【摘要】目的對(duì)自身抗體檢測(cè)對(duì)自身免疫性肝病的診斷價(jià)值進(jìn)行探討。方法采用間接免疫熒光法來對(duì)抗核機(jī)體(ANA)、抗平滑肌抗體(SMA)以及抗線粒體抗體(AMA)進(jìn)行檢測(cè),利用免疫印跡法來對(duì)與肝臟疾病有關(guān)的抗肝腎微粒體抗體I型(抗LKM-1)、抗肝特異性胞漿抗原I型抗體(抗LC-1)以及可溶性肝抗原進(jìn)行檢測(cè),用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)對(duì)AMA-M2進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果自身免疫性肝病組中PBC和AIH的陽性檢出率明顯優(yōu)于非自身免疫性肝病組。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論自身抗體檢測(cè)對(duì)自身免疫性肝病的診斷以及分型具有非常高的價(jià)值,值得臨床上的大力推廣。
【關(guān)鍵詞】自身抗體;自身免疫性肝病;間接免疫熒光法
doi:10.3969/j.issn.1004-7484(s).2014.05.729文章編號(hào):1004-7484(2014)-05-2970-02本文選取我院2010年5月——2013年5月期間就診的肝功能生化指標(biāo)反復(fù)異常的患者60例,60例患者中,經(jīng)過初步診斷,AIH患者有20例,PBC患者有29例,PSC患者有11例。另外再選擇60例肝功能異常,但屬于非自身免疫性肝病的患者作為對(duì)照組。現(xiàn)報(bào)道如下。
1資料與方法
1.1臨床資料選取我院2010年5月——2013年5月期間就診的肝功能生化指標(biāo)反復(fù)異常的患者60例,60例患者中,經(jīng)過初步診斷,AIH患者有20例,PBC患者有29例,PSC患者有11例。另外再選擇60例肝功能異常,但屬于非自身免疫性肝病的患者作為對(duì)照組。兩組患者年齡在22-46歲之間,平均年齡為(29.1±1.3)歲。
1.2方法采用間接免疫熒光法來對(duì)抗核機(jī)體(ANA)、抗平滑肌抗體(SMA)以及抗線粒體抗體(AMA)進(jìn)行檢測(cè),選用HEP-2細(xì)胞與大鼠肝、腎以及胃三種組織的冰凍切片來作為抗原,待檢測(cè)的血清按1:100進(jìn)行稀釋,和各種組織進(jìn)行共同孵育30min,再加入異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記的抗體孵育進(jìn)行洗片,使用甘油進(jìn)行封片之后在顯微鏡下進(jìn)行觀察。利用免疫印跡法來對(duì)與肝臟疾病有關(guān)的抗肝腎微粒體抗體I型(抗LKM-1)、抗肝特異性胞漿抗原I型抗體(抗LC-1)以及可溶性肝抗原進(jìn)行檢測(cè)。使用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)對(duì)AMA-M2進(jìn)行檢測(cè)。
1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS11.5來對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,計(jì)數(shù)資料比較采用χ2進(jìn)行檢驗(yàn),P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2結(jié)果
