炮制過程中浸煮時間對于芍藥主成分含量的影響

摘要：目的研究白芍炮制過程中，浸煮時間對芍藥苷含量的影響。方法采用高效液相色譜法測定芍藥苷含量，比較不同浸煮時間下，芍藥苷含量的變化；色譜條件：Xtimate C18(4.6×250mm，5μm)；流動相：乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86）；柱溫：30℃；檢測波長：230 nm；流速：1 mL/min。結果在20.4~102 μg/mL范圍內線性關系良好（r=0.9993，n=5），平均回收率96.124%，RSD=2.29%（n=5）；白芍在炮制過程中，浸煮時間長短對芍藥苷的含量存在較大影響。結論該方法不受其他成分的干擾，簡便、準確，能用于芍藥苷含量的測定，通過篩選合適的浸煮時間，有效提高了白芍藥材的品質。

關鍵詞：高效液相色譜法；浸煮時間；芍藥苷；含量測定

Effect of Processing in the Process of Digestion Time for Content of Main Components of Peony

SU Zuo-lin

(Guangxi Lingfeng Pharmaceutical Co.， Ltd.，Hezhou 542800，Guangxi，China)

Abstract：ObjectiveTo establish the different time of steeping and boiling affect the content of paeoniflorin in White Paeony Root. MethodsUse High Performance Liquid Chromatography to determine the content of paeoniflorin， compare with different time of steeping and boiling that the variation of the content of paeoniflorin. chromatographic condition:Xtimate C18(4.6mm×250mm，5μm); moving phase: acetonitrile-0.1%phosphoric acid(14:86) column temperature: 30℃. determine wavelength:230nm.flow rate:1mL/min. ResultsThere is a good linear relation during 20.4~102μg∕mL（r=0.9959，n=5），the average recovery rate 96.124%，RSD=2.29%（n=5）；the procedure of White Paeony Root processing，differenttime of steeping and boiling have a great effect on the content ofpaeoniflorin in White Paeony Root. ConclusionAs a result of other composition don't interference with the process ，it is accurate，simple and convenientant.For this reason ，the process can use to determine the content ofpaeoniflorin .

Key words：High performance liquid chromatography; Soaking time; Paeoniflorin; Content determination白芍為毛茛科植物芍藥Paeonia lactiflora Pall的干燥根。苦、甘、澀，微寒。具有收斂止血，消腫生肌的功效，用于頭暈、脅痛、腹痛、四肢攣痛、血虛萎黃、月經不調、自汗等[1]，主產于安徽、四川等地[2]。目前，多用芍藥苷的含量及總苷含量控制芍藥總苷質量，芍藥苷為單萜類化合物，是芍藥的主要活性成分，具有水溶性，在芍藥炮制過程中需經過沸水浸煮，控制浸煮時間對藥材中芍藥苷的保存具有重要意義。10版藥典一部的藥材炮制通則中規定[3]，凈藥材加水或液體輔料共煮至容易完全被吸盡，或切開內無白心時，取出，干燥。但實際操作過程中炮制中浸煮時間過久芍藥苷隨浸煮液流失，或浸煮時間過短未能使藥材中蛋白質完全變性導致的代謝損失。因此，本論文對于白芍不同浸煮時間下芍藥苷的含量進行了測定，比較得出合適的浸煮時間，報道如下。

1儀器與試藥

1.1儀器 Agilent 1200液相色譜儀（美國安捷倫公司，四元泵，可變波長檢測器G1314B），電子分析天平，KQ-100DE型數控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司），艾科浦超純水系統AFZ-1001-U(艾科浦公司)。

1.2試劑和藥品 芍藥苷對照品（paeoniflorin。含量≥98%，上海金穗生物科技有限公司，批號：20130307），甲醇（美國TEDIA公司，色譜純），乙腈（美國TEDIA公司，色譜純），甲醇（國藥集團化學試劑有限公司，分析純），乙醇（國藥集團化學試劑有限公司，分析純），磷酸（國藥集團化學試劑有限公司，分析純），水為艾科浦純水系統制備的超純水。白芍（購于安徽省亳州），經廣西中醫藥大學賽恩斯新醫藥學院生藥教研室苑敏副教授鑒定為毛茛科植物白芍。

1.3方法與結果

1.3.1色譜條件 Xtimate C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動相：乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86）；柱溫：30℃；檢測波長：230 nm；流速：1 mL/min。理論塔板數按芍藥苷峰計算應≥2000。色譜圖見圖1、圖2。

1.3.2對照品溶液制備 精密稱取3.12 mg芍藥苷對照品，置于50 mL容量瓶中加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，過微孔濾膜，取續濾液，即得。

1.3.3供試品溶液的制備 分別取5種浸煮時間不同的藥材粉末各0.1 g，精密稱定，置50 mL容量瓶中，加稀乙醇（取529 mL加水稀釋至1000 mL即得。在20℃時含乙醇應為49.5%~50.5%）35 mL，超聲處理（頻率45 KHz）30 min，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，濾過，用微孔濾膜（0.22 μm）過濾，取續濾液，即得。

1.3.4線性范圍考察 精密吸取芍藥苷對照品溶液2、4、6、8、10 μL依次進樣，以進樣量(X)為橫坐標，峰面積(Y)為縱坐標，得回歸方程Y=12.182X-64.950（r=0.9993，n=5）。表明芍藥苷在20.4~102 μg范圍內與峰面積呈良好線性關系。

1.3.5方法學考察

1.3.5.1重復性試驗 取同一批樣品6份，分別測定含量，計算得RSD為1.80%，表明實驗重復性良好。

1.3.5.2穩定性試驗 取未經過浸煮的芍藥供試品溶液，精密吸取10 μL，按上述2.1色譜條件在0，2，4，8，12，24 h依次測定芍藥苷峰面積，計算得RSD為0.68%，表明實驗穩定性良好。

1.3.5.3加樣回收率實驗 采用加樣回收法，取已知含量的白芍藥材5份，分別添加不同量的芍藥苷對照品，按上述色譜條件測定，根據回歸方程計算得平均回收率為96.12%，RSD為2.29%。

1.3.5樣品測定 分別取5種浸煮時間不同的藥材粉末各1.0 g，精密稱定，按上述供試品溶液制備方法操作，制得供試品溶液各取10 μL，注入高效液相色譜儀，按上述1.3.1中色譜條件測定，見表1、圖3。

圖3 芍藥苷含量與浸煮時間關系曲線

3討論

上述實驗結果表明，以芍藥苷含量Y(%)對浸煮時間X(min)進行回歸分析，得回歸方程Y=-0.0019X2+0.0802X+3.9427。芍藥藥材中芍藥苷的含量和浸煮時間成二次函數關系，浸煮時間以20 min前后最為合適，此時藥材中芍藥苷含量較高，炮制出的藥材品質相對較高。

參考文獻：

[1]中華人民共和國衛生部藥典委員會.中國藥典，一部[S].北京:中國醫藥科技出版社，2010:96．

[2]《中華本草》編委會.中華本草，第3冊[M].第1版.上海:上海科學技術出版社，1999:515.

[3]鮑邢杰，宿樹蘭.對《中國藥典》2010 版Ⅰ部中白芍中芍藥苷含量測定方法的探討[J].時珍國醫國藥，2012，23(5):1309.編輯/肖慧