摘要:隨著我國醫療技術的不斷發展,人們對游離脂肪酸及高糖對內皮細胞功能的影響越來越關注,主要是由于游離脂肪酸和高糖對人的健康具有很大的影響。因此,研究游離脂肪酸及高糖對內皮細胞功能的影響具有非常重大的意義。本文介紹了一些測定方法,闡述了葡萄糖與FFA對內皮細胞形態學變化的影響,最后進行了一定的討論。通過本文的論述,筆者一方面,希望能起到拋磚引玉的作用,另一方面,希望能給相關的工作人員提供一點參考借鑒的材料。
關鍵詞:游離脂肪酸;高糖;內皮細胞功能 【中圖分類號】R587 【文獻標識碼】B 【文章編號】1672-8602(2014)03-0036-01
目前,游離脂肪酸及高糖很容易引起血管并發癥,還會導致糖尿病的產生,嚴重影響患者的正常生活,由于內皮細胞的損傷在對血管并發癥中具有非常關鍵的作用,現在已經證實了游離脂肪酸和高糖對于血管的損傷很重要。隨著游離脂肪酸含量的增大,血管并發癥疾病的發生率也增加,FFA是導致血管內皮細胞功能受損的關鍵因素。但是,FFA造成的血管內部細胞功能受損的原因很多,現在醫學界還沒有研究清楚,當然,氧化造成的損傷是現在研究的重點,主要包括HUVEC、NO和SICAM-l等影響因素,因而需要對這些影響因素的測定方法進行研究。當然,體外培養的內皮細胞是血管功能研究中最常見的細胞培養方法,為了解決醫學上的這一問題,加大對游離脂肪酸和高糖對內皮細胞功能的影響研究力度顯得至關重要。
1 測定方法介紹
1.1 HUVEC原代細胞培養:HUVEC細胞培養方法是原代培養方法的一種,主要是采取健康嬰兒的細胞,先用膠原酶進行消化處理,再用培養液重新懸浮培養細胞,使得細胞活性達到一定的活性,然后,將懸浮后的細胞接種到培養皿中,在合適的環境下進行細胞培養。因此,HUVEC原代細胞培養是現代測定方法中非常重要的一種細胞培養方法。
1.2 NO的測定:NO測定法主要是對細胞上清液中的NO含量進行測定,由于NO的化學活性較高,很容易在人體內進新陳代謝過程轉化為硝酸鹽和亞硝酸鹽等,因此,采用硝酸還原法可以測定細胞中的NO水平。
1.3 SICAM-l測定:SICAW-1測定方法是采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗法對細胞上清液中的SICAM-1的含量進行測定,并且測定操作過程還應該嚴格按照試劑盒進行。同時,SICAM-1測定方法是現在比較先進的一種細胞培養的測定方法。
2 葡萄糖與FFA對內皮細胞形態學變化的影響
高濃度的葡萄糖和高濃度的FFA中的內皮細胞形態與對照組細胞有明顯的不同,然后,通過透射電鏡觀察觀察高濃度FFA作用下的內皮細胞的形態,主要觀察是否有空泡細胞樣產生,由于染色質一般都會聚集在核膜附近,因而形成凋亡小體。高濃度的FFA處理過的內皮細胞漿液中會出現大量的空泡,說明高糖和高濃度的FFA都能誘導內皮細胞發生凋亡。因此,葡萄糖與FFA對內皮細胞形態學變化具有非常大的影響。
3 討論
糖尿病血管并發癥是糖尿病的主要發病形態,并且血管內皮細胞對發病的關鍵,血管不僅不能阻隔血液與血管內膜下組分的接觸,同時,血管還能分泌出一些活性物質,進而能夠調節血管的收縮和白細胞移行等功能。在糖尿病狀態下,患者的血管很容易受到損傷,導致內皮細胞發生變化,因此,現在血管的損傷會是形成糖尿病并發癥的基礎。近年來,對糖尿病及其血管并發癥的研究已經成為醫學研究的熱點,大多數研究者都認為糖尿病及其并發癥是由于炎癥因子引起的血管問題,這也對糖尿病血管并發癥的發生起著非常重要的作用,這些炎癥因子主要包括內皮黏附分子、白介素系列和纖溶酶原激活物抑制物等。在患有糖尿病血管并發癥的情況下,這些炎癥因子的高低能夠反映糖尿病的異常現象。
糖尿病的血管損傷的具體原因目前還沒有明確的結論,但是,醫學上已經證實高濃度糖類和FFA是影響血管出現損傷的重要因素。FFA是脂類新陳代謝中最重要的一種物質,一旦人體類的FFA濃度升高到一定程度,就會導致血管出現功能性損傷。當然,FFA造成血管損傷的機理有很多種,主要包括誘導致細胞凋亡、一氧化氮合酶活性改變和細胞因子刺激等。目前,氧化損傷是醫學中研究的最大熱點,有研究人員研究表明,高濃度的FFA可以使得細胞內活性氧的濃度增大,進而導致血管損害。
激活的活性物質會導致NO濃度的減少,進而引起血管損傷,這也是引起糖尿病血管并發癥的原因之一。同時,高糖通過黏附到細胞分子上面,以成為糖尿病內皮功能損傷的一個重要機制。但是,造成細胞內皮損傷的類型有很多種,但都與腎病和心血管疾病等有關。然而,游離脂肪酸和高糖對內皮細胞功能引起的血管紊亂現象,研究表明導致血管收縮主要是由PKCD導致的。凝血酶也能刺激血管基因的表達,并且在HUVEC存在的情況下會刺激凝血酶。
通過研究采用靜脈血管內外培養細胞的方法,探討FFA對血管的損傷作用,結果表明,高糖和高濃度的FFA對血管的NO形成具有較好的抑制作用,同時,還能刺激SICAM-1的表達,然而,在高糖培養中加入FFA可以增大對血管的損傷。當然,游離脂肪酸和高糖還能誘導PKCD轉位,這也說明高糖和FFA對血管的損傷具有很大的影響。
4 總結
總而言之,血管的損傷是血管疾病的主要環節,FFA可能會通過氧化應激等方式損傷血管,導致細胞內皮組織中的NO濃度下降,同時,炎性物質ICAM-1的濃度也會升高,這在糖尿病血管并發癥的發生過程中具有非常重要的作用。FFA濃度已經成為引起糖尿病血管并發癥的重要因素,因此,應該及時對糖尿病患者FFA代謝進行控制,以改變PKCD對血管的功能,從而成為糖尿病并發癥又一個新的治療點。因此,現階段研究游離脂肪酸及高糖對內皮細胞功能的影響具有非常重大的現實意義。
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