文冠木噴霧劑中總黃酮含量測定

摘要：目的 建立文冠木噴霧劑中總黃酮的含量測定方法。方法 采用紫外分光光度法，通過紫外可見掃描確定最大吸收波長，以蘆丁為對照品制定標準曲線，并進行樣品溶液穩定性實驗和方法回收率與重復性實驗。結果 最大吸收波長為500nm，標準曲線線性范圍為10.520mg/L～63.120mg/L，r=0.9997。平均回收率為95.09%，RSD=1.61%，符合要求。結論 該方法簡單方便、準確可靠，可以用來進行文冠木噴霧劑中總黃酮的含量測定。

關鍵詞：文冠木；總黃酮；紫外分光光度法

Abstract：Objective To establish a method for determination of total flavonoids inXanthoceras sorbifolia spray. Methods Using UV spectrophotometry， UV Vis scanto determine the maximum absorption wavelength， with rutin as a standard to make the standard curve， and the sample solution stability experiment andrecovery rate and repeatability. Results The maximum absorption wavelength is 500nm， the linear range of standard curve is 10.520～ 63.120mg/L，r=0.9997. The average recovery was 95.09%， RSD=1.61%， meet the requirements. Conclusion The method is simple， accurate and reliable， can be used for the determination of content of total flavonoids in Xanthoceras sorbifoliaspray.

Key words： Xanthoceras sorbifolia Bunge；Total flavonoids； UV Spectrophotometry

文冠木處方由三類藥物構成，即文冠木、黃連和人工牛黃。文冠木為無患子科植物文冠木（Xant Hoceras Sorbifolia Bge.）的莖干或枝條的無皮干燥木部，是一種常用的蒙藥材。主要用于治療風濕性關節炎、風濕內熱、皮膚風濕、風濕性心臟病等病癥[1]，其中有效成分為總黃酮。黃連[2]為毛莨科植物黃連，三角葉黃連或云南黃連的干燥根莖。黃連的藥用始載于《神農本草經》，列為上品，能清熱燥濕，瀉火解毒，現代研究表明黃連的有效成份主要為小檗堿（即黃連素Berberine），含量可達10%左右。人工牛黃[3]由膽酸、豬去氧膽酸、膽紅素、膽固醇等配制而成，具有清心、豁痰、開竅、涼肝、息風、解毒等功能。由于該處方藥中文冠木質量占有絕大部分，故對其文冠木中的總黃酮進行含量測定，為其進一步開發研究奠定基礎。

1儀器及試劑

紫外-可見分光光度儀：島津UV-2401PC型（日本）；離心機：飛鴿牌LXJ-ⅡB型低速大容量多管離心機；超聲波清洗儀：KQ2200B型（昆侖超聲儀器有限公司）；分析天平：ESJ200-4型（沈陽龍騰電子有限公司）。蘆丁對照品 （中國藥品生物制品檢定所提供，批號：0080-9705）；其它試劑試藥均為分析純。樣品來源：文冠木（ 內蒙古庫倫旗蒙藥股份有限公司），黃連（重慶石柱黃連有限公司），人工牛黃（內蒙古自治區海拉爾生物化學制藥廠）。

2方法學考察與結果

2.1測定方法及波長的選擇 根據文獻報道[4，5]，文冠木中的黃酮類化合物的3 ， 5 羥基與Al3+生成絡合物，在可見光區有最大吸收的特點，故選用蘆丁作為對照品，采用紫外分光光度法進行含量測定。分別取蘆丁對照品和文冠木醇提取溶液在400～800nm波長范圍內進行光譜掃描，從光譜圖中可見上述兩種溶液在波長500nm附近有明顯吸收，故選擇500nm為測定波長。

2.2 對照品溶液的制備 精密稱取蘆丁對照品13.15mg 置5ml容量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得每1ml含2.63mg蘆丁對照品。

2.7重復性實驗 用加液槍取出同一供試品五份，每份250μL分別注入到25ml容量瓶中，在每一容量瓶中依次加入30%乙醇12.25ml，再分別加入5%亞硝酸鈉溶液1.0ml，輕搖后放置6min，再加入10%硝酸鋁溶液1.0ml輕搖后放置6min，再加入1mol/LNaoH溶液10.0ml，用30%乙醇定容置25.0ml，充分搖勻后放置15min。時間到后，將每一份放入離心管中進行離心操作，使轉數達到4400r/min，并保持5min。離心后取出上清液進行測量，實驗數據見表4。

結果表明：供試品溶液的平均濃度為14.652mg/L，，RSD（%）=5.08，說明該方法的重復性良好。

2.8 回收率試驗 用加液槍取供試品五份，每份125μL依次加入到五個25ml容量瓶中，再用加液槍加入200μL蘆丁對照品溶液置每個容量瓶中，再依次加入30%的乙醇12.125ml，再依次加入5%亞硝酸鈉溶液1.0ml輕搖后放置6min，再依次加入10%硝酸。

鋁溶液1.0ml輕搖后放置6min，最后在每個25ml容量瓶中加入1mol/LNaoH溶液10.0ml并用膠頭吸管吸取30%的乙醇準確定容置25ml，充分搖勻，放置15min，時間到后，將每一份放入離心管中進行離心操作，使轉數達到4400r/min，并保持5min。離心后取出上清液進行測量，實驗數據見表5。實驗結果表明：該方法的平均回收率（%）為95.09%，RSD（%）=1.61。符合要求，說明該方法的準確度良好。

2.9 樣品含量測定 用加液槍取五份樣品，每份250μL分別注入到5個25ml的容量瓶中，在每瓶中依次加入30%的乙醇12.25ml和5%亞硝酸鈉溶液1.0ml，輕搖后放置6min，再依次加入10%硝酸鋁溶液1.0ml， 輕搖后放置6min，再依次加入1mol/LNaoH溶液10.0ml，用膠頭滴管吸取30%的乙醇精確定容置25ml，充分搖勻后，放置15min。時間到后，將每一份放入離心管中進行離心操作，使轉數達到4400r/min，并保持5min。離心后取出上清液進行測量，實驗數據見表6。

3結論

本課題對文冠木噴霧劑中總黃酮的含量進行定量分析，并對測定的線性范圍（10.520mg/L～63.120mg/L）、精密度RSD%=0.74、穩定性RSD%=0.90、加樣回收率（平均回收率為95.09%，RSD%=1.61）進行了考察，結果均符合要求，可以作為文冠木噴霧劑中總黃酮的含量的測定方法。

參考文獻：

[1] 宋 玲，郭忠祥.蒙藥文冠木總黃酮提取方法研究[J].內蒙古民族大學學報（自然科學版）.2005. 20 （5）： 546-547.

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[3]萬 彥，付小六，宋君軍.分光光度法鑒別氯芬黃敏片等復方制劑中的人工牛黃[J].中國藥事.2006，20（1）：55-56.

[4]趙亮，劉恩荔，李青山.紫外分光光度法測定海紅果中總黃酮的含量[J].山西醫科大學學報，2006，37（2）：169-171.

[5] You B engang，Tang L ihua，Liu Yang. D eterm ina tion of Tota l Flavones in Lysim achia clethroide Duby by UV Spectrophotometry[J].Chinese Wild Plant Resources，2007，26（1）：43-45.

編輯/王海靜