中藥制劑聯合磁、熱療應用于乳腺增生大鼠模型的實驗研究

摘要：目的 研究中藥制劑聯合磁、熱療對乳腺增生大鼠模型的治療作用。方法 成功建立乳腺增生大鼠模型，35只乳腺增生SD大鼠隨機分為對照組、中藥組、磁療組、熱療組及聯合組，治療30 d后測量大鼠乳頭的直徑以及高度，抽血檢測肝功能、腎功能、雌二醇、孕酮、泌乳素水平；取大鼠心臟以及乳腺行病理學檢測，觀察大鼠乳腺導管變化情況。結果 各治療組與對照組比較，大鼠乳腺的高度均下降，直徑均縮小，且聯合組較各單一治療組乳腺高度的下降更加明顯，直徑更加縮小，各單一治療組組間相互比較，大鼠乳腺高度以及直徑變化不明顯。各治療組與對照組比較，雌二醇、泌乳素水平下降，孕酮水平升高，且聯合組較各單一治療組雌二醇、泌乳素水平下降更明顯，孕酮水平升高，各單一治療組組間比較雌二醇、泌乳素、孕酮水平差異無顯著性。各組大鼠肝、腎功能以及心肌細胞病理觀察無明顯變化。結論 中藥制劑聯合磁、熱療治療SD大鼠乳腺增生效果確切，療效優于單獨應用中藥、磁療及熱療。

關鍵詞：乳腺增生病；中藥；磁療；熱療

乳腺增生癥是中年女性常見的乳房疾病。占全部乳房疾病的75%[1]。乳腺增生癥有多種類型，其中纖維囊性增生伴不典型增生被認為是乳腺癌的前期病變[2]。目前乳腺增生癥治療手段主要有西醫、中醫和物理治療3類，中醫藥為目前治療本病的主要手段。物理治療多采用中藥外用與磁療結合的方法，以及中藥外用結合乳腺治療儀行離子導入甚或針灸來治療乳腺增生癥，也取得了可喜的療效，但起效相對較慢且離子導入的實施需在醫院才能完成[3-7]。本研究通過建立乳腺增生SD大鼠動物模型，將中藥制劑與磁療、熱療三種手段有機結合，觀察其治療效果，并檢測其毒副作用，為下一步臨床研究提供理論基礎。

1資料與方法

1.1一般資料

1.1.1實驗動物SD雌性大鼠40只清潔級，體重（210±10）g，75～85日齡。購于南華大學試驗動物部且體重和周齡統計學上無差異，按標準飲食，分籠飼養于相同的環境中。

1.1.2藥物及試劑 雌二醇注射液，黃體酮注射液，雌二醇放免試劑盒，孕酮放免試劑盒，泌乳素放免試劑盒，中藥制劑，靜磁磁鐵，暖洋洋熱帖。

1.2方法

1.2.1建立SD大鼠乳腺增生模型 40只SD大鼠后肢內側肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5 mg/Kg，1次/d，連續25 d，續用肌肉注射黃體酮5 mg/Kg，1次/d，連續5 d。隨機處死5只大鼠，通過病理組織學檢查確認造模成功。

1.2.2實驗分組及干預 將剩余35只SD大鼠按干預方法不同隨機分為5組，分別為A組：對照組；B組：中藥組；C組：磁療組；D組：熱療組；E組：聯合組。參考正常SD雌性大鼠胸圍、腹圍平均值設計外用治療衣。大鼠中藥制劑配制：草烏 0.6 g，干姜0.6 g，赤芍0.2 g，白芷0.2 g，肉桂0.1 g，研細末混勻黃酒調敷。A組：僅僅用治療衣包裹，未做其他處理。B組：用中藥制劑放入治療衣內側中藥外用袋內使用，24 h/d，共30 d。C組：將磁塊固定在上乳腺上，磁場強度約為6～9 mT，30 min/次，1次/d，15 d為1療程，共30 d。D組：將暖洋洋熱帖貼在治療衣外側，照射溫度39℃～45℃，5 h/次，1次/d，共30 d。E組：以中藥制劑聯合磁療、熱療，30 min后去掉磁鐵，5 h后取掉熱帖，保留中藥制劑于治療衣內側中藥外用袋內，共30 d。

