電子顯微鏡在病理診斷過程中的應用研究

摘要：隨著電子顯微鏡技術的發(fā)展，掃描電子顯微鏡、透射電子顯微鏡在臨床診斷中得到了廣泛的普及和應用，其能夠有效的識別病變組織的特征，確定病變的部位。本文詳細的分析了常規(guī)電鏡、免疫電鏡和掃描電鏡技術在病理診斷過程中的應用。

關鍵詞：掃描電鏡；透射電鏡；病理診斷；臨床

1 引言

電子顯微鏡利用各種樣品和電子之間的作用信息，針對樣品進行微區(qū)觀測。隨著電子顯微鏡的應用普及和發(fā)展，已經(jīng)誕生了很多種電鏡技術，包括掃描電鏡、透射電鏡、冷凍電鏡、掃描隧道電鏡等[1]。臨床應用中，普遍使用透射電鏡和掃描電鏡，透射電鏡可以有效的觀察組織和細胞內(nèi)的結構，掃描電鏡可以有效觀察細胞和組織的表面形貌。目前，電鏡技術已經(jīng)作為病理診斷的一項重要依據(jù)，尤其是應用于臨床診斷手段無法確診的病例中，具有非常明顯的作用。

2 電子顯微鏡在病理診斷過程中的應用

2.1常規(guī)電鏡技術應用 常規(guī)電鏡通常能夠清晰的觀察細細胞和細胞間質(zhì)的超微組織結構，比如可以觀察細胞質(zhì)中的分泌顆粒、細胞核仁、細胞核膜、細胞的染色質(zhì)，觀察細胞間質(zhì)的基板、外板等。不同的組織類型，具有不同的超微結構特征，即使是低分化的腫瘤細胞，在很大程度上仍然會保留同源細胞的相關的超微結構，電鏡即可從這些特征上觀察細胞組織的特征結構，識別細胞組織類型和分化的程度[2]。比如在腫瘤病理診斷過程中，電子顯微鏡可以觀察其超微結構，并且尋找細胞分化的各類標記，以便有效鑒別腫瘤的類型。

觀察腫瘤細胞的超微結構，可以發(fā)現(xiàn)其與正常細胞存在異常，具體表現(xiàn)的特點是細胞器的超微結構存在異常，例如鱗狀細胞癌的細胞質(zhì)中盡管也有部分張力原纖維，但是細胞間橋發(fā)育差，并且數(shù)量非常少。超微結構和細胞外形存在分化不同步，導致一些腫瘤細胞存在非常奇特的形狀，大小不同，從細胞的類型上無法有效的準確判定細胞的組織學類型，但是在超微結構下，可以非常清晰的觀察到細胞組織分化的特征，比如宮頸腺癌等；此外腫瘤細胞存在多向性分化特征，一般來講，正常的體細胞分化時僅僅對特定方向的基因進行選擇性表達，細胞分化表現(xiàn)為單一性，但是腫瘤細胞分化時卻存在多個方向，超微結構下能夠清晰的觀測到，比如肺的腺鱗癌等[3]。

2.2 免疫電鏡技術應用 免疫電鏡技術可以分為兩種，一種是免疫凝集電鏡技術，該技術使用相關的抗原抗體凝集反應之后，再經(jīng)過負染色直接將其放置于電鏡下進行觀察，這一種技術主要用來診斷病毒性的感染疾病；另一種是免疫電鏡定位相關的技術，該技術使用附帶一種特殊的標記的抗體，與相關的抗原結合后，將其放置于電子顯微鏡下實施觀察，確定其分布部位。目前，免疫電鏡定位技術常用的定位標記通常使用膠體金顆粒[4]。臨床上子宮內(nèi)膜癌應用膠體金免疫電鏡技術，可以根據(jù)子宮內(nèi)膜腺上皮體密度和表面積密度等指標的改變，有效的鑒別子宮內(nèi)膜中高度分化的子宮內(nèi)膜，顯著降低子宮內(nèi)膜癌的誤診率，因此使用膠體金顆粒進行診斷，可以迅速構建腫瘤診斷體系。

膠體金顆粒應用于免疫電鏡技術中，其具有定位精確、特異性強、靈敏度高等特點，使用免疫金雙重或者多重的標記方法，可以將細胞的形態(tài)、結構和功能融為一體，非常有助于臨床了解細胞內(nèi)不同分子之間的關系，具有重要的意義[5]。但是，免疫電鏡技術在應用過程中存在一定的問題，它的最大缺陷在于很難在保存抗原活性的同時保存精細的超微結構，此外膠體金顆粒滲透能力比較差，并且操作過程需要較高的清潔度，這些都是目前應用過程中亟待解決的實際問題。

2.3掃描電鏡技術應用 掃描電鏡技術可以有效的觀查組織或者細胞表面的相關結構，可以使用在較大的范圍內(nèi)，有效的觀察病變的結構，因此辨別白血病細胞分類具有非常決定性的意義[6]。對于隱球菌性腦膜炎，可以使用掃描電鏡有效的觀察隱球菌表面的形態(tài)發(fā)生的變化，發(fā)現(xiàn)并診斷相關的病癥，以便更好的診斷患者。掃描電鏡還可以有效的診斷遺傳性口形細胞增多癥，為臨床提供治療的相關依據(jù)[7]。掃描電鏡應用于急性淋巴細胞白血病患者過程中，可以觀察到急淋患者的原始淋巴細胞呈現(xiàn)出橢圓形或者圓形，邊緣呈現(xiàn)波紋狀。

3 結束語

目前，電鏡在病理學診斷過程中，不斷的為疾病的診斷提供可靠的依據(jù)，隨著科學技術的不斷發(fā)展和完善，在病理診斷過程中，電鏡技術將會得到更加有效使用。但是單一的電鏡技術在病理診斷過程中，存在應用的局限性，在其觀察數(shù)據(jù)的過程中，由于視野的范圍所限，僅僅能夠觀察到少量細胞器的結構或者少量的細胞，同時這些細胞都是靜止的、死亡的。因此，使用電鏡技術與其他技術相結合，例如光電聯(lián)合，斷層掃描和三維立體重構等，不斷的改良電鏡技術，將會促進電鏡的診斷技術上升到一個新的水平。

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[7]潘曉霞，陳楠.電鏡在遺傳性腎小球疾病診斷中的應用價值[J].中國實用內(nèi)科雜志，2014，34（3）：238-242.編輯/蘇小梅