【摘要】目的:觀察苗藥復方嘎老梭浸提制劑對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白色念珠菌的抗菌作用,為其臨床應用提供實驗依據。方法:按照國家食品藥品監督管理局《中藥新藥研究的技術要求》,以GB15979-2002《一次性使用衛生用品衛生標準》附錄的規定為標準進行實驗。結果:苗藥復方嘎老梭浸提制劑分別對金黃色葡萄球菌、大腸菌群、溶血性鏈球菌、真菌作用2min,平均抑菌率達100.00% 。結論:苗藥復方嘎老梭浸提制劑分別對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白色念珠菌有抗菌作用。
【關鍵詞】苗藥復方嘎老梭浸提制劑;金黃色葡萄球菌;大腸桿菌;白色念珠菌;抗菌作用。
【中圖分類號】R722.12 【文獻標識碼】B【文章編號】1004-4949(2014)08-0177-01
苗藥復方嘎老梭浸提制劑(商品名:苗格郎脂壓寶)是使用黔東南州苗族地區習慣食藥兩用的箬竹葉(Indocalamus tessellatus (Munro) Keng f.)為主經浸提加工制成的復方苗藥,具有抗菌、天然防腐、促進消化的作用。按照國家食品藥品監督管理局《中藥新藥研究的技術要求》[1]和衛生部《中藥新藥毒理學研究指南》[2]的技術要求,并參考其它相關方法[3][4]以GB15979-2002《一次性使用衛生用品衛生標準》附錄的規定為標準,觀察苗藥復方嘎老梭浸提制劑的抗菌作用,為臨床應用提供實驗依據。
1抗金黃色葡萄球菌(ATCC6538)實驗
1.1實驗目的
本實驗目的是按照國家藥品監督管理局《中藥新藥研究的技術要求》,以GB15979-2002《一次性使用衛生用品衛生標準》附錄的規定為標準,觀察苗藥復方嘎老梭浸提制劑的抗金黃色葡萄球菌(ATCC6538)作用。
1.2實驗材料
1.2.1實驗菌株:金黃色葡萄球菌(ATCC6538),中國科學院微生物研究所提供。試驗使用第7代~第8代37℃培養18h~24h營養瓊脂斜面新鮮培養物。
1.2.2受試藥物:
復方嘎老梭浸提制劑(商品名:苗格郎脂壓寶,貴州苗侗百草醫藥有限公司生產,批號:20140331)
1.2.3其它材料:
1.2.3.10.03mol/L磷酸鹽緩沖液(PBS pH7.2)。
1.2.3.2含0.1%吐溫80的0.03mol/L PBS。
1.2.3.3含1%蛋白胨的0.03 mol/L PBS。
1.2.3.4營養瓊脂培養基。
1.2.3.537℃恒溫培養箱。
1.3實驗方法
1.3.1依據:GB15979-2002《一次性使用衛生用品衛生標準》附錄C4.1進行試驗。
1.3.2條件:試驗溫度20℃±1℃,試驗重復三次。
1.3.3復方嘎老梭浸提劑作用濃度為原液,作用時間分別為2min、5min、10min、20min。37℃培養48h后觀察結果。
1.4實驗結果
經三次重復試驗區,結果表明:在20℃±1℃條件下,復方嘎老梭浸提劑原液對金黃色葡萄球菌作用2min,平均抑菌率達100.00%(100.00%)(見附表1)。
2抗大腸桿菌(8099)實驗
2.1實驗目的
本實驗目的是按照國家藥品監督管理局《中藥新藥研究的技術要求》,以GB15979-2002《一次性使用衛生用品衛生標準》附錄的規定為標準,觀察苗藥復方嘎老梭浸提制劑的抗大腸桿菌(8099)的作用。
2.2實驗材料
2.2.1實驗菌株:大腸桿菌(8099),中國科學院微生物研究所提供。試驗使用第8代~第9代37℃培養18h~24h營養瓊脂斜面新鮮培養物。
2.2.2受試藥物:
復方嘎老梭浸提制劑(商品名:苗格郎脂壓寶,貴州苗侗百草醫藥有限公司生產,批號:20140331)
