革蘭染色法在陰道分泌物真菌檢驗中的應用價值研究

摘要：目的 探討分析在陰道分泌物真菌檢驗中革蘭染色法的臨床應用價值。方法 選取152例疑似陰道炎患者臨床資料進行回顧性分析，分別采用格蘭染色法和生理鹽水法進行陰道分泌物真菌檢驗，對比觀察兩種方法真菌檢出率。結果 格蘭染色法真菌檢驗陽性123例（80.92%），生理鹽水法真菌檢驗陽性84例（55.26%），兩種方法真菌檢驗陽性率對比，具有統計學差異意義（P<0.05）。結論 在陰道分泌物真菌檢驗中，革蘭染色法具有敏感性好、檢出率高等特點，檢出率高于生理鹽水法，是對陰道分泌物進行真菌檢驗的理想方法。

關鍵詞：陰道分泌物；革蘭染色法；生理鹽水法；真菌檢驗；價值

陰道炎是臨床上常見的婦科炎癥，由各種致病菌引起，尤其是真菌，臨床表現主要有陰道分泌物異常、痙癢、灼痛等，給女性身心健康造成嚴重危害，需及時檢驗確診[1]。目前，陰道分泌物常規檢查是婦科檢查的重要項目，可檢測出疾病感染類型，對于陰道分泌物真菌可采用生理鹽水法進行檢驗，但該法檢出率低，極易發生漏診、誤診現象，需采用更加有效的檢驗方法，如革蘭染色法。革蘭染色法雖然步驟繁瑣、耗時長，但能全面篩查婦科陰道炎癥，為臨床診療提供準確有效的依據[2]。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2013年3月～2014年3月到婦科門診進行陰道分泌物真菌檢驗的152例疑似陰道炎患者作為研究對象，年齡19～63歲。研究經院倫理委員會批準，所有患者均簽署知情同意書并積極配合研究。

1.2方法 真菌檢驗標本均源于疑似陰道炎患者，檢驗前護士用棉簽直接取陰道分泌物，分為兩份標本，分別采用革蘭染色法和生理鹽水法進行真菌檢驗。

革蘭染色法真菌檢驗具體為：將患者陰道分泌物均勻的在載玻片上涂，放干標本后用火焰固定，并按照初染、媒染、脫色、復染等步驟進行革蘭染色，染色完畢后，用擦鏡紙吸干片子，最后在顯微鏡下進行油鏡檢查。革蘭染色法初染：將草酸銨結晶紫染液滴于載玻片，需完全覆蓋標本，靜置染色1min后用水沖洗；媒染：滴加適量碘液，并覆蓋涂面，靜置染色1min后用水沖洗，用吸水紙將多余水分吸去；脫色：滴加數滴95%酒精，將載玻片輕輕搖動，脫色30s后用水沖洗，同時將水分用吸水紙吸干；復染：滴加已稀釋的蕃紅染色液，10s后用水沖洗，之后進行干燥，干燥后進行鏡檢。

生理鹽水法真菌檢驗具體為：以無菌棉拭子用生理鹽水濕潤，之后蘸取陰道分泌物小心均勻的在載玻片上涂，涂好后直接進行鏡檢。

在鏡下，若觀察發現真菌菌體或孢子，兩種方法真菌檢驗結果為陽性，為保證檢驗結果的科學性、合理性，選取的標本由兩位鏡檢經驗豐富的檢驗科醫生進行操作。

1.3觀察項目 詳細觀察記錄患者陰道分泌物真菌檢驗陽性、陰性結果，作為革蘭染色法在陰道分泌物真菌檢驗中的應用價值評定依據。

1.4統計學方法 運用SPSS17.0統計學軟件統計分析數據，計數資料用χ2檢驗，P<0.05表明差異有統計學意義[3]。

2 結果

選取的152例疑似陰道炎患者均完成陰道分泌物真菌檢驗，檢驗結果顯示，格蘭染色法真菌檢驗陽性123例，真菌陽性率為80.92%；生理鹽水法真菌檢驗陽性84例，真菌陽性率為55.26%。兩種方法真菌檢驗陽性率對比，格蘭染色法明顯高于生理鹽水法，χ2=23.0282，P=0.0000，具有統計學差異意義（P<0.05）。見表1。

