AVE—763A全自動(dòng)尿液有形成分分析儀質(zhì)量控制的探討

摘要：目的 AVE-763A全自動(dòng)尿液有形成分分析儀對(duì)尿液中的有形成分計(jì)數(shù)分析的準(zhǔn)確性和精密度進(jìn)行質(zhì)量控制觀察。方法 選擇在日常工作中容易獲得的且容易量化控制的紅細(xì)胞和白細(xì)胞制備質(zhì)控物作為日常儀器的室內(nèi)質(zhì)控品。結(jié)果 AVE-763校正后對(duì)定值質(zhì)控物分析結(jié)果與定值接近。結(jié)論 建立尿液有形成分的室內(nèi)質(zhì)量控制可以提高檢出的陽(yáng)性率、減少誤差。

關(guān)鍵詞：AVE-763A；尿液；有形成分；質(zhì)量控制

由于尿液中的管型、脫落細(xì)胞、結(jié)晶物等有形成分很難獲得、不易儲(chǔ)存[1]進(jìn)行有效的質(zhì)量控制，所以我們選擇在日常工作中容易獲得且容易量化控制的紅細(xì)胞和白細(xì)胞制備質(zhì)控物，經(jīng)過(guò)連續(xù)的校正記錄，取得了比較滿意的效果。實(shí)踐中只要紅細(xì)胞、白細(xì)胞在尿沉渣鏡檢影像分析中能夠清楚的辨析，其它的結(jié)晶、管型等病理成分也一樣能夠清楚的得到辨析。因此，我認(rèn)為選用紅細(xì)胞、白細(xì)胞制備尿液有性成分的質(zhì)控物是可行的

1資料與方法

1.1儀器 AVE-763A全自動(dòng)尿液有形成分分析儀由沙愛(ài)威科技實(shí)業(yè)有限公司生產(chǎn)，是近年來(lái)在臨床上廣泛使用的一種尿液有形成分分析儀。由高年資的專業(yè)人員按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程[2]調(diào)整到最佳使用條件。

1.2室內(nèi)質(zhì)控物制備 經(jīng)SysmexKX-21N（儀器已經(jīng)嚴(yán)格校正，使用市售maker血液質(zhì)控物）計(jì)數(shù)的全血質(zhì)控物按叢玉隆、馬俊龍《當(dāng)代尿液分析技術(shù)與臨床》的技術(shù)要求進(jìn)行紅細(xì)胞、白細(xì)胞計(jì)數(shù)的室內(nèi)質(zhì)量控品的制備[3]。

1.3細(xì)胞懸液的配制與細(xì)胞計(jì)數(shù)定值 取上述血液質(zhì)控物2ml加入100ml血細(xì)胞計(jì)數(shù)稀釋液，以sysmexKX-21N血細(xì)胞分析儀準(zhǔn)確計(jì)數(shù)紅細(xì)胞、白細(xì)胞10次，取平均值（紅細(xì)胞真實(shí)值=紅細(xì)胞數(shù)-白細(xì)胞數(shù)），后再準(zhǔn)確稀釋，是細(xì)胞數(shù)在1000～1700/ul范圍，分裝密封試管內(nèi)每管5ml，密封存放于4～8℃冰箱中。質(zhì)控品按照1次/2d的頻率在AVE-763A上準(zhǔn)確計(jì)數(shù)紅細(xì)胞、白細(xì)胞數(shù)值。

1.4儀器的校正 根據(jù)AVE-763A對(duì)定值質(zhì)量控制品的分析結(jié)果調(diào)整儀器的換算系數(shù)，使計(jì)數(shù)結(jié)果與定值質(zhì)控品的數(shù)值保持在允許的誤差范圍。

1.5 AVE-763A儀器準(zhǔn)確度、精確度的驗(yàn)證 用定值質(zhì)控品對(duì)倍稀釋成高低不同的五種濃度，用AVE-763A測(cè)定各濃度質(zhì)控品的紅細(xì)胞、白細(xì)胞各10次。

1.6質(zhì)量控制方法的建立

1.6.1 AVE-763A儀器的調(diào)試 嚴(yán)格儀器操作業(yè)指導(dǎo)書(shū)的操作要求每天進(jìn)行一次系統(tǒng)的顯微鏡高低倍焦距調(diào)節(jié)，要求每個(gè)計(jì)數(shù)范圍內(nèi)的行、幀的焦距均至最滿意狀態(tài)。計(jì)數(shù)范圍高倍16幅低倍8幅，計(jì)數(shù)池清潔干凈。每日開(kāi)機(jī)后，用新鮮RBC懸液進(jìn)行顯微鏡焦距的細(xì)調(diào)節(jié)。

1.6.2室內(nèi)品的測(cè)試 將質(zhì)控物用生理鹽水準(zhǔn)確稀釋10倍，顛倒混勻數(shù)次，重復(fù)測(cè)試二次（輔助人工鑒別），結(jié)果取均值，連續(xù)測(cè)定30d計(jì)算均值（X）均值、標(biāo)準(zhǔn)差（SD），繪制L-J質(zhì)控圖。

1.6.3質(zhì)控結(jié)果的判斷 結(jié)果在X±2s內(nèi)在控；超過(guò)X±3s為失控；在X±2s與X±3s為警告。不能有連續(xù)二次結(jié)果在X±2s外，不能有連續(xù)4次結(jié)果在均值一則或者結(jié)果漸升或漸降。

