摘要:目的 評(píng)估血小板計(jì)數(shù)、平均體積及分布寬度在血小板保存過(guò)程中的變化。方法 來(lái)自于自愿獻(xiàn)血者的30例單采血小板,置于血小板常溫保存箱保存5d。分別在保存的第1d、第3d、第5d留取樣品檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)、平均體積及分布寬度。結(jié)果 隨著保存時(shí)間的延長(zhǎng),血小板計(jì)數(shù)、平均體積及分布寬度沒(méi)有發(fā)生明顯改變(P>0.05)。結(jié)論 血小板的體外保存對(duì)血小板計(jì)數(shù)、平均體積及分布寬度無(wú)影響。
關(guān)鍵詞:血小板;平均體積;體積分布寬度;血小板保存;血小板計(jì)數(shù)
血小板是人體內(nèi)唯一具有止血和凝血功能的血細(xì)胞,目前尚未發(fā)現(xiàn)可與其功能相媲美的代替品。目前血站主要提供手工分離濃縮血小板和單采血小板,后者通過(guò)血細(xì)胞分離機(jī)進(jìn)行采集制備而成。單采血小板因?yàn)槠錆舛雀吆图兌群玫膬?yōu)點(diǎn),臨床療效好。其采用血小板專用保存袋進(jìn)行保存,存儲(chǔ)在22℃專用血小板保存箱內(nèi),保存期為5d[1]。筆者擬在血小板保存的不同時(shí)間段對(duì)血小板計(jì)數(shù)、平均體積(MPV)及分布寬度(PDW)進(jìn)行檢測(cè),評(píng)估血小板的保存對(duì)這三項(xiàng)指標(biāo)的影響。
1 資料與方法
1.1一般資料 CS3000血小板常溫保存袋(Baxter公司,美國(guó)),CS-3000 plus血細(xì)胞分離儀(Baxter公司,美國(guó)),HELMER血小板恒溫振蕩保存箱(美國(guó)),XT-2000型血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀(Sysmex公司,日本)。
1.2方法
1.2.1樣品采集與處理 招募30位健康自愿獻(xiàn)血者,按照血站標(biāo)準(zhǔn)采用CS-3000plus血細(xì)胞分離機(jī)采集濃縮血小板懸液,每治療量血小板含量為(2.5~3)×1011,用CS3000血小板常溫保存袋保存,置于22℃血小板保存箱保存5d,分別在d0、d3、d5留取樣品檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)、平均體積(MPV)及體積分布寬度(PDW)。
1.2.2檢測(cè) 按照常規(guī)方法,采用XT-2000型血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定血小板計(jì)數(shù)、平均體積(MPV)及體積分布寬度(PDW)。
1.2.3統(tǒng)計(jì)處理 采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行重復(fù)測(cè)量的方差分析,計(jì)量資料以(x±s)表示,P<0.05表示有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
2 結(jié)果
在血小板保存期內(nèi),隨著保存時(shí)間的延長(zhǎng),血小板計(jì)數(shù)、平均體積及分布寬度均無(wú)明顯改變(P>0.05),見表1~表3。
3 討論
血小板是哺乳動(dòng)物血液中的有形成分之一,是從骨髓成熟的巨核細(xì)胞胞質(zhì)裂解脫落下來(lái)的具有生物活性的小塊胞質(zhì),只存在于哺乳動(dòng)物的血液中。體積小,無(wú)細(xì)胞核,呈雙面微凸的圓盤狀,正常值為(100-300)×109/L,直徑為2~3μm。血小板具有特定的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生化組成,在正常血液中有較恒定的數(shù)量(如人的血小板數(shù)為每立方毫米10~30萬(wàn)),在止血、傷口愈合、炎癥反應(yīng)、血栓形成及器官移植排斥等生理和病理過(guò)程中有重要作用。血小板輸注作為成分輸血之一,有著廣泛的應(yīng)用,特別是在血液系統(tǒng)疾病、腫瘤放化療導(dǎo)致的血小板減少和復(fù)雜外科手術(shù)方面[2]。早期研究發(fā)現(xiàn)血小板在體外保存過(guò)程中發(fā)生了一系列形態(tài)和功能的變化。在體外保存過(guò)程中,血小板的雙面圓盤結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,大量偽足形成,α顆粒融合,致密體減少,基質(zhì)中出現(xiàn)肌動(dòng)纖維細(xì)絲聚集成團(tuán)和肌球蛋白結(jié)晶。保存過(guò)程中的血小板活化及細(xì)胞內(nèi)Ca2+增加導(dǎo)致的微纖維肌動(dòng)蛋白聚集是造成血小板形態(tài)發(fā)生不可逆改變的根本原因[3]。
本研究發(fā)現(xiàn),血小板在保存過(guò)程中,血小板計(jì)數(shù)沒(méi)有明顯變化(P>0.05),見表1,這說(shuō)明血小板的數(shù)量在保存過(guò)程中基本上沒(méi)有變化。MPV指的是血小板體積的平均值,其正常范圍為9~13fL。PDW是反映血液內(nèi)血小板體積變異的參數(shù),以測(cè)得的血小板體積大小的變異系數(shù)表示,其正常范圍為(15.5~18.1)%。PDW在正常范圍內(nèi)表明血小板體積均一性高。由表2和表3可見,在體外保存過(guò)程中,血小板的MPV和PDW均在正常范圍之內(nèi),并且沒(méi)有明顯改變(P>0.05)。由此可見,血小板的大小在保存過(guò)程也沒(méi)有發(fā)生明顯變化。雖然早期研究發(fā)現(xiàn)血小板的形態(tài)在體外保存時(shí)發(fā)生明顯改變,但是本研究發(fā)現(xiàn)血小板的數(shù)量和大小均基本保持一致,變化不明顯,這可能是因?yàn)檠“逶跈z測(cè)時(shí)是以顆粒的形式存在有關(guān)[4]。但是血小板的形態(tài)是否發(fā)生改變和怎么改變,還需通過(guò)透射電鏡進(jìn)行進(jìn)一步研究。那么,血小板的數(shù)量和大小沒(méi)有發(fā)生改變,是否代表血小板的質(zhì)量得到保證?大量研究證實(shí),體外保存血小板的功能發(fā)生了明顯改變,血小板活化和聚集增強(qiáng),代謝改變,這些變化可能會(huì)影響到血小板的輸注療效[5]。
限于技術(shù)和條件的不足,目前血站供應(yīng)的血小板制品,往往僅僅以血小板數(shù)量≥2.5×109/袋、紅細(xì)胞混入量≤8.0×109/袋及白細(xì)胞混入量≤5.0×108/袋為質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),對(duì)其功能沒(méi)有任何檢測(cè)[1]。筆者認(rèn)為,血小板輸注作為臨床一個(gè)不可替代的治療手段,血小板功能的不足一定會(huì)影響其輸注的療效,建議采供血機(jī)構(gòu)應(yīng)該建立一套完整的血小板質(zhì)量控制體系。在此之外,是否可以尋求其他辦法抑制血小板功能的改變?比如新型的血小板保護(hù)液或者更好的血小板保存袋,值得進(jìn)一步研究。
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編輯/哈濤