摘要:目的 通過龍葵水煎液對小白鼠的急性毒性試驗研究,為龍葵安全性評價提供理論依據。方法 用不同劑量104.8g·kg-1、94.4g·kg-1、84.8g·kg-1、76.4g·kg-1、68.8 g·kg-1相同容積的龍葵藥液對小白鼠灌胃給藥,連續觀察1w,記錄小白鼠毒性反應情況。結果 不同劑量從高到低的動物死亡只數為8、5、4、3、2。 結論 龍葵的LD50為88.9 g·kg-1,本試驗提示龍葵有一定毒性,臨床使用要注意用量。
關鍵詞:龍葵;急性毒性試驗;LD50
龍葵,別名白花菜;多生于村邊、路旁、園邊、荒地。廣西隆林、凌云、靖西、融水、金秀等有分布。味甘苦,性微寒,有小毒。涼血解毒,清熱利尿,抗癌,降血壓。可用于小便不利、膀胱炎、慢性支氣管炎、高血壓、狂犬咬傷、肝癌、食道癌等[1]。民間常用來治療小便赤痛、皮膚濕疹、尿道結石等,為了評價龍葵的安全性,本文通過觀察龍葵水煎液灌胃給藥對小白鼠的急性毒性反應。
1試驗材料
1.1昆明種小白鼠100只,SPF,體重20±2.0g,雌雄各半,購于廣西醫科大學實驗動物中心,合格號:SCXK (桂):2009-0802。
1.2龍葵(購于降橋村市場),自制成含生藥材2.62g.mL-1的藥液母液100mL。
2方法與結果
2.1預試驗[2] 取20只禁食14 h以上的小白鼠雌雄各半,隨機分組,每組4只,設262 g.kg-1、170.3 g.kg-1、110.7 g.kg-1、72 g.kg-1、46.8 g.kg-15組,推測Dm約160 g.kg-1,Dn約50 g.kg-1。
2.2正式試驗[2] 選取健康小鼠50只,雌雄各半,隨機分為5組。小鼠禁食(不禁水)約14 h后,取Dm約104.8 g.kg-1按上9折等比排列,得到不同劑量104.8g·kg-1、94.4 g.kg-1、84.8 g.kg-1、76.4 g.kg-1、68.8 g.kg-1相同容積的龍葵藥液對小白鼠灌胃給藥。給藥后小鼠正常飼養于清潔飼養室,室溫(24±2)℃,相對濕度45%~60%,觀察動物的活動、皮毛、飲食、糞便有無異常改變,并觀察有無中毒癥狀及死亡(若有死亡,則進行解剖及病理學檢驗),連續觀察1w。1w后處死全部動物進行解剖,觀察心、肝、脾、肺、腎、胃腸、膀胱、性腺(子宮、卵巢或睪丸和附睪)等主要臟器有無異常變化。
2.3試驗結果 給藥后大多數小鼠活動明顯減少,少數靜臥不動,呈昏睡狀等,8min后高劑量組有小鼠出現抽搐而死亡,15min后,不斷有小鼠出現豎毛-扭體反應-抽搐而死亡,有些伴隨有尿失禁,一般死亡時間在18min。立即解剖死亡小鼠,肉眼觀察未發現心、肝、脾、肺、腎、胃腸、膀胱、附睪有異常。連續觀察7d,除當天早上及下午死亡2只(第1組、第2組各1只),第2d再死亡1只(第4組)外,未見其它異常或不良反應。7d后,處死動物后進行解剖,肉眼觀察其主要臟器心、肝、脾、肺、腎、胃腸、膀胱、性腺(子宮、卵巢或睪丸和附睪)均未發現明顯的異常。
采用BL-420F生物實驗系統的TM WAVE分析軟件處理:LD50=88.9 g·kg-1,上限 98.7 g·kg-1,下限 80.1 g·kg-1。
3討論
從試驗結果小鼠活動明顯減少,少數靜臥不動,呈昏睡狀、抽搐、尿失禁等可見龍葵水煎液對中樞神經系統和運動神經系統有一定抑制作用,扭體反應可能是胃腸道痙攣所導致。由表1可以看到不同劑量的龍葵水煎液對小鼠的死亡數分別為8、5、4、3、2,經過TM WAV1分析軟件處理劑量、動物數、不同劑量組死亡的動物數,得到LD50為88.9 g·kg-1,提示龍葵有一定毒性,臨床使用要注意用量。至于多次反復用藥會否引起內臟器官的病變,還需要進一步作龍葵的長期毒性試驗研究,結合動物毒性反應結果作綜合分析評價其毒性。
參考文獻:
[1]鄒節明,廣西特色中草藥資源選編[M].北京:科學出版社,2011:781-783.
[2]李儀奎,金若敏,王欽茂,等。中藥藥理實驗方法學[M]-2版.上海:上海科學技術出版社,2006: 1004.
編輯/王海靜