不規則抗體篩查在臨床輸血中的應用

【摘要】目的：通過對患者輸血前血型不規則抗體的篩選和鑒定，從而探討不規則抗體篩查對輸血安全的重要性，從而保障臨床安全用血。方法：采用長春博迅生物技術有限公司生產的不規則抗體篩檢卡采用微柱凝膠法對我院2011年1月到2011年12月間782名輸血患者進行輸血前不規則抗體的篩查。結果：782名患者輸血前，不規則抗體篩選鑒定陽性2例，陽性率為0.26%。結論：不規則抗體產生的主要因素為多次輸血和妊娠，故對有輸血史和妊娠史的患者進行輸血前不規則抗體的篩查，選擇完全配合型的血液進行輸注，能有效地減低或預防溶血性輸血反應的發生，對臨床安全有效輸血有重要意義。

【關鍵詞】不規則抗體；抗體篩查；輸血

【中圖分類號】R446.6 【文獻標識碼】B【文章編號】1004-4949（2014）08-0508-01

依據2000年6月頒布的《輸血技術操作規范》規定有交叉配血不合、輸血史、妊娠史或短期內需要接受多次輸血者必須做抗體篩選試驗[1]，近年來血型不規則抗體的篩查已廣泛應用于輸血反應的診斷和預防，特別是對有妊娠史、輸血史和短期內有大量輸血的患者更為重要。不規則抗體在漢族患者及孕婦中檢出率為0.38-2.38%[2]，輸血前進行常規不規則抗體篩選，以發現有臨床意義的不規則抗體并進行鑒定，實現血液配合性輸注，對臨床安全有效輸血有重要意義。現對本院782例輸血患者進行輸血前不規則抗體篩查，結果報告如下：

1.資料與方法

1.1研究對象

2011年1月至2011年12月在我院住院輸血的782例患者，其中男性531例，女性189例，年齡6-91歲。

1.2試劑與儀器

微柱凝膠抗人球蛋白卡、不規則抗體篩選細胞（Ⅰ號、Ⅱ號、Ⅲ號）、低離子液、由長春博訊公司提供，鑒定譜細胞1-號上海血液中心提供。FYD型免疫微柱孵育器、TD-3A型血型血清學離心機，由長春博研公司提供。凝聚胺配血試劑由臺灣Baso公司提供。抗A、抗B單克隆抗體為長春博德公司生產。

1.3方法

1.3.1標本處理

輸血前每例患者抽取靜脈血2-3ml，EDTA-K2抗凝，3000r/min備用。

原理：微柱凝膠卡為六支微柱型管中填充葡聚糖凝膠和抗人球蛋白（多糖）制成抗人球蛋白微柱凝膠試劑卡，微柱凝膠管分為反應腔和凝膠分離柱兩部分。當被檢血清中含有不規則抗體時，則與已知血型抗原的篩檢細胞反應，經抗人球蛋白試劑的橋聯作用，紅細胞相互聚集，利用凝膠的空間位阻效應，經低速離心，凝集的紅細胞懸浮在凝膠上層，結果為陽性；反之，無紅細胞凝集，游離紅細胞沉降到凝膠柱底部為陰性[2]。

方法：（1）將微柱凝膠卡做好標記（每卡6孔，可做2人份）；（2）分離被檢者血清或血漿，確保無纖維蛋白塊存在；（3）分別向3個微柱凝膠管中加入0.8%篩檢細胞I、Ⅱ、Ⅲ號50ul，立即加入被檢血清或血漿50ul；（4）至血庫專用37℃孵育器中孵育15min，最后在專用水平離心機上離心5min，判定結果，紅細胞全部沉于孔底者為陰性，聚于微柱上者為陽性。陽性時進一步作抗體鑒定。初篩抗體陽性的標本采用微柱凝膠抗人球蛋白法進行譜細胞鑒定抗體的特異性，二者相符為陽性。

2.結果

采用微柱凝膠抗人球蛋白技術對782例輸血前患者標本進行不規則抗體篩選，檢出陽性結果2例，陽性率為0.26%，經微柱凝膠抗人球蛋白采用11個標準譜細胞進行抗體鑒定，其中IgG抗-E1例，自身抗體1例（見表1）。男性1例，有輸血史，女性1例，既有輸血史又有妊娠史，1例患者輸入無相應抗原的 紅細胞后，未發生溶血性輸血反應。1例有自身抗體 的患者按自身免疫性溶血性貧血的輸血原則輸注洗 滌紅細胞，3.討論

