新生兒溶血病實驗室檢測的研究現狀和發展趨勢

【摘要】隨著檢驗檢測技術的快速發展，各醫學實驗室相繼圍繞新生兒溶血病（HDN）開展多項產前產后檢測。本文主要對現階段HDN常規檢測方法，結合珠蛋白作為檢測指標的現有研究結果，Fc（gamma）Rlla（CD32）的多態性，基因探針檢測四個方面進行了分析闡述。

【關鍵詞】新生兒溶血病，抗體檢測，基因探針檢測

【中圖分類號】R446.11

【文獻標識碼】B

【文章編號】1004-4949（2014）09-0758-02

新生兒溶血病（HDN），一般特指母嬰血型不合而引起的胎兒或者新生兒免疫性疾病。引起HDN的血型抗體可能為ABO血型抗體，Rh血型抗體，Kidd、Duffy、Kell等血型系統抗體也有報道，但仍以ABO血型抗體最為常見。該病的發生機制為母體的抗體免疫球蛋白透過胎盤進入胎兒血液循環后，結合于胎兒抗原陽性紅細胞，使胎兒免疫系統激活，造成不同程度的貧血、黃疸、水腫，嚴重者可引起新生兒高膽紅素腦病，甚至導致死亡。

1.HDN常見檢測方法

1.1產前免疫血清學檢測方法

該方法通過檢測母親血清中的IgG抗A（B）效價，以預測HDN發病的可能性。HDN的癥狀輕重一般取決于母親的抗體強度、亞類、胎兒紅細胞的發育程度、胎兒代償性造血能力以及免疫功能等諸多因素。但一般認為，孕婦血清中的IgG抗體效價的高低與胎兒受害程度呈正相關，因此，準確檢測孕婦血清中IgG血型抗體水平，是目前臨床診斷和預防新生兒HDN的主要方法。[1]

高效價的IgG抗體水平會在臨床用藥治療后降低，同時機體在保護機制作用下，會中和掉一定量的血型抗體，組止紅細胞破壞。所以，及時檢測母親體內的抗體強度，及時治療，能夠降低新生兒溶血病發生率。[2]

1.2羊水分析

羊水分析提供了評估胎齡、肺成熟度、胎盤功能和胎兒新生兒溶血病的發展和預后的基本價值。[3]當出現嚴重的新生兒溶血病時，羊水分析也適時地表明了宮內輸血的必要性。

1.3新生兒臍血檢測

新生兒檢測主要檢測新生兒ABO及RhD血型，采用直接抗人球蛋白試驗、游離試驗和放散試驗，確認新生兒是患有HDN。2011年3月，比利時的一所兒童健康研究所的新生兒監護報告指出，直抗試驗是診斷新生兒溶血病的基礎，新生兒臍血檢測應該執行于每個剛出生的新生兒，避免嚴重的高膽紅素血癥及其他潛在的并發癥的發生。[4]而放散試驗一直被認為是判定新生兒溶血病最有利的證據。試驗使用的紅細胞比直抗試驗多幾百倍，靈敏度很高。放散試驗陽性，則能證明新生兒患有溶血病。[5]

2.結合珠蛋白作為HDN檢測指標的現有研究結果

早前，Harran University of Medicine的Saniliurfa教授的一份研究報告提出，通過檢測臍帶血中結合珠蛋白可以確定患有溶血病的新生兒在日后發展的趨勢。[6]

實驗表明，結合珠蛋白可以在孕產婦的子宮內進行正常的新陳代謝，然而在新生兒出生后，溶血的血液環境讓結合珠蛋白與血紅蛋白的綁定接收減少，使新生兒出生后結合前幾日，膽紅素明顯受損而急速增加。因此認為，結合珠蛋白可能作為確定溶血病未來發展階段的預測性指標。

3. Fc（gamma）Rlla（CD32）的多態性

2009年，國內血型研究所的專家經研究發現，HDN患兒和其母體內的基因型HR131頻率較高，基因型HH131的頻率較低，而基因型HR131與Fc（gamma）Rlla（CD32）及IgG抗體亞類顯著相關，因此研究Fc（gamma）Rlla（CD32）的多態性與IgG抗體亞型的分布對預測產前宮內新生兒溶血病的發展階段有重要意義。[7]

4.HDN基因探針檢測

隨著分子生物學技術的不斷發展，許多國家已經開始普及HDN基因探針檢測。從孕婦血漿中萃取DNA，進行實時定量PCR檢測，如檢測出孕婦血型不合的基因型，說明胎兒發生HDN的風險較高，如果未檢測出，則可排除HDN的風險。[8]

以往建議在孕16周時做基因診斷，現有專家主張植入前診斷，若丈夫血型基因為雜合子基因，對可能孕有或已有過HDN胎兒的高位育齡婦女，采用體外受精，在發育到6-8個細胞期時，在顯微操作下活檢單卵裂球細胞，進行基因分析，選取缺失HDN等位基因的胚胎植入母體內，從而避免HDN。[9]

5.結語

而對于臨床實驗室而言，其承擔著為臨床提供準確的數據以便醫生早期診斷新生兒溶血病，適時進行干預治療及后期隨訪的重大責任。隨著檢驗檢測技術的不斷發展，快速診斷和急性管理新生兒溶血病必將成為一個重大的實驗檢測領域。[10]

參考文獻

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