2結(jié)果

2.1 AVE-763A校正前分析定值質(zhì)控品（紅細(xì)胞=1240個(gè)/ul、白細(xì)胞=680個(gè)/ul）結(jié)果為紅細(xì)胞=1040（個(gè)/ul）、 白細(xì)胞=581（個(gè)/ul）、 紅細(xì)胞偏差為-15.6%、白細(xì)胞偏差為-16.6%。

2.2 AVE-763校正后分析不同濃度定值質(zhì)控物結(jié)果見(jiàn)表1。

2.3 AVE-763校正后對(duì)定值質(zhì)控物分析結(jié)果與定值接近，偏差為-2.45%（RBC）和-2.77%（WBC），比較正前明顯減小，質(zhì)控物在連續(xù)稀釋過(guò)程中濃度越低時(shí)偏差隨之增大。但比今年來(lái)的一些文獻(xiàn)[4]報(bào)道的精密度明顯小。

2.4質(zhì)控品的穩(wěn)定性評(píng)價(jià) 新配質(zhì)控品紅細(xì)胞=1204±98、白細(xì)胞=680±78（個(gè)/ul， n=10）；保存1～60d的質(zhì)控品紅細(xì)胞=1194±128、白細(xì)胞=680±85（個(gè)/ul，n=30）。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，TRBC=0.138 TWBC=0.238，P>0.05， 無(wú)顯著性差異，證明質(zhì)控物在60d內(nèi)穩(wěn)定。據(jù)文獻(xiàn)[3]報(bào)道未稀釋的質(zhì)控品可保存6個(gè)月穩(wěn)定，稀釋后的可用30d。

2.5室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果 n=30，紅細(xì)胞=114±19（個(gè)/ul），cv=16.6%，白細(xì)胞=65±13（個(gè)/ul）cv=20%。

3討論

在建立尿有形成份室內(nèi)質(zhì)量控制的過(guò)程中總結(jié)出可能影響儀器準(zhǔn)確性和精密度的因素有以下幾點(diǎn)：

3.1 AVE-763A是全自動(dòng)化智能化較高的尿液有形成分分析儀，它運(yùn)用了\"機(jī)器視覺(jué)技術(shù)\"的多樣量計(jì)方式的原理，通過(guò)擴(kuò)大計(jì)數(shù)面積從而提高陽(yáng)性檢出率、減少系統(tǒng)誤差和偶然誤差，但是計(jì)數(shù)面積的增加的同時(shí)單位樣本的技術(shù)分析時(shí)間也隨之增加。血細(xì)胞每次在計(jì)數(shù)池中充樣的分布達(dá)不到完全一致（固有誤差），所以其計(jì)數(shù)結(jié)果精密度比血細(xì)胞分析儀要差一些。

3.2白細(xì)胞的重復(fù)性比紅細(xì)胞要差，主要原因?yàn)榘准?xì)胞比紅細(xì)胞更難達(dá)到均勻分布。但AVE-763尿液有形成分分析儀與離心鏡檢法、定量計(jì)數(shù)板法相比較能更加簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、快速地對(duì)尿液有形成分進(jìn)行定量分析[4]。

3.3目前沒(méi)有尿液有形成分校正品，用血細(xì)胞分析儀定值的質(zhì)控物來(lái)校正尿液有形成分分析儀，目的是使其對(duì)細(xì)胞的定量分析更精確。

3.4通過(guò)室內(nèi)質(zhì)量控制若儀器分析結(jié)果的精密度下降時(shí)應(yīng)該增加計(jì)數(shù)的面積。室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果出現(xiàn)異常時(shí)應(yīng)檢查儀器進(jìn)樣系統(tǒng)是否準(zhǔn)確，細(xì)胞是否清楚，有否輔以人工的校對(duì)，計(jì)數(shù)池是否清潔、吸樣后是否有氣泡，質(zhì)控液是否混勻、蒸發(fā)、濃縮等情況。排除這些因素后仍有偏差時(shí)可調(diào)節(jié)儀器的換算參數(shù)。

3.4.1標(biāo)本不適合在進(jìn)行樣架中放過(guò)長(zhǎng)時(shí)間，否則有形成分的沉淀導(dǎo)致計(jì)數(shù)誤差的增加。樣本細(xì)胞濃度過(guò)高時(shí)儀器測(cè)試結(jié)果往往偏低或者出現(xiàn)假陰性，是由于細(xì)胞重疊不能計(jì)數(shù)所致。

3.4.2儀器在進(jìn)入休眠狀態(tài)前不能將計(jì)數(shù)池種的標(biāo)本沖洗掉，容易導(dǎo)致尿液沉淀結(jié)垢的雜質(zhì)滯留在計(jì)數(shù)池中，導(dǎo)致結(jié)果的假陽(yáng)性，所以在日常使用和保養(yǎng)中增加沖洗次數(shù)減少計(jì)數(shù)池中雜質(zhì)滯留的概率.

參考文獻(xiàn)：

[1]熊立凡，劉成玉.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)[M].第四版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：187-190.

[2]長(zhǎng)沙愛(ài)威科技實(shí)業(yè)有限公司.AVE-763尿液有形成分分析儀用戶手冊(cè).

[3]叢玉隆，馬俊龍.當(dāng)代尿液分析技術(shù)與臨床[M].第一版.北京科技出版社，1998：112-113.

編輯/孫杰