HIF—1α和VEGF在稽留流產(chǎn)患者血清和絨毛中的表達(dá)及二者的相關(guān)性分析

摘要：目的 研究HIF-1α和VEGF在稽留流產(chǎn)患者血清和絨毛中的表達(dá)及二者的相關(guān)性分析。方法 從2013年2月～9月共有72例經(jīng)B超檢查后確診為稽留流產(chǎn)的早孕孕婦于我院進(jìn)行治療。將這72例患者定為觀察組。另外，以數(shù)字法隨機(jī)抽取72例正常早孕的孕婦作為對(duì)照組進(jìn)行比較。對(duì)兩組早孕孕婦分別運(yùn)用酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測(cè)其HIF-1α和VEGF在血清里的濃度情況，并記錄下來，進(jìn)行比較；其次，運(yùn)用免疫組織化學(xué)方法分別檢測(cè)兩組孕婦體內(nèi)HIF-1α和VEGF在絨毛中的表達(dá)以及含量，并記錄下來進(jìn)行比較；最后根據(jù)兩表數(shù)據(jù)分析其相關(guān)性，并記錄下來。結(jié)果 經(jīng)研究比較，通過酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測(cè)出觀察組中HIF-1α的濃度為（353.8±108.6）ng/L，VEGF的濃度為（30.7±6.2）ng/L。這一結(jié)果顯著低于對(duì)照組的（426.5±135.2）ng/L，（58.3±46.5）ng/L，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）。其次，通過對(duì)比發(fā)現(xiàn)，用免疫組織化學(xué)方法分別對(duì)兩組孕婦檢測(cè)后得出，觀察組早孕孕婦絨毛中的HIF-1α濃度水平為（3.5±2.2）ng/L，VEGF在絨毛中的濃度水平為（3.4±2.0）ng/L。這一結(jié)果依然顯著低于對(duì)照組的（6.4±3.0）ng/L，（7.0±4.0）ng/L，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）。最后，根據(jù)記錄的數(shù)據(jù)，按照Pearson相關(guān)分析法分析后可知，相關(guān)性為（--）的有8例，相關(guān)性為（-+）的有20例，相關(guān)性為（+-）的有18例，相關(guān)性為（++）的有26例。差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）。這一結(jié)果表明在同一病例體內(nèi)，HIF-1α和VEGF的表達(dá)具有正相關(guān)性，說明隨著HIF-1α表達(dá)的減少，VEGF的表達(dá)也逐漸減少。結(jié)論 HIF-1α和VEGF在血清和絨毛中的低表達(dá)以及其相關(guān)性可能是導(dǎo)致稽留流產(chǎn)的主要原因。

關(guān)鍵詞：HIF-1α；VEGF；稽留流產(chǎn)；血清和絨毛；表達(dá)；相關(guān)性分析

根據(jù)調(diào)查顯示，流產(chǎn)發(fā)生的概率越來越高。一方面，一部分母親不愿意孩子出生而選擇人工的流產(chǎn)；另一方面，則是由于種種意外而導(dǎo)致了流產(chǎn)的發(fā)生[1]?；袅鳟a(chǎn)就是其中一種特殊的流產(chǎn)形式。醫(yī)學(xué)界將其稱為過期流產(chǎn)或者流產(chǎn)不下，這是因?yàn)榛袅鳟a(chǎn)是指那些胎兒已經(jīng)死亡，但是沒能夠正常脫落并排除體外的流產(chǎn)情況，這就使醫(yī)學(xué)界規(guī)定凡是胚胎在母親腹中兩個(gè)月及以上時(shí)間停止發(fā)育，則可判定為稽留流產(chǎn)。然而研究顯示[2]，HIF-1α和VEGF這兩種因子的表達(dá)以及其相關(guān)性會(huì)對(duì)稽留流產(chǎn)的產(chǎn)生形成極大的影響。本文就HIF-1α和VEGF在血清以及絨毛中的表達(dá)及其相關(guān)性進(jìn)行了研究，結(jié)論展示如下

1 資料與方法

1.1一般資料 從2013年2月～9月論理學(xué)會(huì)批準(zhǔn)，簽訂知情同意書，于我院共有72例早孕孕婦被診斷出稽留流產(chǎn)。將這72例早孕孕婦視為觀察組，她們的年齡分布為16～32歲，平均年齡（24.5±2.3）歲，孕周為（6.6±2.5）w；另外以數(shù)字法隨機(jī)選取于我院治療的正常早孕孕婦72例作為對(duì)照組，她們的年齡分布為18～33歲，平均年齡為（26.8±1.8）歲，孕周為（7.2±1.8）w。兩組在年齡以及懷孕情況等方面比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。具有可比性。

1.2方法

1.2.1酶聯(lián)免疫法 首先讓血清先凝聚至少30min，之后將血清取出，運(yùn)用酶稀釋液讓酶復(fù)合物進(jìn)行充分的稀釋后，加入血清以及陰性陽性的對(duì)照物，并加入質(zhì)控品進(jìn)行調(diào)控。1h后再進(jìn)行洗版操作，再過30min，即可加入終止液完成反應(yīng)部分。讀出數(shù)據(jù)并記錄下來。

1.2.2免疫組化sp法 選取適當(dāng)?shù)牟牧虾螅檬灠?，制成厚度?～5μm的切片，石蠟切片水化后，用PBS試液沖洗3次，5min/次。之后，修復(fù)相應(yīng)所需的抗體，并且滴加一滴過氧化酶阻斷溶液，阻斷其活性。重復(fù)操作后，每張切片加1～2滴新鮮配制的DAB溶液，在顯微鏡下掌握好其顯色的時(shí)間，再用自來水沖洗之后進(jìn)行觀察。

