MTA1和VEGF蛋白在甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)及意義

【摘要】 目的 探討MTA1和VEGF蛋白在甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)情況及臨床意義。方法 選擇石蠟組織標(biāo)本68例甲狀腺乳頭狀癌及31例正常甲狀腺組織，免疫組織化學(xué)EnVision法檢測MTA1和VEGF蛋白在組織中的表達(dá)情況。結(jié)果 MTA1蛋白在正常甲狀腺組織和癌組織中陽性率分別為6.5%和42.6%，二者比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），VEGF蛋白在癌組織中陽性率為67.6%，與正常組織陽性率（9.7%）比較，有顯著性差異（P<0.05），無論是單側(cè)還是雙側(cè)發(fā)生的癌，與正常組織比較，MTA1和VEGF蛋白表達(dá)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；MTA1和VEGF蛋白表達(dá)與淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移及臨床分期有關(guān)（P<0.05），與患者年齡、性別比較均無顯著性差異（P>0.05）；MTA1和VEGF蛋白在甲狀腺癌中的表達(dá)存在顯著正相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論 MTA1和VEGF蛋白與甲狀腺癌的侵襲轉(zhuǎn)移及患者的預(yù)后相關(guān)，二者在甲狀腺癌的進(jìn)展過程中可能起了一定的協(xié)同作用。

【關(guān)鍵詞】 甲狀腺乳頭狀癌；MTA1；VEGF；轉(zhuǎn)移

【中圖分類號】R722.12 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B【文章編號】1004-4949（2014）08-0056-02

甲狀腺乳頭狀癌是甲狀腺濾泡上皮發(fā)生的惡性腫瘤，是甲狀腺癌中最常見的類型，在外科門診和治療中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該病年齡趨于年輕化，且常發(fā)生頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因MTA1是MTA家族重要的成員之一，在惡性腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮著重要的作用[1]。VEGF是腫瘤生長所必須的血管內(nèi)皮生長因子，是刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞增生的重要因子之一，本文通過檢測甲狀腺乳頭狀癌中MTA1和VEGF蛋白的表達(dá)情況，探討二者與甲狀腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系及臨床意義，為外科治療甲狀腺癌及術(shù)后預(yù)防提供一定的幫助。

材料與方法

1. 資料來源：收集2008年至2012年間在 省腫瘤醫(yī)院存檔的甲狀腺癌標(biāo)本73例，所有病例均重新石蠟包埋切片，經(jīng)兩位高級職稱醫(yī)師閱片，其中1例濾泡狀癌，2例未分化癌和2例髓樣癌除外，選取68例發(fā)生甲狀腺乳頭狀癌的病例，其中雙側(cè)為癌者25例，其余43例為單側(cè)乳頭狀癌，挑取單側(cè)乳頭狀癌切除對側(cè)部分正常甲狀腺組織（正常對照）的病例31例。

2.方法： 采用免疫組織化學(xué)染色EnVision二步法，實(shí)驗(yàn)步驟按試劑說明書進(jìn)行。

3.試劑與抗體：MTA1多克隆抗體購自美國Santa Cruz公司，VEGF單克隆抗體及DAB顯色試劑盒均購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司，MTA1為濃縮液，稀釋濃度為1：100-150，用已知陽性切片作陽性對照，PBS液代替一抗作陰性對照。

4.結(jié)果判斷：MTA1以胞核和胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性，VEGF以細(xì)胞漿呈棕黃色顆粒為陽性，陽性細(xì)胞數(shù)評分：高倍鏡（×400）下隨機(jī)選取10個(gè)視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)50個(gè)細(xì)胞，取平均數(shù)為陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)，陰性為0分，<25%為1分；26%-50%為2分；>51%-75%為3分；>76%為4分。染色強(qiáng)度為0-3分，淺黃色1分，棕黃色2分，棕褐色3分。兩者相乘所得>4分為陽性，<4分為陰性。

5.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析： 所有分析用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，采用χ2檢驗(yàn)和Pearson相關(guān)分析，P<0.05為差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1. MTA1和VEGF在甲狀腺癌與正常甲狀腺組織中的表達(dá)：MTA1在68例癌組織中陽性率為42.6%（圖1）與正常組織陽性率（6.5%）相比，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.001）；VEGF蛋白在68例甲狀腺癌中陽性率為67.6%（圖2）明顯高于正常組織（陽性率9.7%，P=0.001）。在癌組織中，MTA1與VEGF蛋白表達(dá)，單側(cè)與雙側(cè)間比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），但二者單側(cè)和雙側(cè)陽性率與正常組織分別比較，均有顯著性差異（P<0.05），見表1。

