羧甲基殼聚糖口腔膜劑的制備及質量控制

摘要：目的 研究羧甲基殼聚糖口腔膜劑的制備和含量測定。方法 采用殼聚糖和羧甲基殼聚糖為成膜材料，對主藥成分進行定性分析，采用紫外分光光度法對奧硝唑進行定量分析。結果 制備的膜劑成膜好，用紫外分光光度法能很好地測定奧硝唑含量。結論 該膜制備工藝簡單，含量測定快速、簡便，質量易控制。

關鍵詞：羧甲基殼聚糖口腔膜劑；制備；質量控制

羧甲基殼聚糖（carboxymethyl chitosan，CMC）是在殼聚糖分子鏈上引入羧甲基而成的水溶性衍生物，不僅具有較強的抗菌、止血等生物活性，還具有良好的成膜性[1]。由于口腔疾病的局限性，再加上局部用藥可使藥物直達\"病灶\"，給藥劑量小、全身副作用小以及局部藥物濃度高等優點，所以近年來將藥物制成局部應用的制劑的研究也越來越多。

目前口腔膜劑的成膜材料主要分為三類[2]：①天然的高分子化合物，如明膠、白芨膠、淀粉等。但此類成膜性能差，經常與其他成膜材料合用，容易滋生細菌，所以應用此類成膜材料需添加防腐劑。②半合成的高分子化合物，如羧甲基纖維素鈉、羥丙甲纖維素等。其特點是毒性小、粘度大、溶于水。③合成的高分子多聚物，如聚乙烯醇和卡波姆。以上成膜材料均具有固有的結構缺點。

筆者以羧甲基殼聚糖為成膜材料，以奧硝唑為主藥制備膜劑，并對其質量控制進行了研究。本文的膜劑選用羧甲基殼聚糖和殼聚糖為成膜材料，兩者均為天然高分子聚合物，廣泛存在于蟹、蝦殼中，在自然界中有巨大的儲備量，且羧甲基殼聚糖對與口腔疾病密切相關的多數厭氧菌均有一定抑制作用[3]。此外，通過改變羧甲基殼聚糖與殼聚糖的比例，可以制成不同降解時間的膜劑[4]，以滿足臨床需求。現報道如下：

1資料與方法

1.1一般資料

1.1.1儀器 UV-240紫外分光光度儀，日本島津；電子分析天平，上海光學儀器廠。

1.1.2試藥 奧硝唑對照品（購自中國食品藥品檢定研究院）；甘油及冰醋酸（均購自萊陽經濟技術開發區精細化工廠），羧甲基殼聚糖及殼聚糖（購自青島海生生物工程有限公司）。

1.2方法

1.2.1吸收波長的選擇 精密稱取奧硝唑對照品20mg，加蒸餾水適量使溶解并稀釋至1000ml，搖勻，配成濃度為20ug·ml-1的奧硝唑溶液（A液）。同時按處方比例配制不含奧硝唑的口腔膜劑水溶液。以蒸餾水為空白在200～400nm波長范圍掃描。結果，奧硝唑對照品水溶液在319nm波長處有最大吸收峰。而空白膜劑水溶液在此波長無吸收，說明輔料對主藥含量測定無干擾。

1.2.2標準曲線的繪制 分別量取A液15.0、20.0、25.0、30.0、35.0、40.0、45.0、50.0ml，用蒸餾水稀釋成50ml，配成系列標準溶液，于319nm波長處測定吸收度（A）。以吸光度A為縱坐標，濃度C為橫坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程，見表1。

1.2.3膜劑的處方及制備

1.2.3.1處方 奧硝唑0.50g，殼聚糖1.6g，羧甲基殼聚糖1.6g，甘油2.5g，糖精鈉0.4g，蒸餾水加至100g。

1.2.3.2制備方法 取殼聚糖1.6g，溶于20ml2%醋酸中；取羧甲基殼聚糖1.6g，溶于40ml蒸餾水中。將以上兩種溶液混合，加入甘油2ml，攪拌，混勻備用。取奧硝唑0.50g，溶于20ml蒸餾水中，后加入0.4g糖精鈉，攪拌溶解；再與上述備用的殼聚糖、羧甲基殼聚糖溶液混合，加適量蒸餾水至規定量，攪拌混勻后靜置。50℃水浴20～30min，氣泡完全消失后，在消毒處理并涂有少量液體石蠟的不銹鋼板（6cm×20cm）上鋪成。50℃干燥，脫模，分割成所需尺寸（每片約含奧硝唑1mg）在紫外燈下照射15min，密封包裝。

