多重人乳頭瘤病毒感染與宮頸癌及癌前病變的相關性探討

摘要：目的 探討人乳頭瘤病毒（Human papilloma virus，HPV）感染與宮頸癌及癌前病變之間的相關性。方法 將收集到的300例患有宮頸疾病的女性患者，采用HybriMax醫用核酸分子快速雜交基因技術及第二代雜交捕獲法（HC-2）對患者的HPV進行檢測，陽性者之后行陰道鏡下多點活檢加頸管診刮術，將檢查結果進行比對， HPV檢測陽性212例，陽性率高達70.67%。宮頸癌的病理類型中鱗癌發病率最高，其次是腺癌約占宮頸癌的15%～20%，腺鱗癌僅占3%～5%，高危型HPV16和18與宮頸癌及宮頸上皮內高度病變（CINII/III）的發生密切相關。HPV-DNA檢測陽性患者中，細胞學異常者比細胞學為良性反應性細胞者的DNA含量高（P<0.05），差異有統計學意義。結果 HPV-DNA陽性感染率隨宮頸病變程度的不斷加重而升高，高危型HPV在宮頸癌前病變和宮頸癌中的病毒含量隨病情程度的加重呈現上升趨勢。結論 人乳頭瘤病毒感染與宮頸癌前病變和宮頸癌的發生有密切的關系，可作為重要的檢測指標。

關鍵詞：人乳頭瘤病毒；癌前病變；宮頸癌

宮頸癌是全球女性惡性腫瘤較為常見的，發病率僅次于乳腺癌，位居全球第2，約占其總數的50%以上，在中國女性發病率居第1位。我國自20世紀70年代開展全國性的婦科普查和宮頸癌癌前病變的診治，一些大城市宮頸癌的發病率明顯下降。近年來子宮頸癌出現年輕化趨勢，因此對宮頸癌及癌前病變的研究成為醫學界關注的熱點[1]。許多研究表明人乳頭瘤病毒感染與宮頸癌及癌前病變有關，目前發現的HPV達100余種，約有20余與腫瘤有關，本文章主要從宮頸癌及癌前病變與人乳頭瘤病毒的型別相關性入手研究。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2011年1月～2013年6月來我院就診的女性患者進行宮頸癌的篩查，提取其中的300例作為本次的研究對象。年齡在20～65歲，進行HybriMax醫用核酸分子快速雜交基因技術及第二代雜交捕獲法（HC-2）檢測，并對其中212例陽性患者進行陰道鏡檢查及組織活檢加頸管診刮術。同時對其他138例患者進行陰道脫落細胞涂片檢查，進而進行相應的對照。

1.2方法

1.2.1 HybriMax醫用核酸分子快速雜交基因分型試劑盒 從篩查患者中提取樣本，按常規宮頸細胞學進行取材，把采集到的脫落細胞放置存盛有細胞保存液的小瓶里待用。HPV的分型步驟：首先對標本的DNA進行擴增，然后將擴增后的產物進行導流雜交，整個雜交過程保持在45℃，最后芯片顯色進行分型。整個過程的操作均按試劑盒說明進行。凱普醫用核酸分子快速雜交儀可以檢測HPV-DNA的21種亞型，高危型13種（HPV16、31、33、35、39、45、 51、52、56、58、59、68），低危型5種（HPV6、11、42、43、44） 及中國人群常見的亞型（HPV53，66，CP8304），不論高危型還是低危型，只要是兩種或兩種以上者均為多重感染[2]。

1.2.2陰道脫落細胞涂片檢查 通過經典的Pap涂片染色法進行檢測，由于宮頸癌好發于移行帶，故取材必須在鱗-柱上皮交界處，結果按TBS分類標準進行診斷，診斷標準分類：①正常細胞及良性改變；②鱗狀細胞異常，包括非典型鱗狀細胞（ASC）、低度鱗狀上皮內病變（LSIL）、高度鱗狀上皮內病變（HSIL）、鱗狀細胞癌（SCC）；③意義不明的非典型腺細胞（AGUC）和腺癌（AC）。

1.2.3宮頸組織活檢及頸管診刮術 對上述56例高危型人群及陰道脫落細胞涂片檢查提示惡性的患者進行組織活檢。在子宮頸上作多點活檢，至少取4塊組織分瓶送病理檢查。宮頸活檢和經管診刮術同時進行有助于早期發現宮頸上皮內瘤變（CIN）和早期宮頸癌，進一步提高診斷陽性率。

