(1-3)-β-D葡聚糖檢測與真菌培養聯合檢測對臨床深部真菌感染的對比研究

摘要：目的: 評估血清(1-3)-β-D葡聚糖檢測定量分析(G實驗)與真菌培養聯合檢測對臨床深部真菌感染的診斷意義。所有真菌細胞膜上都含有(1-3)-β-D葡聚糖，而其他微生物、動物及人的細胞成分和細胞外液都不含這種成分，因此在機體的體液中檢測到(1-3)-β-D葡聚糖是診斷深部真菌感染的有效依據。方法: 通過回顧性分析80例懷疑深部真菌感染住院患者的G實驗和真菌培養結果，分別計算兩種方法及聯合檢測的靈敏度、特異度、陽性和陰性預測值。結果: G實驗和真菌培養聯合檢測的靈敏度、特異度、陽性和陰性預測值分別為88.0%、96.0%、91.7%和94.1%。G實驗的靈敏度和陽性預測值高，真菌培養的特異度高。結論:血清(1-3)-β-D葡聚糖檢測和真菌培養聯合檢測可提高實驗的靈敏度，減少假陰性的發生，對早期診斷深部真菌感染有一定臨床意義。

關鍵詞：(1-3)-β-D葡聚糖；真菌培養；深部真菌感染 【中圖分類號】R446 【文獻標識碼】B 【文章編號】1672-8602(2014)03-0210-01

近年來隨著廣譜抗菌藥物、免疫抑制劑和抗腫瘤藥物的廣泛應用，臨床深部真菌感染率不斷上升，已成為醫院感染的主要原因之一。一般來說，通常發生于危重患者，而且病情極易被原發病掩蓋，從而導致誤診、漏診[1]。通過此研究的結果以便對危重病人深部真菌感染早發現、早治療降低死亡率。據統計，近30年深部真菌感染的發病率增加了3~5倍，真菌感染已成為艾滋病的重要死亡原因之一。引起深部真菌感染的病原菌主要有念珠菌病、孢子絲菌病、隱球菌病、曲霉菌病、毛霉菌病、馬爾尼菲青霉菌病、組織孢漿菌病以及球孢子、副球孢子菌病等臨床病癥。由于傳統的培養方法不能及時提供深部真菌感染的信息，目前一些快速診斷技術，如高分辨CT(HRCT)及檢測真菌抗原和核酸的非培養診斷技術得到快速發展。通過檢測體液中真菌抗原或代謝物來診斷深部真菌感染的研究很多[2]。本文對80例懷疑IFI患者的血標本進行了G實驗和真菌培養，現將結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料:選擇2012年9月至2014年2月在本院住院懷疑IFI的患者80例，其中男49例，女31例，年齡19~70歲。

1.2 研究方法:(1) G實驗：MB-80微生物動態快速檢測系統、T01智能恒溫儀、冰浴槽以及GKT-5M Set動態真菌檢測試劑盒，均為北京金山川科技發展公司產品。嚴格按儀器操作說明書操作。(2) 真菌培養：質控菌株白色念珠菌(ATCC10231)購于衛生部臨檢中心;沙保羅培養基購于英國OXOID公司。

1.3 診斷標準：G實驗的檢驗結果大于10 ng/L為陽性。

1.4 統計學處理：應用統計學軟件SPSS17，對檢測數據進行統計學分析，數值以均數±標準差(x±S)，計量采用t檢驗，計數資料進行X2檢驗，以P<0.05為有統計學差異。

2 結果與分析

2.1 分別采用(1-3)-β-D葡聚糖檢測和真菌培養對診斷IFI的靈敏度和特異度， (1-3)-β-D葡聚糖檢測為72%和90%，真菌培養為80%和86%，(1-3)-β-D葡聚糖檢測和真菌培養聯合檢測的靈敏度為88%，特異度為96%，其陽性預測值(PPV)和陰性預測值(NPV)也分別提高到91.7%和94.1%。見表1。

表1 (1-3)-β-D葡聚糖檢測與真菌培養的靈敏度和特異度

檢測方法 IFI(n=29) 非IFI

(n=51) 敏感度

(%) 特異度

(%) PPV

(%) NPV

(%)

G實驗陽性21673.590.880.187.2

真菌培養陽性23881.087.075.690.2

G實驗+真菌培養陽性25388.996.592.195.0

2.2 80例高度懷疑IFI患者中，臨床診斷為IFI29例，非IFI51例。其中29例IFI患者(1-3)-β-D葡聚糖陽性21例，真菌培養陽性23例;G實驗和真菌培養聯合檢測陽性25例。見表2。

表2 (1-3)-β-D葡聚糖檢測和真菌培養結果

對比項目 nG實驗

陽性陰性 真菌培養

陽性陰性 G實驗+真菌培養

陽性陰性

IFI29218236254

非IFI51645744348

3 討論

隨著醫療技術的發展，使危重患者的生存時間越來越長，廣譜抗生素廣泛的使用和免疫抑制劑的應用改善了器官移植患者的器官排異，但深部真菌感染( invasive fungal infection， IFI)比以前更常見。盡管進行有力的抗真菌治療，深部真菌感染的死亡率仍居高不下，原因之一就是深部真菌感染的早期診斷困難，從而造成抗真菌治療的延遲[3]。真菌培養需要的時間相對較長，一般要48 h，有的需要74~96 h。另一個問題是將帶菌者誤診為IFI，這在臨床上很常見[4]。1，3-B-D葡聚糖廣泛存在于真菌的細胞壁中，所有真菌的細胞壁結構均含有1，3-B-D葡聚糖，占細胞干重50%以上。而在淺部真菌感染中，1，3-B-D葡聚糖未被釋放出來，故其在體液中的量不增高。因此，通過檢測細胞壁1，3-B-D葡聚糖的含量，可以更早、更靈敏、更直接反映IFI的程度。G實驗(1-3)-β-D葡聚糖檢測作為一種新的診斷IFI的檢測手段， 有著靈敏度和特異度高的特點，有利于臨床對IFI患者的早期診斷。利用(1-3)-β-D葡聚糖檢測和傳統真菌培養相結合的方法，不但可進一步提高敏感度和特異度，而且還可提高陽性預測值和陰性預測值，使檢測結果更加準確可靠。

參考文獻

[1] 歐維正，黃進友，蘇信斌.貴州地區網織紅細胞各參數的參考值調查[J].江西醫學檢驗，2006，24(5):422-425.

[2] 鄧林強，余理智，熊章華，等.血漿(1-3)-B-D葡聚糖檢測和真菌培養在診斷深部真菌感染的臨床價值[J].實驗與檢驗醫學，2008，26(6):601-602.

[3] Pickering JW，Sant HW，Bowles CAP，et al.Evaluation ofa (1-3)-B-D-glucan assay for diagnosis of invasive fungalinfections[J].J Clin Microbiol，2005，43(12):5957-5962.

[4] 張利俠，李芒會，張華，等.檢測血漿(1-3)-B-D葡聚糖對深部真菌感染診斷的研究[J].西北大學學報:自然科學版，2009，39(1):83-86.