單采血小板保存期內(nèi)聚集功能的變化研究

摘要：目的 觀察機(jī)采血小板在保存期內(nèi)的變化。方法 選擇30例單采血小板，置22℃血小板保存箱，水平振搖，保存7d。分別在0d（采血的當(dāng)天）、3d、5d、7d留取樣品檢測(cè)血小板聚集率（PAgT%）。結(jié)果 隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，血小板聚集率明顯下降（P<0.05）。結(jié)論 單采血小板聚集功能在保存期發(fā)生明顯變化。

關(guān)鍵詞：機(jī)采血小板；血小板聚集率；保存時(shí)間

血小板是血液有形成分中相對(duì)密度最小的一種細(xì)胞組分，相對(duì)密度約為1040，用離心法可以從血液中分離血小板。目前血小板制劑的制備方法有兩種：①手工法，制備出的血小板為濃縮血小板制劑，并可進(jìn)行多人份匯集保存和輸注；②用血細(xì)胞分離機(jī)從單一獻(xiàn)血者體內(nèi)進(jìn)行直接采集，制備的血小板稱為單采血小板。與手工制備血小板相比，單采血小板具備純度高、質(zhì)量好等優(yōu)點(diǎn)。未經(jīng)處理并采用血小板專用保存袋的單采血小板保存期可達(dá)5d[1]。本文擬對(duì)單采血小板保存7d之內(nèi)的血小板聚集率進(jìn)行檢測(cè)，以期能更好的評(píng)估血小板的保存質(zhì)量。

1資料與方法

1.1一般資料 CS3000血小板常溫保存袋（Baxter公司，美國），CS-3000 plus血細(xì)胞分離儀（Baxter公司，美國），CHRONO-LOG560CA血小板凝集儀（美國），HELMER血小板恒溫振蕩保存箱（美國）。

1.2方法：

1.2.1樣品的采集與分組 30位健康自愿獻(xiàn)血者，按操作規(guī)程用CS-3000plus血細(xì)胞分離機(jī)采集濃縮血小板懸液，每單位血小板含量為（2.5～3）×1011。將每一單位血小板用進(jìn)口血小板常溫保存袋（Baxter公司產(chǎn)品）保存，置22℃血小板保存箱，水平振搖，保存7d。分別在0d（采血的當(dāng)天）、3d、5d、7d留取樣品檢測(cè)。

1.2.2血小板聚集功能的檢測(cè) 致聚劑為膠原，終濃度為2nM/ml。取專用試管2只，分別標(biāo)明PPP（貧血小板血漿）和PRP（富血小板血漿）。血小板原液2ml，3000r離心10min，吸出上清液轉(zhuǎn)移至PPP管；另取血小板原液0.5ml于PRP管，加入1ml PPP混均，使血小板計(jì)數(shù)約為300×109/L。用0.5mlPPP調(diào)零點(diǎn)。將0.5mlPRP加入測(cè)試杯，加磁力攪拌珠，加膠原2ul，采用光學(xué)法用血液凝集儀測(cè)定，記錄8min血小板聚集曲線和血小板最大聚集率[2]。

1.2.3統(tǒng)計(jì)處理 采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行重復(fù)測(cè)量的方差分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，P<0.05表示有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

3討論

血小板的主要功能是凝血和止血，修補(bǔ)破損的血管。血小板的表面糖衣能吸附血漿蛋白和凝血因子Ⅲ，血小板顆粒內(nèi)含有與凝血有關(guān)的物質(zhì)。當(dāng)血管受損害或破裂時(shí)，血小板受刺激，由靜止相變?yōu)闄C(jī)能相，迅即發(fā)生變形，表面粘度增大，凝聚成團(tuán)；同時(shí)在表面第Ⅲ 因子的作用下，使血漿內(nèi)的凝血酶原變?yōu)槟?，后者又催化纖維蛋白原變成絲狀的纖維蛋白，與血細(xì)胞 共同形成凝血塊止血。血小板顆粒物質(zhì)的釋放，則進(jìn)一步促進(jìn)止血和凝血。因此，血小板具有維持血管內(nèi)皮完整性的功能和黏附、聚集、釋放、促凝和血塊收縮功能[3]。血小板之間的黏附叫聚集，血小板聚集是血小板參與止血和血栓形成的重要環(huán)節(jié)[4]。血小板輸注是治療各種原因引起的血小板減少性和功能障礙性出血的有效方法，其主要作用是促進(jìn)止血和加速凝血[5]。因此，檢測(cè)血小板聚集功能是評(píng)估血小板功能的一個(gè)重要方法，能夠提高血小板輸注的效果。

當(dāng)前，血站對(duì)血小板的質(zhì)量檢測(cè)主要集中在血小板計(jì)數(shù)。我國規(guī)定單采血小板計(jì)數(shù)應(yīng)達(dá)到≥2.5×1011/袋，白細(xì)胞混入量≤5.0×108/袋，紅細(xì)胞混入量≤8.0×109/袋[1]。實(shí)際上，血小板計(jì)數(shù)在不同保存期、不同溫度條件下基本上沒有什么變化，因?yàn)檠“逶谘?xì)胞計(jì)數(shù)儀檢測(cè)中是以顆粒的方式出現(xiàn)，只與血小板的形狀和大小有關(guān)，與血小板的功能特性沒有關(guān)系[5]。因此，血小板計(jì)數(shù)檢測(cè)只能檢測(cè)血小板的數(shù)量，并不能證實(shí)血小板功能正常?；谏鲜隼碛桑覀冇斜匾跈z測(cè)單采血小板計(jì)數(shù)之外，還應(yīng)對(duì)血小板的功能進(jìn)行檢測(cè)。本研究檢測(cè)單采血小板的聚集率，以期評(píng)估血小板的聚集功能。由表1可見，隨著保存時(shí)間的延長(zhǎng)，血小板聚集率顯著下降（P<0.05），說明血小板的聚集功能越來越差，可能損傷單采血小板的止血功能，導(dǎo)致血小板輸注療效的下降。

綜上所述，采供血機(jī)構(gòu)在采集、制備血小板制品時(shí)，應(yīng)該制定一套完整的質(zhì)量控制體系。在常規(guī)檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)、混入血小板中的白細(xì)胞數(shù)量和紅細(xì)胞數(shù)量之外，還應(yīng)該增加血小板的功能檢測(cè)，全面控制血小板的質(zhì)量，提高血小板輸注的療效。

參考文獻(xiàn)：

[1]胡麗華.臨床輸血學(xué)檢驗(yàn)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2012：146-150.

[2]中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第3版）[Z].2006，11，1.

[3]熊立凡，劉成玉.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)，第4版[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2007：66-67.

[4]劉方鶴，榮敬娟，曹珍珍.血小板聚集檢測(cè)方法及質(zhì)量控制[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2013，7（23）：34-35.

[5]李天君，趙峰，張印則，等.血小板功能特性質(zhì)量檢測(cè)方法學(xué)研究[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，10（10）：727-729.

編輯/申磊