HPLC法測定益脈康膠囊中野黃芩苷的含量

摘要：目的： 建立測定益脈康膠囊中野黃芩苷的方法。方法： 色譜柱為（Agilent C18柱5μm，250×4.0ｍｍ）；流動相: 以甲醇-0.1%磷酸溶液（40：60）；檢測波長335nm nm；流速1.0ml/min。結果： 野黃芩苷進樣量線性范圍在0.15～1.20μg， r=0.9998），平均回收率為100.69%，RSD=1.75 % (n=6)。結論： 方法準確、專屬性強，可作為益脈康膠囊中野黃芩苷的定量分析方法。

關鍵詞： 益脈康膠囊；野黃芩苷；高效液相色譜 【中圖分類號】R284 【文獻標識碼】B 【文章編號】1672-8602(2014)03-0203-02

益脈康膠囊是由燈盞細辛藥材經提取制成，具有活血化瘀，有改善腦血循環，增加腦血流量，增加心肌對缺血、缺氧的耐受性，改善微循環的作用。用于缺血性腦血管病及出血后遺癱瘓，眼底視網膜靜脈阻塞，冠心病，血管炎性皮膚病，風濕病。為完善產品質量標準，本文建立了采用HPLC單波長同時測定益脈康膠囊中野黃芩苷的方法。

1 儀器、試劑和樣品

儀器：Agilent 1100 高效液相色譜儀，Agilent VWD檢測器，HP二維化學工作站；GR-202型電子天平。試劑：甲醇為色譜純，水為重蒸餾水，其它試劑均為分析純。野黃芩苷對照品：中國藥品生物制品檢定所提供（880-200001，供含量測定用）。樣品：益脈康膠囊、缺燈盞細辛浸膏的陰性樣品。

2 方法與結果

2.1 色譜條件：色譜柱：Agilent C18柱5μm，250×4.0ｍｍ；流動相：以甲醇-0.1%磷酸溶液（40：60），流速：1ml/min，檢測波長：335 nm；柱溫：室溫。

2.2 樣品制備及專屬性考察

2.2.1 對照品溶液： 精密稱取野黃芩苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。

2.2.2 供試品溶液制備：取本品，研細，取約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，水浴中加熱回流1小時，取出，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，作為供試品溶液。

2.2.3 陰性樣品溶液制備：另取不含燈盞細辛浸膏的陰性樣品［按益脈康膠囊配方（刪除燈盞細辛浸膏），采用該膠囊劑制備工藝制得的樣品］，照供試品溶液項下操作制備成陰性樣品溶液。

2.2.4 測定方法：分別取對照品溶液、供試品溶液和陰性樣品溶液5μl注入液相色譜儀，測定，論板數按野黃芩苷峰計算應不低于3000。結果陰性樣品在相同位置無干擾。

附圖 對照品、供試品及陰性樣品的HPLC圖譜2.3 線性關系考察 精密稱取(五氧化二磷減壓干燥24小時)野黃芩苷對照品15.00mg，置50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為野黃芩苷對照品貯備液。精密吸取野黃芩苷對照品貯備液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0 ml，分別置于10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液（濃度分別為30μg/ml、60μg/ml、120μg/ml、180μg/ml、240μg/ml），測定，記錄峰面積，并以峰面積值為縱坐標，進樣量為橫坐標，繪制標準曲線，得標準曲線方程為：Y=2241.1X-30.737， 相關系數r=0.9998 試驗結果表明，進樣量在0.15～1.20μg范圍內，進樣量與峰面積值呈良好線性關系。

2.4 儀器精密度和樣品穩定性、重復性試驗：取同一份供試品溶液（批號：021201）及同一份野黃芩苷對照品溶液（含野黃芩苷120μg/ml），分別進樣5次， RSD對=2.09%， RSD供=2.41%結果表明：進樣精密度良好。 取同一份供試品溶液（批號：021201），分別于放置0、2、5、8、10小時后進樣5μl，測定，共測定5次，測得穿心蓮內酯平均峰面積為1158.0，RSD=2.00%；表明供試品溶液在10小時內穩定性良好。對同一批樣品（批號：021201），按擬定的制備方法平行測定5份，依法檢測其含量，含量平均值為：12.56mg/g，RSD=1.15%，試驗表明：本法重復性試驗結果良好。

2.5 回收率試驗：取六份已知含量的樣品（批號：021201，含量為12.56mg/g ）各約0.1 g，精密稱定，分別精密加入野黃芩苷對照品甲醇溶液（52.4μg /ml）25ml，照本品含量測定方法測定，結果野黃芩苷平均回收率為100.69，RSD為1.75 %，試驗結果表明本方法準確度良好。

2.6 樣品測定： 取10批樣品按\"2.2.2\"項下制備成供試品溶液，依法測定，結果見下表。

批號 野黃芩苷含量（mg/粒）

021201 5.97

030101 4.85

030102 3.94

030103 5.67

0302013.52

030202 3.98

030203 3.55

030301 3.96

0303025.06

030303 3.69

3 討論

3.1 燈盞細辛為本方臣藥，本方法選擇燈盞細辛主要有效成分野黃芩苷為檢測成分，共檢測了10批成品的含量，結果表明該方法穩定可行，方法簡便準確。

3.2 本方法準確靈敏，可作為益脈康膠囊中野黃芩苷有效成分的定量分析方法，為進一步制益脈康膠囊質量標準提供了依據，并對含有燈盞細辛藥材的其他產品的檢測也具有一定的參考價值。

參考文獻

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：2010年版一部.