1.3結(jié)果判斷[3] 根據(jù)試劑盒中所給的對(duì)照數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)，將顯微鏡下所觀察到的數(shù)據(jù)顏色進(jìn)行比對(duì)，確定其顯色范圍，記錄結(jié)果。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 以SPSS13.0軟件分析。數(shù)據(jù)比較以χ2檢驗(yàn)。計(jì)量數(shù)據(jù)以t檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1兩組孕婦HIF-1α和VEGF在血清中的濃度比較經(jīng)過研究比較，通過酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測(cè)出觀察組中HIF-1α的濃度為（353.8±108.6）ng/L，VEGF的濃度為（30.7±6.2）ng/L。這一結(jié)果顯著低于對(duì)照組的（426.5±135.2）ng/L，（58.3±46.5）ng/L，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）。這一結(jié)果說明HIF-1α和VEGF的濃度在稽留流產(chǎn)孕婦的血清中表達(dá)的較少，提示其可能是導(dǎo)致稽留流產(chǎn)的主要原因，見表1。

2.2兩組孕婦HIF-1α和VEGF在絨毛中的濃度情況比較通過對(duì)比發(fā)現(xiàn)，用免疫組織化學(xué)方法分別對(duì)兩組孕婦檢測(cè)后得出，觀察組早孕孕婦絨毛中的HIF-1α濃度水平為（3.5±2.2）ng/L，VEGF在絨毛中的濃度水平為（3.4±2.0）ng/L。這一結(jié)果依然顯著低于對(duì)照組的（6.4±3.0）ng/L，（7.0±4.0）ng/L，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）。說明了正常早孕孕婦的絨毛中HIF-1α和VEGF的表達(dá)水平顯著高于稽留流產(chǎn)孕婦，見表2。

2.3稽留流產(chǎn)孕婦HIF-1α和VEGF在血清和絨毛中的相關(guān)性分析根據(jù)記錄的數(shù)據(jù)，按照Pearson相關(guān)分析法分析后可知，相關(guān)性為（--）的有8例，相關(guān)性為（-+）的有20例，相關(guān)性為（+-）的有18例，相關(guān)性為（++）的有26例。差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）。這一結(jié)果表明在同一病例體內(nèi)，HIF-1α和VEGF的表達(dá)具有正相關(guān)性，說明隨著HIF-1α表達(dá)的減少，VEGF的表達(dá)也逐漸減少。見表3。

3 討論

隨著時(shí)代的變遷，懷孕的年齡在一步步的降低著。正常的受孕年齡被不斷拉低后，各種危及孕婦以及胎兒的疾病也逐漸產(chǎn)生[4-5]。稽留流產(chǎn)就是其中一種比較特殊的流產(chǎn)形式。對(duì)于稽留流產(chǎn)，近年來的研究顯示[6-7]，HIF-1α和VEGF這兩種因子對(duì)其發(fā)生有著顯著地控制作用，它們之間的相關(guān)性表達(dá)致使其含量產(chǎn)生連帶的降低，正是這種低表達(dá)率導(dǎo)致了稽留流產(chǎn)的發(fā)生。而就目前國內(nèi)外研究來看[8-9]，VEGF作為HIF-1α的靶基因，極大的受到了HIF-1α的牽制。

本文通過對(duì)比稽留流產(chǎn)孕婦以及正常早孕孕婦體內(nèi)HIF-1α和VEGF在血清和絨毛中的表達(dá)與相關(guān)性，得出了一些結(jié)論。經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，觀察組的孕婦血清內(nèi)HIF-1α和VEGF的含量要顯著低于正常對(duì)照的孕婦，這一結(jié)果與薛英杰的研究結(jié)果相一致[10]，表明了HIF-1α和VEGF在血清中的低含量使稽留流產(chǎn)發(fā)生的概率大大的增加；其次，通過實(shí)驗(yàn)對(duì)比發(fā)現(xiàn)，用免疫組織化學(xué)sp方法分別對(duì)兩組孕婦檢測(cè)后得出，觀察組早孕孕婦絨毛中的HIF-1α濃度水平為（3.5±2.2）ng/L，VEGF在絨毛中的濃度水平為（3.4±2.0）ng/L。這一結(jié)果依然顯著低于對(duì)照組的（6.4±3.0）ng/L，（7.0±4.0）ng/L，這一結(jié)果符合冉鳳明的研究數(shù)據(jù)[11]，提示HIF-1α和VEGF在絨毛中的低表達(dá)率也是其成為元兇的原因之一。最后，經(jīng)過計(jì)算驗(yàn)證，得出的結(jié)果是HIF-1α和VEGF的表達(dá)在血清中呈正相關(guān)，在絨毛中的表達(dá)也呈正相關(guān)，由于HIF-1α和VEGF之間的正相關(guān)性，導(dǎo)致它們的表達(dá)一增都增，一降都降，也正是由于HIF-1α和VEGF在血清以及絨毛中的低表達(dá)才導(dǎo)致了稽留流產(chǎn)的高發(fā)生率。

綜上所述，HIF-1α和VEGF在血清和絨毛中的表達(dá)過低以及其正相關(guān)性即是產(chǎn)生稽留流產(chǎn)的主要原因，這一結(jié)果值得深入研究，以對(duì)于這一流產(chǎn)方式進(jìn)行及時(shí)的救治與防范。

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