3 討論

陰道是女性復雜的微生態系統，寄生多種微生物，處于平衡狀態的不同微生物不會給陰道造成影響，但由于年齡增長、免疫力低、長期使用抗生素等原因，陰道內微生物會失衡，以致乳酸桿菌等正常菌群大量死亡，真菌繁殖加快，從而引起真菌性陰道炎，嚴重影響女性身心健康。真菌性陰道炎是婦科常見多發疾病，發病率高，陰道分泌物性狀改變是其主要表現，因此，可通過陰道分泌物真菌檢驗確診該病，從而為臨床診療提供準確有效的依據。在婦科疾病檢查中，陰道分泌物涂片檢查是常規項目，如采用生理鹽水法進行陰道分泌物真菌檢驗，可方便、快捷、大規模的進行篩檢，可在一定程度上反映陰道感染病原體和炎癥程度，但該方法存在敏感性差、檢出率低等缺點，而且受上皮細胞膜卷曲、各種分泌成分重疊、真菌孢子性狀等因素影響，極易發生漏診、誤診現象，給臨床診治帶來很大困難，嚴重的甚至延誤治療時機，導致患者病情加重[4]。因此，為提高真菌檢出率，需采取更加有效的檢驗方法，如格蘭染色法。雖然格蘭染色法步驟繁瑣、耗時長，但能同時檢查多個項目，而且對真菌具有極高的敏感性。在陰道分泌物革蘭染色法真菌檢驗過程中，載玻片陰道分泌物染色后，真菌芽生孢子和假菌絲會染成藍色，上皮細胞、炎性細胞、白細胞等均會染成紅色，而且染色清晰易辨，真菌形態非常清楚，能準確的進行鑒別診斷[5]。此外，在油鏡下觀察已染色涂片，可對真菌生長情況、菌群是否失調、真菌比例等進行明確，從而有效避免真菌誤診、漏診現象，并有利于真菌性陰道炎的臨床治療。在臨床上推廣應用格蘭染色法，不僅能提高臨床檢測率，使醫生能根據檢驗結果制定科學合理的治療方案，還能避免醫生濫用抗生素，從而及時改善患者臨床表現。本文對152例疑似陰道炎患者陰道分泌物分別進行格蘭染色法和生理鹽水法真菌檢驗對比研究，檢驗結果顯示，格蘭染色法真菌檢驗陽性率80.92%明顯高于生理鹽水法真菌檢驗陽性率55.26%，兩種方法真菌檢驗陽性率對比，具有統計學差異意義（P<0.05）。可見，在陰道分泌物真菌檢驗中，格蘭染色法陽性檢出率優于生理鹽水法，具有更好的檢驗敏感性和重要的應用價值。

總之，革蘭染色法在陰道分泌物真菌檢驗中具有應用價值，能快速、敏感、準確的檢出真菌是否為陽性，真菌陽性檢出率明顯高于生理鹽水法，是對陰道分泌物進行真菌檢驗的理想方法，具有臨床推廣應用價值。

參考文獻：

[1]黃艷冰.150例婦女陰道分泌物檢驗結果分析[J].檢驗醫學與臨床，2012，9（11）：1361-1363.

[2]侯薇，郭薇薇，顏艷.陰道分泌物革蘭染色法與生理鹽水法兩者差異對比[J].吉林醫學，2011，32（23）：4856-4857.

[3]林楚懷.陰道分泌物標本真菌檢驗結果分析[J].中國微生態學雜志，2009，21（04）：351-352.

[4]王武.3種方法檢測陰道分泌物常規對比分析[J].檢驗醫學與臨床，2011，8（08）：959-960.

[5]呂曉輝，陸偉，張瑩，等.革蘭氏染色法對陰道分泌物涂片的臨床應用及價值[J].中國傷殘醫學，2010，18（05）：88-89.

編輯/哈濤