淺談高效液相色譜法在藥品檢驗中的應用與發展

摘要：主要研究高效液相色譜法在藥品檢驗中的應用及其發展前景。首先對高效液相色譜法的產生和發展進行了回顧，之后以抗生素、中藥、保健品和中成藥的成分檢測為例，介紹了高效液相色譜法在藥品檢驗中的應用，認為這種方法前景廣闊。

關鍵詞：液相色譜儀；藥品檢驗

高效液相色譜法出現在上個世紀60年代，在醫藥、環保、生命科學和石油化工等領域中都得到了廣泛的應用，在藥品檢驗中也發展迅速[1]。我國在1985年開始使用高效液相色譜法進行藥品檢驗，現在已經發展成為了一種比較主流的藥品質量控制方法。

高效液相色譜法是從經典液相色譜法基礎上發展出來的一種效率更高、效果更好的色譜方法。和經典的液相色譜法相比，這種方法采用了顆粒更細的均勻規則的固定相，傳質阻抗小，分離效率高。同時這種方法輸送流動相使用了高壓輸送泵，分析所需時間更短，同時也采用了靈敏度更高的檢測器，獲得了更高的靈敏度，為高效液相色譜法的發展帶來了更大的空間。

1 高效液相色譜法在藥品檢驗中的應用

在這種方法中，色譜留的時間、組分結構、性質等是定性參數，對這種技術在藥物鑒別中的應用有著確定的作用。目前我國在藥典中對頭孢羥氨芐進行成分鑒別就采用了這種高效液相色譜法[2]。對照樣品和待驗藥品對比主峰保留時間相同則證明成分一致，符合要求。

高效液相色譜法對頭孢拉定、曲安奈德等藥品鑒別也有著良好的效果。比如中藥防風有著很多同名異物，很多是地區性習用品，例如有水防風、川防風和云防風等，這些藥品臨床藥理有著很大的不同。為了區分，可以采用薄層色譜進行鑒別，采用從正品防風中提取的13中香豆素和色原酮等化合物進行對照，采用高效液相色譜技術鑒別，使用效果十分理想，能夠有效的避開其他成分造成的干擾。

高效液相色譜法還能夠用來測定鳳尾茶中的黃酮含量。鳳尾茶粉碎之后使用甲醇溶液浸泡，采用超聲提取，過濾后測定濾液。選擇甲醇-乙腈磷酸為流動相。設定檢測波長為280nm。使用高效液相色譜技術檢測鳳尾茶中的黃酮含量效果可靠，回收率高。相關文獻記載高效液相色譜分析法還能夠用來進行白芍藥材中芍藥苷的含量，進而確定哪個產地的白芍中芍藥苷含量最高。這種方法使用Hypersil C18的譜柱，選用乙腈-0.05%磷酸水作為流動相，檢測波長設定為230nm，設定柱溫為25℃，設定流速為1.0ml/min。通過一系列實驗，證明毫州產的白芍中的芍藥苷含量最高。實驗證明高效液相色譜法測定不同產地的芍藥苷比較準確可靠，育著較高的重復性。

高效液相色譜法在藥品監管方面的檢查應用效果也比較優異。近些年藥品和保健品非法添加違禁藥品的事件時有發生，采用高效色譜分析法為藥監部門對非法添加違禁藥品的檢驗工作質量的提高提供了支持。

高效液相色譜法還能夠用于進行抗生素的檢測。抗生素濫用造成了耐藥菌株的增加。使用反相高效液相色譜法，采用磷酸二氫鈉-甲醇溶液作為流動相，檢測波長設定為268nm，測定藥品中復方利福平膠囊中的異煙肼和利福平的含量，回收率能夠達到99%[3]。

藥品相關物質檢測。藥品在生產過程中的各個環節會產生一些相關物質。為了保證藥品成分合理，保證藥品治療的安全可靠，需要對相關物質的含量進行控制。一些相關物質的普遍比較微量，常規的薄層色譜法檢查方法的靈敏度不能達到檢測要求。

同時采用高效液相色譜-電噴霧質譜檢測器-雙波長紫外線檢測器聯用檢測技術能夠有效進行抗疲勞、壯陽藥物中的違規成分進行研究，包括西地那非和伐地那非等成分，這種方法能夠有效排除中草藥基本材料的保健品復雜成分的干擾。實際檢測要對保健品同時進行定性檢測和定量檢測。這幾種違禁品的檢測濃度、范圍峰值面積以及濃度有著良好的線性關系，獲得了較好的回收率。

2 高效液相色譜技術的發展

通過高效液相色譜技術獲得更廣闊的應用空間。目前比較先進的設備技術主要有和質譜儀的聯合、柱切換技術的應用、梯度洗脫等，通過和這些先進技術的聯合使用，同時引進了分子生物學和現代分子藥理學的先進理念，使其在藥品檢驗中發揮出了更大的作用。

隨著高效液相色譜技術抗復雜成分干擾能力越來越強，甚至液相色譜和質譜的聯用已經成為了國外藥品檢驗中測定低濃度生物藥品有效成分及其代謝產物的重要方法。對于一些中藥復方注射液，包括清開靈等，進行其有效成分如膽酸類成分的測定使用液相色譜和質譜聯合的方式，比較準確。

高效液相色譜和核磁共振聯用也有著較大的發展空間，同時隨著新技術的不斷融入，高效液相色譜分析法逐漸產生了信息化、自動化和智能化的新變化。

3 結論

本文對高效液相色譜法在藥品檢測中的應用進行了研究總結，認為高效液相色譜法能夠有效、準確、高效率的進行藥品含量的測定，還能夠進行藥品相關物質的檢查，對非法違禁成分擋風監控和抗生素進行檢測。高效液相色譜法有著較高的抗干擾能力，對成分復雜的中藥以及以中藥為基礎的保健品中的違禁品的測量效果良好，對規范保健品市場有著重要的意義。

參考文獻：

[1]劉葦，金城，孔維，等.高效液相色譜-蒸發光散射法測定牛黃中多種有效成分含量及其質量相關性研究[J].分析化學， 2010， 38（4）： 522-526.

[2]石威，王玉堂，權新軍，等.高效液相色譜-蒸發光散射檢測法測定人參根中人參皂苷的含量[J].分析化學，2012， 34（2）： 243-246.

[3]張虹，顧青，潘遠江.高效液相色譜 - 質譜聯用分析植物愈傷組織中喜樹堿及其衍生物[J].分析化學，2011，32（12）：1695- 1695.

編輯/蘇小梅