IL—22在人早孕期母胎免疫界面中表達(dá)的研究

摘要：目的 通過(guò)檢測(cè)白細(xì)胞介素-22（IL-22）在人早孕期母胎界面的表達(dá)，探討其可能的作用。方法 采用酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linked immuno sorbent assay， ELISA）檢測(cè)正常早孕婦女及正常非孕育齡期婦女外周血、正常早孕婦女蛻膜組織及正常非孕育齡期婦女子宮內(nèi)膜組織中IL-22的表達(dá)情況。結(jié)果 早孕婦女外周血IL-22表達(dá)（105.33±6.61）pg/ml，顯著高于正常非孕育齡期婦女外周血（84.71±6.73）pg/ml。與正常非孕育齡期婦女子宮內(nèi)膜組織IL-22表達(dá)水平（86.02±7.79）pg/ml相比，早孕婦女蛻膜組織IL-22表達(dá)（109.98±6.87）pg/ml，顯著增加。結(jié)論 IL-22可能參與了正常妊娠母胎免疫耐受的建立和維持。

關(guān)鍵詞：IL-22；母-胎界面

由于遺傳多樣性，同種異體間的移植常會(huì)導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)排斥反應(yīng)。妊娠過(guò)程從免疫學(xué)角度來(lái)看與其類(lèi)似，但成功妊娠的母體并不排斥表達(dá)了一半父方基因的胎兒，意味著母體免疫系統(tǒng)對(duì)胎兒產(chǎn)生了免疫耐受。母-胎界面是這一過(guò)程發(fā)生的核心部位，存在其中的多種細(xì)胞及其細(xì)胞因子參與了這一免疫耐受過(guò)程的建立與維持。

IL-22是細(xì)胞因子IL-10家族的一員，最早在2000年由比利時(shí)的研究組發(fā)現(xiàn)和定義[1]。不同的條件下可發(fā)揮抗炎、促炎、致自身免疫性疾病和促腫瘤生成等多重作用，也可能參與了子宮的固有免疫系統(tǒng)。目前關(guān)于IL-22在生殖系統(tǒng)中的研究甚少，本文旨在探討IL-22在人早孕期母胎界面的表達(dá)及可能的作用機(jī)制。

1資料與方法

1.1一般資料 正常早孕婦女蛻膜組織：選取2013年7～12月在廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院自愿行人工流產(chǎn)術(shù)的正常妊娠婦女（孕6～9w），本次妊娠后無(wú)陰道流血、發(fā)熱等不適，超聲檢查可見(jiàn)心管搏動(dòng)，未見(jiàn)宮腔積液，留取蛻膜組織15例。正常育齡非孕婦女子宮內(nèi)膜（分泌期）：選取2013年7～12月因\"男方因素不孕\(zhòng)"在廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院就診的女性患者12例，月經(jīng)規(guī)則，B超及HSG均顯示子宮腔形態(tài)正常，沒(méi)有輸卵管積水及卵巢囊腫聲像。所有研究對(duì)象年齡25～35歲，均排除全身或感染性疾病，既往無(wú)不良孕產(chǎn)史，3個(gè)月內(nèi)未服用甾體類(lèi)藥物，未發(fā)現(xiàn)生殖系統(tǒng)感染。標(biāo)本獲取后用PBS緩沖液反復(fù)沖洗去除血液，-80℃保存待測(cè)。外周血：收集正常早孕婦女肘靜脈血3ml 15例，正常非孕育齡婦女肘靜脈血3ml 12例，離心分離血清，-80℃保存待測(cè)。

1.2方法 按照人IL-22 ELISA試劑盒的操作步驟檢測(cè)血清、組織勻漿中IL-22的濃度。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSSl6.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以（x±s） 表示。應(yīng)用兩樣本均數(shù)T檢驗(yàn)（t-test）和單因素方差分析（one way ANOVA）進(jìn)行樣本均數(shù)的比較和統(tǒng)計(jì)分析。P<0.05為差異具有顯著性。

2結(jié)果

早孕期婦女外周血、母-胎界面以及正常非孕婦女外周血、子宮內(nèi)膜中均存在IL-22的表達(dá)。早孕婦女外周血IL-22表達(dá)顯著高于正常非孕育齡期婦女。與正常非孕育齡期婦女子宮內(nèi)膜組織相比，早孕婦女蛻膜組織IL-22表達(dá)顯著增加，且蛻膜組織表達(dá)的IL-22水平亦高于外周血。母胎界面中的IL-22與外周血中的表達(dá)成正相關(guān)（r=0.83，P<0.05）。見(jiàn)表1。