不規則抗體是指抗-A、抗-B以外的血型抗體，主要是經輸血或妊娠等免疫刺激產生，常分為自身抗體和同種抗體，同種抗體一般具有特異性，自身抗體是非特異性，抗體類型多為IgG型這種類型抗體在鹽水介質中不能凝集而只能致敏相應抗原的紅細胞，必須通過特殊介質才能致敏紅細胞出現凝集反應。該項陽性的患者一旦輸入具有相應抗原的紅細 胞，抗原、抗體就會發生免疫性結合，在補體的參與 下，輸入的紅細胞發生溶解，即發生急性溶血性輸血 反應或者發生遲發性溶血性輸血反應。急性溶血性 輸血反應患者出現發熱、貧血、黃疽和血紅蛋白尿，嚴 重時甚至危及其生命。因此，在輸血中要警惕這種輸 血反應發生的可能性。當不規則抗體篩選陽性時，必須進一步作抗體鑒定，確定其特異性后，再輸入無相 應抗原的紅細胞或交叉配血相合的紅細胞，才能達到 安全輸血的目的。因此，進行不規則抗體篩查非常重要。

抗體篩查試驗作為輸血前的常規檢測項目，在國外早已開展，對其結果也有報道[3]。本文通過對我院782例申請輸血患者的血清調查結果顯示，抗篩陽性檢出率為（0.26%），雖然陽性率不高，但有效的避免了患者因輸入不同亞型的抗原所導致溶血性輸血反應，減少了輸血所帶來的危害。從表1看本實驗室檢出的不規則抗體Rh系統檢出1例，自身抗體檢出1例。Rh系統中1例為IgG抗-E。RhE抗原是Rh血型系統除RhD抗原以外最強的抗原，RhE抗原陰性者因輸血或妊娠接受RhE抗原刺激后容易產生抗-E[4]。根據我國漢族人群Rh抗原分布特點，E抗原陽性比D抗原陽性低，產生抗E抗體的幾率高于抗D抗體，故Rh血型系統D抗原陽性E抗原陰性者輸血不容忽視。因此，輸血前對有輸血史、妊娠史的患者進行不規則抗體篩查非常必要，有利于早期發現和確認具有臨床意義的抗體，獲得充足時間來選擇缺乏相應抗原的相配合的血液，確保輸血安全。

自身抗體無臨床意義。但自身免疫性溶血性貧血（AIHA）的患者，其自身抗體能縮短自身紅細胞壽命，可能導致嚴重貧血，可能掩蓋同種抗體，聯合使用多種檢測技術能為患者提供相容的血液，有助于確保輸注紅細胞的存活。

綜上所述，隨著輸血檢測技術的發展，由血型不合引起的溶血反應已非常少見而不規則抗體是引起溶血性輸血反應的主要原因，對于臨床需要輸血的患者，為保障臨床安全有效輸血，輸血前的不規則抗篩檢查應作為常規檢查項目，以便及早發現不規則抗體，從而提前準備相合的血液，選擇完全配合型的血液進行輸注，保證體內有不規則抗體的受血者及時用血，能有效地減低或預防溶血性輸血反應的發生，對臨床安全有效輸血有重要意義。總之為了保證輸血安全，提高輸血療效，患者輸血前進行不規則抗體篩查是及其重要和必要的。

參考文獻

[1]. 中華人民共和國衛生部。《輸血技術規范》，2006，6

[2]. 吳遠軍，劉彥慧，劉興玲。漢族患者（30800例）及孕婦（4200例）紅細胞不規則抗體分布調查【J】。第四軍醫大學學報，2007，28（10）：922-925.

[3]. Hoeltage GA，Domen RE，Rybiki LA，et al.Multiplered cell transfusions and alloimmunization： experience with 6996 antbodies detectes in total of 159262 patients form 1985 to 1993.Arch Pathol Lab Med，1995，119：42-45.

[4]. 楊珊.165例患者不規則抗體篩選結果分析及臨床意義.檢驗醫學與臨床，2010，7：1864-1865.