OD值），根據OD值來判讀是否產生TP抗體。TRUST：抗原以膽固醇晶粒為載體，包被上心磷脂和卵磷脂，給構成VDRL抗原顆粒，再把抗原顆粒結合到甲基胺紅上，當抗原與血清反應素以一定比例相互作用時出現凝集，且凝集顆粒呈紅色，出現凝集則判讀為陽性，反之為陰性。TPPA：用梅毒螺旋體致敏明膠顆粒替代梅毒螺旋體血細胞凝集試驗（TPHA）試驗中致敏紅細胞，明膠顆粒為洋紅色，致敏顆粒與人血清或血漿中的梅毒螺旋抗體結合，產生可見的凝集反應，如果出現均一凝集可以判讀為陽性，反之為陰性，此試驗具有較高的敏感性。以上三種方法均按標準操作規程進行。

2、結果

三種試驗均為陽性的第一次有68例，經過一段時間再次檢測三種試驗均為陽性的就只有31例。TP-ELISA和TPPA前后兩次陽性的結果在被檢測者中無變化，只有TRUST陽性的患者在經過一段時間治療后有明顯的減少，具體結果如表<1>。并且根據臨床醫生提供資料，這95例TPPA陽性的最終確診為梅毒感染者，剩下5例TP-ELISA陽性、TPPA陰性的是由于患者其他方面的原因引起梅毒抗體的假陽性，排除為梅毒患者。

3、討論

梅毒感染者一般至少會產生特異性和非特異性兩種抗體。梅毒血清學檢查是診斷梅毒的重要依據，但還需要根據臨床癥狀，體征等綜合確診.因為發現除梅毒外，許多其他疾病也可導致梅毒化驗結果陽性.如：生殖器皰疹、艾滋病、丙型肝炎、糖尿病、系統性紅斑狼瘡和肝硬化等[2]。梅毒特異性抗體，臨床上主要采用TPPA、TP—ELISA等方法檢測，其特點是靈敏度高、特異性強。機體若產生特異性抗體，則可能在體內存在很長時間甚至終生攜帶；另一種是梅毒非特異抗體，臨床上主要采用TRUST等方法檢測，優點是隨病情發展而變化，缺點是非特異性。不管是特異性抗體檢測還是非特異性抗體檢測，都會不同程度受到試劑、操作環境、設備等多種因素的影響，我院一般采用TP-ELISA做為梅毒的初篩試驗。如果出現陽性，再進行梅毒的TPPA和TRUST試驗。梅毒酶聯免疫吸附試驗（ELISA）是梅毒抗體的篩查試驗，陽性者也有可能是其它因素引起的假陽性，故還需進行確診試驗梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA）。另一種實驗是梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUSR），這種抗體敏感性非常高，感染四周以上就能檢查出來.。95%的梅毒病人都會呈陽性反應；但某些自身免疫性疾病（如SLE、硬皮病）及孕婦等也會出現假陽性反應，但一般較弱。TRUST可以按照病情感染的嚴重程度，滴度也會發生變化。通過觀滴度的變化可反應治療后療效怎么樣，判斷梅毒愈后的標準，陰性就說明已愈，但是這種方法不是很完美的，特別是對還未診斷為梅毒的病人，需要結合TP-ELISA、TPPA和臨床癥狀、體征等一起綜合分析。

參考文獻

[1] 楊雪源.王千秋.梅毒.計生委臨床醫生科普項目/百科名醫網，2014-03-13

[2] 庶吉士.梅毒抗體.百度百科網，2014-7-25