3討論

IL-22是一類(lèi)Ⅱ型細(xì)胞因子，屬于IL-10家族，主要由特定的免疫細(xì)胞分泌，如活化的T細(xì)胞和NK細(xì)胞。與此不同的是，Brosnahan等[2]則發(fā)現(xiàn)孕32d-35d的馬絨毛中表達(dá)IL-22的mRNA。IL-22的受體是由2條鏈組成的異源二聚體，其中IL-10R2廣泛分布于機(jī)體各組織，而IL-22R1則相對(duì)特異地分布于皮膚、腎臟、胰腺、肝臟、小腸、結(jié)腸、肺和氣管等器官組織中。在靜止的及被刺激的免疫細(xì)胞內(nèi)均未檢測(cè)到IL22R1，也未在這些細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)IL-22介導(dǎo)的STAT酪氨酸磷酸化[3～5]。IL-22與IL-22R1結(jié)合后發(fā)生構(gòu)象改變后進(jìn)而與IL-10R2結(jié)合形成復(fù)合物，激活JAK/STAT信號(hào)通路進(jìn)行信號(hào)傳導(dǎo)。此外，在腫瘤細(xì)胞中Lejeune等發(fā)現(xiàn)IL-22也可以激活MAPK通路（ERK1/2，JNK，P38激酶） [6]。

我們的研究結(jié)果顯示人早孕期母-胎界面局部存在IL-22，其數(shù)量與非孕子宮內(nèi)膜組織相比顯著增加，母胎界面中的IL-22與外周血中的表達(dá)成正相關(guān)，提示了IL-22在早孕母-胎界面中起了一定的作用。Wang等[7]在正常妊娠婦女和復(fù)發(fā)性流產(chǎn)婦女的絨毛中發(fā)現(xiàn)IL-22R1的表達(dá)，并通過(guò)共培養(yǎng)人早孕期蛻膜基質(zhì)細(xì)胞與蛻膜NK細(xì)胞發(fā)現(xiàn)IL-22的分泌增加。同時(shí)，利用rhIL-22 刺激滋養(yǎng)細(xì)胞系HTR8/SVneo，發(fā)現(xiàn)IL-22可促進(jìn)滋養(yǎng)細(xì)胞的增殖，抑制細(xì)胞凋亡，推測(cè)滋養(yǎng)細(xì)胞極有可能是IL-22潛在的靶細(xì)胞。Brosnahan等[2]也發(fā)現(xiàn)孕馬的子宮內(nèi)膜中有IL-22R1 mRNA的表達(dá)。IL-22可以增加上皮組織細(xì)胞的固有免疫，同時(shí)也能促進(jìn)損傷后的組織修復(fù)。在滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)子宮內(nèi)膜的過(guò)程中，Gerstenberg[8]等觀察到絨毛細(xì)胞分化并穿過(guò)子宮內(nèi)膜上皮破壞子宮內(nèi)膜的完整性，受損的子宮內(nèi)膜會(huì)重新形成上皮。據(jù)此推測(cè)，絨毛產(chǎn)生的IL-22可能與子宮內(nèi)膜上的IL-22R1結(jié)合后，通過(guò)調(diào)節(jié)子宮內(nèi)膜上皮的再形成從而發(fā)揮作用。另外，IL-22可能通過(guò)上調(diào)諸如β-防御素（β-defensins）之類(lèi)的抗菌蛋白[3，9]，進(jìn)而參與到子宮的固有免疫中。

早孕婦女外周血及蛻膜組織中IL-22的表達(dá)提示其參與了母-胎界面的免疫調(diào)節(jié)。但其作用機(jī)制尚未完全明確。活化的T細(xì)胞和NK細(xì)胞是IL-22的主要來(lái)源，已證實(shí)母-胎界面中存在T細(xì)胞及NK細(xì)胞，人早孕期母-胎界面中的IL-22到底來(lái)源何處尚未明確，人母-胎界面中的絨毛是否也可表達(dá)IL-22的mRNA，需要更深入地研究。

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編輯/許言