1.2.4膜劑的定量方法

1.2.4.1樣品的預處理 隨機抽取膜片，剪碎后，置于50ml的容量瓶中，加蒸餾水適量，水浴溶解后再稀釋至刻度，搖勻后過濾，得樣品溶液。

1.2.4.2奧硝唑的含量測定 樣品溶液于319nm波長處，測定吸光度A值，代入回歸方程計算各樣品中奧硝唑的百分含量。

2結果

2.1外觀按照處方制備的3批樣品，外觀平整，厚度均勻，柔韌性及硬度適中，且膜透明、光滑，無氣泡。膜劑的厚度為0.3mm。

2.2鑒別 取本品適量（約相當于奧硝唑0.1g），加硫酸溶液（3→100）5ml，攪拌使之溶解后，濾過，濾液加三硝基苯酚試液2ml，即產生黃色沉淀。

2.3含量測定取3批樣品，每批制劑取3片（每片含奧硝唑1mg）。剪碎后以蒸餾水為溶媒，充分溶解，微孔濾器過濾至50ml量瓶中，稀釋至刻度于319nm波長處測吸光度A值，代入回歸方程，計算奧硝唑的含量，見表1。

2.4含量均勻度的測定 參照《中國藥典》2010年版二部附錄ⅪE\"含量均勻度檢查法\"[5]，取同批研制的藥膜10片，分別依法測定每片以標示量為100的相對含量x，求其均值 和標準差S以及標示量與均值之差的絕對值A，計算A+1.80S=7.59﹤15.0，結果表明該膜劑的含量均勻度符合規定，見表3。

2.5穩定性試驗的測定 耐高溫耐低溫實驗將樣品分別放置55℃烘箱中恒溫6h，置一5℃冰箱內24 h，取出后放置室溫下；

常溫實驗將密封保存的每批樣本取5份，于第1d，1個月，3個月常溫下儲存，避光防置。

在上述條件下觀察其樣品變化，結果表明，其外觀、顏色、柔韌性和藥物含量等無明顯改變。

2.6微生物限度的檢查 參照《中國藥典》2010年版二部附錄ⅪJ\"微生物限度檢查法\"[5]測定細菌數、霉菌數、酵母菌數及控制菌檢查對本品三批樣品進行檢查，檢查結果均符合規定。

3討論

3.1本膜劑在制模時由于成膜材料稠度較高，故去除氣泡成了制備模劑的難題。因此，在制備過程中應避免混合快，攪拌劇烈，保溫脫泡時靜置，停止攪拌，氣泡加熱至表面，然后剔除。另外，干燥成膜時應控制溫度緩慢上升，避免溫度上升過快產生氣泡，從而影響膜劑質量。

3.2冠周炎的菌群是復雜的，主要由革蘭陰性菌和厭氧菌[6]構成。抗菌藥物的使用在冠周感染控制中起了重要的作用。但由于無法直接作用于牙周袋里的微生物，故抗菌藥物的全身給藥的有效性受到了限制。因此，局部應用抗菌藥物于口腔內的牙周袋內被認為是一種優良的替代傳統冠周炎治療的方法。本膜劑柔韌性及硬度適度，可根據患者臨床需要取適宜大小的藥膜放置于牙周袋內，既能取得較好的臨床療效，又不會給患者帶來不適，便于醫務人員操作。

此外，奧硝唑[7，8]為第三代硝基咪唑類藥物，在治療口腔厭氧菌感染方面療效顯著，最低抑菌濃度為3.1ug·ml-1，最低殺菌濃度為6.3ug·ml-1；且藥效持續時間長，不良反應少。

本膜劑制備方法簡單，紫外分光光度法測定主藥的含量，方法快速、可靠，且質量穩定、易控制，適合在基層醫院推廣應用。

參考文獻：

[1]吳迪，劉輝，浦金輝，等.羧甲基殼聚糖的生物特性及其在醫藥領域的應用[J].食品與藥品，2013，15（3）：210-212.

[2]崔福德.藥劑學[M].北京：人民衛生出版社，2003：157-160.

[3]唐濤，薛毅，信玉華，等.羧甲基殼聚糖對口腔重要厭氧菌的抑菌性能評價[J].中國微生物學雜志.2003，15（6）：337-339.

[4]盧鳳琦，莊昭霞，曹晶，等.可降解性殼聚糖復合膜的研制與生物學評價[J].生物醫學工程學雜志.2003，20（2）：277-280.

[5]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典（二部）[M].2010年版.北京：中國醫藥科技出版社，2010，附錄23，14，88：107.

[6]S.P.Vyas，V.Sihorkar，V.Mishra.Controlled and targeted drug delivery strategies towards intraperiodontal pocket diseases[J].J Clin Pharm Ther，2000，25：21-42.

[7]李從榮，金正江，曹晶，等.奧硝唑治療口腔厭氧菌感染的臨床與實驗研究[J].中華醫院感染學雜志.2004，14（3）：325-327.

[8]Wust J.Susceptibility of anaerobic bacteria to metronidazole，ornidazole，and tinidazole and routine susceptibility testing by standardized methods[J].Antimicrob Agents Chemother，1977，11（4）：631-637.

編輯/申磊