1.2.3結果觀察及判斷標準 第31 d測量各組大鼠乳腺高度以及直徑，然后將各組動物麻醉后，切取大鼠心臟及第2對完整的乳房，常規石蠟切片HE染色后光鏡下組織學觀察；從心臟中抽取5 mL血液作生殖激素3項（雌二醇、泌乳素、孕酮）以及肝、腎功能檢測。目前國內通常采用楊國漢等[8]設立乳房的大體形態判別標準：：改變不明顯者為（-）、單純腫大者為（+）、紅腫大者為（++）。達麗卿等[9]建立了乳頭形態學判斷標準：無變化，光鏡下基本恢復到正常乳腺結構為（-）；乳頭大，光鏡下可見結締組織增生者為（+）；乳頭腫大，光鏡下可見結締組織及腺導管增生者為（++）；乳頭紅、腫、大，光鏡下可見結締組織成纖維細胞增生，腺導管增生可見數目增加，管腔擴大，腺導管上皮增生者為（+++）。李建國等[10]將乳腺增生按病理程度不同分為四級：（-）乳腺小葉不增生，腺體數量極少，腺泡不擴張，處于靜止狀態；（+）乳腺小葉無明顯增生，個別腺泡有輕度增生，無擴張；（++）乳腺小葉大部分增生，部分腺泡明顯擴張；（+++）乳腺小葉明顯增生，腺泡處于極度擴張狀態，腺上皮細胞呈扁平狀，腺泡內及導管內有大量的分泌物。

1.3統計學方法 采用SPSS13. 0統計軟件對數據進行分析處理。計量資料以均數±標準差（x±s）表示。組間比較采用單因素方差分析t檢驗：P<0.05表示差異有統計學意義。

2結果

各組大鼠乳頭肉眼觀顯示：對照組大鼠乳頭突出皮毛，脫毛后，可見乳頭增大、充血豎起，顏色暗紅，觸之較硬。其它各治療組均見大鼠乳頭較前縮小，成米粒狀，稍隆起，顏色稍紅潤，觸之較硬。各組大鼠第2對乳頭直徑和高度的結果見表1，可見各治療組與A組比較，大鼠乳腺的高度均下降，直徑均縮小，且聯合組與各單一治療組比較大鼠乳腺的高度均下降，直徑均縮小，但各單一治療組組間相互比較，大鼠乳腺高度以及直徑變化不明顯。

各治療組與對照組比較，雌二醇、泌乳素下降、孕酮水平升高，且聯合組與各單一治療組比較，雌二醇、泌乳素下降更明顯，孕酮水平升高，但各單一治療組組間比較雌二醇、泌乳素、孕酮含量變化不大。各組大鼠雌二醇、孕酮、泌乳素水平，見表2。

對照組大鼠乳腺導管上皮細胞增生明顯，管腔明顯擴張，有分泌物，小葉明顯增多，腺泡增生明顯；各個治療組大鼠小葉增大不明顯，腺泡腔和腺導管腔少數擴張，分泌物減少。各組對模型大鼠乳腺病理組織學的影響，見表3。

各組間比較，血清肌酐、尿素氮及谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、總膽紅素含量無明顯變化，差異無顯著性。各組心肌肌纖維均排列整齊，無心肌纖維的破壞，細胞質豐富均勻，細胞間隙正常，未見水腫。

3討論

乳腺增生病是乳腺組織的良性增生性疾病，既非炎癥，也非腫瘤，以乳房疼痛和腫塊為主要臨床表現，并且隨著月經周期或情緒波動呈現周期性變化。乳腺增生病是育齡期女性最常見的乳房疾病，發病率占育齡婦女的80%～90%左右，而且發病率有逐年上升的趨勢，嚴重影響女性身心健康。

本實驗選用SD雌性大鼠作為造模動物，采用苯甲酸雌二醇和黃體酮干預進行動物建模[11-12]。造模后所有大鼠均表現為乳腺體積增大，腺泡和導管腔擴張，腺體增生，腺泡和小葉數量增加，脂肪和結締組織減少等，成功率達100%。

磁場影響人體電流分布、荷電微粒的運動、膜系統的通透性和生物高分子的磁矩取向等，使組織細胞的生理、生化過程改變，產生鎮痛、消腫、促進血液及淋巴循環等作用。磁療安全、無創也沒有毒性，它可以使身體得到溫順和漸進的平衡和營養。熱療可增加組織血流速度和血管滲透性熱療改變藥物在體內的代謝；熱療影響藥物在肝臟和組織線粒體中代謝為活性基團或影響肝、腎對活性組成部分的滅活。熱療最大優點是無創或微創，能有效緩解患者疼痛，提高患者生活質量[13]。明代陳實功所著外科專著《外科正宗》記載，處方草烏、干姜各30 g，赤芍、白芷、南星各10 g，肉桂5 g，研細末調敷，功用：溫陽解凝、活血化痰。主治：陽虛寒凝之局部腫硬。本組研究發現，三種干預因素無論單用還是聯用對大鼠增生的乳腺都有治療作用，且聯用的治療效果優于單獨。