2.2.3其它材料:
2.2.3.10.03mol/L磷酸鹽緩沖液(PBS pH7.2)。
2.2.3.2含0.1%吐溫80的0.03mol/L PBS。
2.2.3.3含1%蛋白胨的0.03 mol/L PBS。
2.2.3.4營養瓊脂培養基。
2.2.3.537℃恒溫培養箱。
2.3實驗方法
2.3.1依據:GB15979-2002《一次性使用衛生用品衛生標準》附錄C4.1進行試驗。
2.3.2條件:試驗溫度20℃±1℃,試驗重復三次。
2.3.3復方嘎老梭浸提劑作用濃度為原液,作用時間分別為2min、5min、10min、20min。37℃培養48h后觀察結果。
2.4實驗結果:
經三次重復試驗區,結果表明:在20℃±1℃條件下,復方嘎老梭浸提制劑原液對大腸桿菌作用2min,平均抑菌率達100.00%(100.00%)(見附表2)。
3抗白色念珠菌(ATCC 10231)實驗
3.1實驗目的
本實驗目的是按照國家藥品監督管理局《中藥新藥研究的技術要求》,以GB15979-2002《一次性使用衛生用品衛生標準》附錄的規定為標準,觀察苗藥復方嘎老梭浸提制劑的抗白色念珠菌(ATCC 10231)的作用。
3.2實驗材料
3.2.1實驗菌株:白色念珠菌(ATCC 10231),中國科學院微生物研究所提供。試驗使用第4代~第5代37℃培養18h~24H沙保瓊脂斜面新鮮培養物。
3.2.2受試藥物:
復方嘎老梭浸提制劑(商品名:苗格郎脂壓寶,貴州苗侗百草醫藥有限公司生產,批號:20140331)
3.2.3其它材料:
3.2.3.10.03mol/L磷酸鹽緩沖液(PBS pH7.2)。
3.2.3.2含0.1%吐溫80的0.03mol/L PBS。
3.2.3.3含1%蛋白胨的0.03 mol/L PBS。
3.2.3.4沙堡瓊脂培養基。
3.2.3.537℃恒溫培養箱。
3.3實驗方法
3.3.1依據:GB15979-2002《一次性使用衛生用品衛生標準》附錄C4.1進行試驗。
3.3.2條件:試驗溫度20℃±1℃,試驗重復三次。
3.3.3復方嘎老梭浸提劑作用濃度為原液,作用時間分別為2min、5min、10min、20min。37℃培養48h后觀察結果。
3.4實驗結果:
經三次重復試驗區,結果表明:在20℃±1℃條件下,復方嘎老梭浸提制劑原液對白色念珠菌作用2min,平均抑菌率達100.00%(100.00%)(見附表3)。
4討論與結論
箬竹葉(Indocalamus tessellatus (Munro) Keng f.)含量比較高的是烷烴化合物[5],其次有笨甲醇、苯乙醇、紫羅蘭酮等。具有芳香味,其提取方法可采用醇提或水提。與紫花地丁、蛇床子提取物制成復方制劑,對皮膚及其婦科感染性疾病有療效。依據GB15979-2002《一次性使用衛生用品衛生標準》,在20℃±1℃條件下,復方嘎老梭浸提制劑原液分別對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白色念珠菌作用2min,平均抑菌率分別達100.00%(100.00%),表明復方嘎老梭浸提制劑原液有抗菌作用。
參考文獻
[1]國家藥品監督管理局. 中藥新藥研究的技術要求. 1999
[2]國家藥品監督管理局.中藥?天然藥物急性毒性試驗技術指導.2005
[3]陳奇.中藥藥理研究方法學[M].北京:人民衛生出版社.1993:74.451
[4]徐淑云,卞如濂,陳修,等.藥理實驗方法學[M].北京:人民衛生出版社.1982:849.857
[5]氣相色譜–質譜法分析湖南產闊葉箬竹葉揮發油的化學成分,李水芳等,質譜學報[J].,2007,第28卷,第2期。