討論

由于甲狀腺癌發(fā)病較為隱匿，多數(shù)患者要么是在體檢時(shí)發(fā)現(xiàn)，要么是在頸部發(fā)現(xiàn)腫塊或者引起頸部不適才去就診，這就給頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移創(chuàng)造了時(shí)間，而且研究認(rèn)為甲狀腺微小癌是甲狀腺發(fā)病率提高的主要原因，也是淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的重要原因[2]，這也是外科手術(shù)中常常需要冰凍淋巴結(jié)檢測是否有轉(zhuǎn)移的重要原因，因?yàn)檫@將決定手術(shù)的范圍。

腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因MTA1在多種腫瘤中均有表達(dá)，在食管癌中MTA1呈過表達(dá)，并且認(rèn)為是患者獨(dú)立的預(yù)后因子；在前列腺癌中MTA1是前列腺癌侵襲進(jìn)展的主要促進(jìn)因子，而且可能是其靶向治療的有效分子標(biāo)記；在宮頸癌[3]中，MTA1陽性表達(dá)率為55.3%，與腫瘤組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤復(fù)發(fā)密切相關(guān)，是腫瘤進(jìn)展和轉(zhuǎn)移的重要因子，也可能是未來宮頸癌靶向治療的靶點(diǎn)。在我們的研究中發(fā)現(xiàn)，MTA1在甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)率為42.6%，明顯高于正常組織，無論是單側(cè)還是雙側(cè)發(fā)生的癌與正常組織比較均有顯著性差別，可見MTA1在甲狀腺癌的發(fā)生發(fā)展過程中起了一定的作用。MTA1表達(dá)與患者的年齡和性別無關(guān)，與腫瘤發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期有關(guān)，發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的僅有1例為陰性，臨床分期Ⅰ、Ⅱ期表達(dá)明顯低于Ⅲ、Ⅳ期，可見MTA1在甲狀腺癌的進(jìn)展過程中參與了腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移，表明MTA1表達(dá)可能與患者的預(yù)后有關(guān)。在鼻咽癌和胃癌中，作者也認(rèn)為MTA1表達(dá)與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)，是評估腫瘤預(yù)后的重要參考指標(biāo)[4]，因此我們建議MTA1陽性表達(dá)且高表達(dá)的患者注意隨訪，以防復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。

VEGF是腫瘤血管生成的關(guān)鍵作用因子，在多種腫瘤中均有表達(dá)，且其表達(dá)增高是評估腫瘤生物學(xué)行為的重要指標(biāo)[5]。在甲狀腺癌中，VEGF是作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞最重要的因子，直接參與腫瘤間的血管生成[6]。研究發(fā)現(xiàn)，VEGF在甲狀腺癌中呈過表達(dá)，在甲狀腺癌的發(fā)生發(fā)展過程中起著重要的作用，并且可能是其預(yù)后的標(biāo)志[7]。本研究結(jié)果顯示，VEGF在癌組織中的表達(dá)明顯高于正常組織，且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期密切相關(guān)，表明VEGF參與了甲狀腺癌的發(fā)生發(fā)展，且與患者的預(yù)后相關(guān)。VEGF不但能夠促進(jìn)腫瘤血管的生成，而且在腫瘤的生長侵襲和轉(zhuǎn)移過程中同樣起著一定的誘導(dǎo)作用[8]。

同時(shí)，VEGF也受到MTA1的調(diào)節(jié)作用，在結(jié)直腸癌 LoVo 和 HCT116細(xì)胞株中，MTA1與VEGF-C表達(dá)之間存在顯著正相關(guān)，MTA1的過表達(dá)能夠顯著增強(qiáng)VEGF-C蛋白和mRNA的表達(dá)，提示MTA1調(diào)節(jié)VEGF的表達(dá)，從而促進(jìn)腫瘤脈管的生成[9]，可見MTA1和VEGF在腫瘤的生長過程中存在一定的相互作用。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，MTA1與VEGF存在共表達(dá)現(xiàn)象，68例癌組織中有28例為共同陽性病例，且均發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，表明MTA1與VEGF在甲狀腺癌的侵襲轉(zhuǎn)移過程中同樣存在一定的協(xié)同作用，這些作用是使甲狀腺癌患者預(yù)后差的主要原因之一。在外科的診斷治療中，離不開分子生物學(xué)的檢測手段，結(jié)合這些檢測結(jié)果，我們可以更好的為患者提供有效的治療和預(yù)防措施，為患者提供更好的服務(wù)。

參考文獻(xiàn)

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