不同試劑檢測血清免疫球蛋白結果的可比性及偏倚分析

摘要：目的 探討不同試劑檢測血清免疫球蛋白結果的可比性及偏倚分析。方法 設中生北控公司液體雙劑型血清免疫球蛋白試劑（X）為對照組，北京萬泰公司59661型血清免疫球蛋白試劑（Y）為實驗組，兩組試劑在東芝a1200生化分析儀上測定免疫球蛋白IgG、IgM、IgA，用線性回歸統計法分析實驗組和對照組檢測結果進行方法間的對比試驗，判斷不同試劑的臨床可接受性。結果 IgG、IgM、IgA項目檢測結果的偏差是在可以接受范圍之內的，這說明中生北控液體雙劑型gl診斷試劑和北京萬泰59661型gl診斷試劑測定的結果基本相同。結論 本次研究以NC-CLS，EP9-A2相關文件為依據，在檢測試驗中結合實際情況，使用北京萬泰59661型gl診斷試劑和中生北控液體雙劑型gl診斷試劑對病人新鮮血清檢測3個免疫球蛋白，最后結果行比對及偏倚評估，為多種不同免疫球蛋白檢測試劑可靠性臨床應用提供科學依據。

關鍵詞：試劑；血清免疫球蛋白；偏倚評估

血清免疫球蛋白的英文簡稱是gl，其是由漿細胞分泌合成的球蛋白，具有抗體樣結構和抗體活性功能，在發生感染時合成可增至平時7倍多；所以人體的gl變化可以用來作為檢測人體免疫狀態的可靠指標.隨著生物醫學的發展，中國已有許多試劑廠家制造出不同關于檢測免疫球蛋白的試劑，但是其檢測效果各有不同，如何分析比較各試劑檢驗血清免疫球蛋白結果一直人們探討的問題.本文依EP9-A（美國臨床和美國實驗室標準協會指南文件）[1]標準對免疫球蛋白進行兩種試劑檢測，最后再比較和偏倚評估，現作以下報告。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集來我院就診和住院的患者無黃疸、無溶血的新鮮血清。

1.2 儀器儀器與試劑 采用東芝a1200等生化分析儀。兩組試劑為中生北控生物科技股份有限公司的液體雙劑型免疫球蛋白診斷試劑和北京萬泰生物藥業有限公司的59661型血清免疫球蛋白試劑。中生北控液體雙劑型gl診斷試劑批號：IgG為109005 ；IgA為109010；IgM為109015.萬泰59661型gl診斷試劑批號：IgG為T-IgG；IgA為T-IgA；IgM為T-IgM.兩種試劑都用免疫比濁法做測定。

1.3方法 對照組是用中生北控液體雙劑型gl診斷試劑（X），實驗組是用北京萬泰59661型gl診斷試劑（Y），實施方法間的對比試驗。各選取10名患者血清在不同濃度值作為標本，經2種試劑液分別校準后用RANDOX進行特殊蛋白質控品，最后實施檢測，具體如下：10份血清每份各分為2份，用2種試劑分別在東芝a1200生化分析儀對IgG、IgA、IgM進行測定2次。每次測定在2h完成，第2次方法是和第1次測定次序相反，間隔大于2h，連續測定5d，取均值對兩份測定值進行比較。

1.4統計 按EP9-A2標準對2種檢測試劑測定結果進行分析。數據用Excel2010錄入，SPSS15.0統計分析。

2 結果

2.1試劑檢測均值結果 中生北控gl診斷試劑對IgG、IgM、IgA檢測均值結果分別為12.701、1.602、2.520g/L.北京萬泰gl診斷試劑對IgG、IgM、IgA檢測均值結果分別為13.149、1.490、2.798g/L。

2.2 重復性檢查 計算X和Y各兩次測定差值；2次Y測定差值和2次X測定差值的平均值；2次Y測定差值的平均值。最后得到2次X測定IgG、IgM、IgA對應標準化值為0.00790、0.0251、0.0305；2次Y測定IgG、IgM、IgA對應標準化值為0.00541、0.0271、0.0179。方法Y和X測定值以4和4作為控制限，觀測其兩組標準化值都在控制限之內，表明了兩組測定方法重復性都較好，相關性實驗的要求符合。

2.3離群值檢查 計算Y和X之間的相對偏差、絕對偏差，再計算出IgG、IgA、IgM相關絕對偏差平均值和相對偏差平均值分別為0.769和0.069； 0.331和0.146；0.141和0.092。X和Y之間的相對偏差和絕對偏差都在范圍之間，表明離群值無存在。

2.4線性回歸和散點圖分析 經SPSS15.0統計導入數據，分析散點圖和線性回歸。統計得關系為IgG：Y=0.20+1.023X，r=0.991；IgA：Y=0.189+1.038 X，r=0.987；IgM：Y=-0.178+0.938 X，r=0.987。從結果和相關散點圖可以知道，兩組試劑免疫球蛋白測定值線性關系良好。

2.5可接受性能評價和計算標準誤差 測定兩種試劑結果相關系數值大于0.981，回歸統計的截距和斜率都可靠，分析可接受性偏倚和系統誤差可以用回歸統計方法進行計算。據IgG、IgM、IgA回歸直線方程，計算兩組試劑測定相對偏差，評估試劑在臨床上可接受性程度。經RANDOX特殊蛋白質處理控品的兩種試劑實施檢測累計得出標準差作為可否為臨床接受偏倚判斷。結果表明，兩組試劑都具有臨床接受偏倚。

3 討論

生物試劑相關產業飛速發展，其中臨床醫學診斷試劑實驗不可缺少的項目就是多種診斷試劑檢測同一項目的結果要進行偏倚評估和可比性檢驗，這保障了不同種試劑測定結果間的互認。但中國相關實驗室系統及生產檢驗試劑技術并不完善，多數按照自己實際情況選擇試劑、儀器、質控和操作進行檢測。如何尋求檢測結果可比性和溯源性，是個現實問題。本文2種試劑對IgG、IgM、IgA測定方法比對及偏倚評估是嚴格按EP9-A2通過實現。筆者經試驗發現，IgG、IgM、IgA項目檢測結果的偏差是在可以接受范圍之內的，這說明中生北控gl診斷試劑和北京萬泰gl診斷試劑測定的結果基本相同。

本次研究以NC-CLS，EP9-A2相關文件為依據，在檢測試驗中結合實際情況，使用萬泰檢測試劑和執誠診斷試劑對病人新鮮血清檢測3個免疫球蛋白，最后結果行比對及偏倚評估，為多種不同免疫球蛋白檢測試劑可靠性臨床應用提供科學依據。

參考文獻：

[1]The National Conmmittee for Clinical Laboratory Stand-ards.Method Comparison and Bias Estimation Using Pa-tient Samale；Approved guideline–second edition[S].NC-CLS，EP9-A2，2002.

編輯/蘇小梅