使用間接免疫熒光法、免疫印跡法以及酶聯(lián)免疫吸附法來對(duì)肝抗原自身抗體進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示:在自身免疫肝病中,自身免疫性肝炎組20例中,SLA的陽性的例數(shù)為4例,陽性率為20%,LC-1的陽性例數(shù)為2例,陽性率是10%,LKM-1陽性例數(shù)為3例,陽性率是15%,SMA的陽性例數(shù)是12例,陽性率為60%,AMA的陽性例數(shù)是17例,陽性率是85%,AMA-M2的陽性例數(shù)為1例,陽性率是5%;原發(fā)性膽汁性肝硬化組的SMA陽性率是14%,SLA的陽性率是3.4%,AMA的陽性率是93.1%,AMA-M2的陽性率是0;而原發(fā)性硬化性膽管炎(PSC)與非自身免疫性肝病組的抗肝抗原自身抗體的陽性檢測(cè)率為0。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。另外,AIH、PBC、PSC以及非自身免疫組的ANA陽性檢出例數(shù)分別是17例,27例,2例,3例,檢出率分別為85%,93.1%,18.2%,5%,見表1。
3討論
自身免疫性肝病作為一種以肝臟為器官、以異常免疫為介導(dǎo)的自身免疫性疾病,主要分為自身免疫性肝炎和原發(fā)性膽汁性肝硬化兩種類型[1]。主要特征也表現(xiàn)在兩大方面:病例活檢有肝臟界面性炎癥的表現(xiàn),血清中可以發(fā)現(xiàn)和肝臟相關(guān)的自身抗體[2]。在實(shí)際的自身抗體的檢測(cè)中,雖然多數(shù)抗體不具有器官的特異性,也不具有疾病的特異性,但是在實(shí)際的血清檢測(cè)中都可以被檢測(cè)[3]。尤其是發(fā)現(xiàn)ANA以外的診斷標(biāo)準(zhǔn)對(duì)自身免疫性肝病的檢測(cè)具有非常重要的診斷價(jià)值[4]。
具體來說,自身免疫性肝病主要包括AIH、PBC以及PSC三種[5]。AIH主要為女性患者,分為三種主要的類型,即ANA、SMA為陽性;抗-LC1、抗-LKM1為陽性;抗-SLA為陽性[6]。PBC主要是一種慢性肝內(nèi)膽汁淤積性的疾病,病理上的表現(xiàn)主要是非化膿性、破壞性小的膽管炎,最終發(fā)展成為肝硬化[7]。本病的發(fā)病人群主要是中老年女性,其主要的特征是AMA升高。PSC是以大膽管損傷為主要特征的慢性膽汁淤積性的疾病,在青年男性中比較多發(fā),在實(shí)際的檢測(cè)中PSC的免疫學(xué)指標(biāo)沒有AIH與PBC那么敏感,主要與臨床的表現(xiàn)相結(jié)合,再通過經(jīng)內(nèi)鏡進(jìn)行胰膽管的造影來診斷。
綜上所述,自身免疫性肝病組中PBC和AIH的陽性檢出率明顯優(yōu)于非自身免疫性肝病組。由此可見,自身抗體檢測(cè)對(duì)自身免疫性肝病的診斷以及分型具有非常高的價(jià)值,值得臨床上的大力推廣。
參考文獻(xiàn)
[1]盧業(yè)成,劉麗兒,鄺燕玲.電化學(xué)發(fā)光免疫分析法在AFP定量檢測(cè)中的應(yīng)用[J].標(biāo)記免疫分析與臨床,2010,(04):123-125.
[2]鄒寒冰,許以平.32例過敏疾病患者血清14種食物過敏原特異性IgG抗體的檢測(cè)[J].標(biāo)記免疫分析與臨床,2009,(01):130-133.
[3]李全煥,涂學(xué)亮,劉紅麗.自身免疫肝病自身抗體檢測(cè)的臨床意義[J].標(biāo)記免疫分析與臨床,2012,(02):160-166.
[4]錢晶.過敏性鼻炎的過敏原類型探討及護(hù)理對(duì)策[J].當(dāng)代護(hù)士(學(xué)術(shù)版),2010,(02):160-190.
[5]吳淑梅,林云,王輝.HBV血清標(biāo)志物e抗原假陰性的原因分析及對(duì)策[J].第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2010,(07):139-163.
[6]范列英,仲人前,王皓.可溶性肝抗原的克隆、表達(dá)及初步臨床應(yīng)用[J].上海免疫學(xué)雜志,2010,(03):120-121.
[7]朱剛劍,陳嵩,毛青.原發(fā)性膽汁性肝硬化和自身免疫性肝炎重疊綜合征的臨床與病理分析[J].中華肝臟病雜志,2010,(01):190-199.