2 結果

2.1人乳頭瘤病毒（HPV）感染是宮頸癌的主要危險因素，在300例篩查人員中，其中212例HPV檢測陽性，含有1種或1種以上感染，總陽性率70.67%。

2.2 HPV的檢測結果，在300例CIN中，HPV陰性88例，占29.33%；HPV陽性212例，占70.67%。最多為3種型別同時感染，其中單一基因型感染126例，占59.43%，二重感染75例，占35.37%，三重感染11例，占5.2%。在300例CIN所感染HPV-DNA的亞型涉及21型，其中感染頻度最高的HPV-16（32.15%），從正常組織到宮頸上皮瘤樣變CIN不同病變患者中，正常組織52例，炎癥患者212例，CINI43例，CINII15例，CINIII11例，癌5例，各病變之間與正常者相比存在差異性，有統計學意義。（P<0.05），見表1。

2.3 HPV-DNA分型聯合細胞學檢測與細胞學檢測結果比較 在300例患者當中，HPV-DNA分型聯合細胞學檢測陽性者212例，其中LSIL52例，HISL21例，癌5例，而而通過細胞學檢測的145例患者中LSIL38例，HISL9例，癌2例，兩者比較存在顯著性差異（P<0.05），具有可比性。見表2。

3 討論

3.1隨著宮頸癌的發病率有年輕化的發展趨勢，對宮頸癌的篩查成為重點。許多研究結果表明HPV感染是宮頸癌的主要危險因素，目前對HPV檢測有許多種方法，本文章使用HybriMax醫用核酸分子快速雜交基因技術及第二代雜交捕獲法（HC-2）對HPV進行檢測，提高檢測準確性高，并且簡單易操作，耗時短，可廣泛用于研究教學和臨床診斷。本文章研究顯示，HPV-DNA分型聯合細胞學檢測要比單純細胞學檢測效果好，病變檢出率較高，且各級別宮頸病變率均高于細胞學檢測的結果[2]。

3.2通過采用HybriMax醫用核酸分子快速雜交儀及第二代雜交捕獲法（HC-2）可以檢測H PV-DNA的21種亞型，高危型13種（HPV16、31、33、35、39、45、 51、52、56、58、59、68），低危型5種（HPV6、11、42、43、44） 及中國人群常見的亞型（HPV53，66，CP8304）。由于HPV有許多亞型，對宮頸疾病的威脅，不僅僅有單一型病毒感染，可能同時會出現多型病毒感染，但是不一定多型病毒感染會增加宮頸病變，目前對觀點沒有一個明確的說法。國際癌癥研究協會（IARC）的最新研究結果顯示，最常見的亞型為HPV-16、HPV-18等，HPV-45在非洲較多、HPV-33主要集中于歐洲國家，而亞洲國家主要是HPV-52、58常見。在眾多亞型中，以HPV-16、HPV-18，HPV-33型與子宮頸癌關系最為密切，有研究表明，不同亞型的感染其致病性、治療效果及后果等方面存在差異，其中HPV-16是感染頻度最高的亞型，可達32.15%，從而說明了HPV-16對宮頸癌的致病性要高于其他亞型。

3.3目前HPV的致癌機制認為是病毒DNA通過共價鍵與細胞學DNA序列聯絡，這種聯絡使病毒DNA或以多拷貝串聯狀態，或以單拷貝形式整合入宿主細胞DNA中，結果導致E2基因抑制E6，E7基因啟動，從而使E6，E7基因表達不正常，導致細胞增殖失去控制[3]。此外，HPV-16型E6蛋白能與P53蛋白結合形成復合物，從而使細胞生長的負調節功能喪失，引起細胞無控制性生長而導致宮頸癌發生。通過HPV致癌機制不難得出，對HPV檢測對臨床預防及治療CIN至關重要。另一方面，HPV感染后是否導致瘤樣病變主要取決于HPV亞型和個人的免疫力，免疫力低下者HPV感染率要明顯高于正常。因此，不同患者感染HPV的同一亞型和同一患者感染不同亞型HPV，可產生不同結局。

通過以上討論可得知，HPV感染從單一型別感染發展到多型別感染，在一定程度上促進了宮頸上皮內瘤變（CIN），與宮頸癌及癌前病變的關系密不可分。

參考文獻：

[1]趙愛華，張紅華.多重人乳頭瘤病毒感染與宮頸癌及癌前病變的相關性研究[J]，寧夏醫學雜志，2009，31（8），684-686.

[2]饒海英.劉五高，王艷，人乳頭瘤病毒基因型在宮頸癌及癌前病變中的分布[J]，中國衛生檢驗雜志，2012，22（1），121-122.

[3]張衛.人乳頭瘤病毒與宮頸癌的關系[J]，中外健康文摘，2011，29.

編輯/哈濤