現代醫學認為，乳腺增生病與機體雌激素水平過高而黃體酮拮抗不足有著密切的關系。雌激素的過度刺激可使乳腺上皮細胞及間質細胞增生，使結締組織水、鈉儲留增加，進而導致小葉間水腫。臨床上發現原發性無月經癥患者用雌激素治療，可見乳腺肥大，治療停止后，乳腺萎縮。孕酮（P）可促使腺泡發育，在一定條件下可以對抗雌二醇（E2）對乳腺組織的刺激作用，還可以降低雄激素轉變為雌激素[14]。而且孕激素能通過抑制垂體促性腺激素的分泌及卵巢的分泌，降低血漿E2水平及乳腺內雌激素受體（ER）含量，在靶細胞上通過增加17-輕類固醇脫氫酶的活性，使E2轉化為活性較弱的雌酮（EI）[15]。所以孕酮在乳腺增生病中的作用常被作為一種有效的保護劑而認識的。雌激素水平正常或過高而孕酮分泌過少或兩者之間不平衡，便可引起乳腺的復舊不完全，組織結構發生紊亂，導致乳腺導管上皮和纖維組織不同程度的增生和末梢腺管或腺泡形成囊腫[16]。乳腺增生病患者雌二醇水平顯著高于正常婦女，而孕酮水平偏低，因而認為雌孕激素平衡失調，可使雌激素長期刺激乳腺組織，而無孕激的節制和保護作用是導致乳腺增生的重要原因。本組研究顯示：中藥制劑外用、磁療、熱療均可以調節大鼠激素水平，使模型大鼠異常升高的血清E2明顯降低，使血清P含量明顯升高，使血清中PRL下降。聯合治療組與各個單用組比較差異顯著性明顯，但是各個單用組間無顯著性差異。

本實驗對大鼠的肝腎功能和心肌細胞進行了檢測和觀察。結果發現：各組與對照組比較肝、腎功能無顯著性差異。對于心肌細胞：各組間比較纖維排列整齊，無心肌纖維的破壞，細胞質豐富均勻，細胞間隙正常，未見水腫。

總之，不論中藥制劑、磁療、熱療或者聯合應用三者，對乳腺增生大鼠有內分泌的調節作用，也可以降低模型大鼠乳頭的高度以及直徑，而且較為安全。三者聯合治療乳腺增生大鼠的效果優于各個單一治療方法。

參考文獻：

[1]汪霞，屈振繁，楊廉潔，等.十堰市婦女乳腺疾病調查及相關因素探討[J].中國婦幼保健，2007，22（14）：2006.

[2]姜軍.乳腺增生癥：值得重視的臨床問題[J].中華乳腺病雜志（電子版），2008，2（1）：13-19.

[3]趙紅軍，李樹森，張春杰，等.中藥離子導入法治療乳房囊性增生病50例[J].中西醫結合雜志，1994，（6）：372.

[4]褚紅梅.中西醫結合治療乳腺增生癥2000例[J].中國性科學，2010，19（2）：39-40.

[5]高邈.近年來針灸治療乳腺增生癥概況[J].針灸臨床雜志，2009，25（12）：48-51.

[6]Liu XY，Fang H，Yang ZG，et al.Matrine inhibits invasiveness and metastasis of human malignant melanoma cell line A375 in vitro[J].Int J Dermatol，2008，47（5）：448-456.

[7]張麗芬，宋阿鳳，王志華，等.中藥內服配中藥離子導入治療\"肝郁痰凝型\"乳腺增生病療效觀察[J].遼寧中醫雜志，2009，36（12）：2129-2137.

[8]楊國漢，徐廷素，翟靜明.止痛消結膏對乳腺增生動物模型的作用[J].湖南中醫學院學報，1991，11（2）：44-47.

[9]達麗卿，王迎進，李亞明，等.乳臍散抑制家兔乳腺增生的研究[J].西北藥學雜志，1994，9（1）： 32-34.

[10]李建國，朱建宙，張玉芝，等.\"藥味乳康罩\"抑制小白鼠乳腺小葉增生病理組織學觀察研究[J].河南中醫，1993，13（3）：111-112.

[11]Strange R，Westerlind KC，Ziemiecki A，et al.Proliferation and apoptosis in mammary epithelium during the rat oestrous cycle[J].Acta-Physiol（Oxf），2007，190（2）：137-149.

[12]饒金才，李蘭珍，陳云生，等.乳腺增生病動物模型的復制及病理類型[J].中國病理生理雜志，1992，8（6）： 671-672.

[13]郭云鴻，田曉予.腫瘤熱療的免疫學研究[J].上海醫學，2006，29（4）：260-263.

[14]許能.沖任失調而致乳癖與周期性激素分泌失調的關系[J].上海中醫藥雜志，1996，（7）： 16-17.

[15]鄭妍，田顗.乳腺增生癥的抗雌激素治療[J].國外醫學：婦產科學分冊，1993，20（3）：143-145.

[16]王鐘富.現代實用乳房疾病診療學[M].河南科學技術出版社，2000：378.

編輯/張燕