心血管疾病患者與膽固醇酯轉運蛋白及某些基因缺陷

心血管疾病患者與膽固醇酯轉運蛋白及某些基因缺陷

王亞霞 邊 才 付立國 李曉丹

(牡丹江林業(yè)中心醫(yī)院 黑龍江 牡丹江 157011)

摘要：伴隨著我國醫(yī)療事業(yè)的發(fā)展，我國對于心血管疾病的研究逐漸深入，本研究將針對心腦血管疾病患者與膽固醇酯轉運蛋白及某些基因缺陷進行探究，希望能夠為患有心腦疾病患者的治療帶來一定的借鑒意義。

關鍵詞：心血管疾病；膽固醇酯轉運；基因缺陷 【中圖分類號】R543 【文獻標識碼】B 【文章編號】1672-8602(2014)03-0118-01

1 實驗對象

筆者統(tǒng)計了某院心肌梗死(MIS)94例、腦卒中組110例和健康組335名，均為男性，年齡45～73歲，平均年齡分別為60.1歲、58.5歲和59.2歲。健康人選自健康體檢者，包括臨床、心電圖和實驗室檢查正常。MIS和腦卒中組均為住院患者，MIS由典型的癥狀、心電圖和實驗室檢查證實。腦卒中診斷根據(jù)癥狀、神經系統(tǒng)和CT檢查，參加本研究的患者均處于恢復期。血液標本采自禁食12 h以上，2h內分離血清，-70℃保存，CETP基因檢查用EDTA抗凝(1 mg/ml)。

2 實驗方法

2.1 血清總膽固醇(TC)、TG、HDL-C測定：采用BM公司試劑盒及相應公式計算免疫比濁試劑，用上海明華公司試劑盒，以五點定標非線性標準曲線計算結果，校準血清用本室WHO-IFCC國際參考材料靶值轉移后的定值血清標定，校準血清用定值血清標定，測定儀器用日立7150生化自動分析儀。

2.2 CETP活性測定：人工合成14C-膽固醇酯標記的含apoAI的雙盤狀、雙層顆粒(DBP)模擬HDL，作為膽固醇酯的供體，人血清LDL(超速離心d1.020～1.045 kg/L)作為受體，2-硝基苯甲酸抑制卵磷酯膽固醇酰轉移酶活性。被檢血清與DBP孵育后加入DS(分子量500 000)、MgCl2沉淀LDL后溶于0.1 mol/L NaOH中，測定14C的DPM值，活性以DBP轉移到LDL中放射活性的百分率表示。

2.3 統(tǒng)計學方法：數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差( x±s)表示，數(shù)據(jù)處理采用t檢驗、卡方檢驗和相關性分析，非正態(tài)分布的CETP和Lp(a)經對數(shù)轉換后統(tǒng)計分析。

3 實驗結果與討論

3.1 實驗結果：心梗組、腦卒中組和對照組CETP和血脂測定結果：心梗組、腦卒中組與對照組比較，血清CETP濃度升高，HDL-C、載脂蛋白AI(apoAI)下降，TC、LDL-C、ApoB脂蛋白(a)[Lp(a)]升高。CETP基因突變者和健康人的CETP濃度與各項血脂測定結果之間均無相關性。心腦血管疾病患者和正常人CETP基因突變頻率：根據(jù)酶切PCR產物的PAGE圖譜判斷CETP基因突變，心腦血管疾病患者和健康人CETP基因突變結果示心腦血管疾病患者二種CETP基因突變頻率與健康人差異無顯著意義(x2=1.6，P>0.05)。CETP基因缺陷患者CETP濃度、活性和血脂測定結果:15例CETP基因缺陷者CETP濃度、活性和HDL-C較非基因缺陷者顯著降低。

3.2 結果討論： MIS和腦卒中患者血清CETP顯著高于健康人，同時患者呈現(xiàn)As脂蛋白譜改變，包括HDL-C、apoAI降低和LDL-C、apoB和Lp(a)升高，膽固醇從抗As脂蛋白重新分布到致As脂蛋白，但是本組病例并沒有發(fā)現(xiàn)CETP水平與各種脂蛋白之間存在因果關系。CETP與As的關系十分復雜，CETP對As總體的影響可能取決于機體的代謝狀態(tài)，如果膽固醇逆向轉運途徑的其他因素功能正常，CETP的主要作用有利于抗As;而在多種異常脂蛋白血癥(異常β脂蛋白血癥，家族性高膽固醇血癥和混合型高脂蛋白血癥)和一些疾病(糖尿病、腎病綜合征和As性心腦血管疾病)，CETP過度表達導致As脂蛋白譜，使膽固醇逆向轉運途徑發(fā)生障礙和促進As形成。中國人D442G和I14A的頻率與日本人相近(日本人D442G 4%～6%，I14A 0.5%～1.0%，兩者共計5%～7%)。對照非CETP基因突變者，CETP基因突變者血清CETP濃度和活性降低(P<0.01)，HDL-C均值明顯升高(P<0.01)。特別引人注目的是CETP基因突變雜合子的中國人，HDL-C≥80 mg/dl(2.07 mmol/L)的頻率比雜合子日本人少得多。中國北京居民D442G的頻率為4.2%，但基因突變者不伴有HDL-C升高，可能中國人CETP基因突變者的脂蛋白異常特征和對心腦血管疾病的影響與日本人有所差別。本研究的MIS和腦卒中患者CETP基因突變頻率不高于健康人，而大多數(shù)日本較大的人群調查發(fā)現(xiàn)CETP突變者CHD危險性增高，可能我們觀察的人數(shù)相對較少。結果為高HDL-C人群中CETP基因突變者與非基因突變者CHD發(fā)病率沒有差異。雖然流行病學調查存在不同的結果，但一些研究指出，CETP缺陷者有HDL、VLDL、LDL等質和量的改變和脂蛋白代謝異常。例如CETP缺陷者血清中大的和富含膽固醇的HDL顆粒抑制巨噬細胞乙酰LDL致膽固醇酯積蓄能力下降，使周圍細胞膽固醇流出減少;膽固醇酯含量下降，甘油三酯增加的VLDL、LDL與LDL受體親和力降低，在循環(huán)中清除速度減慢;CETP降低同時伴肝酯酶活性降低致富含甘油三酯的HDL堆積，阻滯CRT等，以上結果一方面說明CETP缺陷者CETP降低、HDL-C升高等與心腦血管疾病患者有截然不同的特點，另外亦解釋了CETP缺陷者脂蛋白組成和功能異常可能是高發(fā)心腦血管疾病的原因。

4 結語

綜上所述，As作為十分復雜的病理過程涉及環(huán)境和遺傳兩種因素的綜合影響，因此需要更多的臨床和基礎研究才能進一步評價CETP基因缺陷與As的關系。

參考文獻

[1] 莊一義，汪俊軍，李勇.膽固醇酯轉運蛋白的提純和鑒定.中華醫(yī)學檢驗雜志，2009，22:101-103.

[2] Hui SP.Frequency and effect on plasma lipoprotein metabolism of amutation in the cholesteryl ester protein gene in the Chinese.HokkaidoIqaku Zasshi，2007，73:319-327.

[3] IglesiasA，MontelongoA，Herrera E，etal.Changesin cholesteryl estertransfer protein activity during normal gestation and postpartum.ClinBiochem，2004，27:63-68.