臨床分離銅綠假單胞菌的感染分布及耐藥性分析

摘要：目的 了解我院2013年銅綠假單胞菌的臨床分布狀況及耐藥情況，為臨床合理選擇抗菌藥物提供依據。方法 采用全自動微生物分析儀DL-96進行細菌鑒定，藥敏試驗和結果評價采用WHO及CLSI推薦的K-B法進行，數據處理采用WHONET5.5軟件分析。結果 2013年共分離出129株銅綠假單胞菌，以痰液標本分離株最多占64.3%，其次為傷口分泌物占14%。分離菌對抗菌藥物耐藥率最高為頭孢噻肟34.1%，依次為替卡西林/克拉維酸21.7%，頭孢哌酮17.0%，亞胺培南16.3%。敏感率最高的是阿米卡星98.4%，其次為妥布霉素96.9%，哌拉西林/他唑巴坦95.3%。結論 通過分析，銅綠假單胞菌是我院醫院感染的主要病原菌，動態監測其耐藥率，嚴格管理抗菌藥物的應用，做到合理使用抗菌藥物。

關鍵詞：銅綠假單胞菌；耐藥性；抗菌藥物

銅綠假單胞菌屬于非發酵菌，廣泛存在于醫院環境、人的腸道、呼吸道和皮膚，尤其在呼吸機管道、呼吸機霧化器、濕化瓶、輸氧管以及醫務人員手等部位廣泛存在，為醫院常見病原菌，主要引起呼吸道、傷口、燒傷創面等感染，與文獻報道一致[1]。為了了解我院銅綠假單胞菌在臨床的分布情況及耐藥率，為此對我院2013年臨床分離的129株銅綠假單胞菌進行統計和分析。

1資料與方法

1.1菌株來源 129株銅綠假單胞菌均為我院2013年1月～12月臨床分離的菌株，去除相同部位的重復菌株。

1.2質控菌株 銅綠假單胞菌ATCC27853，大腸桿菌ATCC25922，均來源于江蘇省臨床檢驗中心。

1.3儀器與培養基 珠海迪爾生物工程有限公司生產的DL-96全自動微生物鑒定儀，藥敏紙片由OXOID公司提供，培養基由廣州市迪景公司提供。

1.4方法 細菌分離培養按《全國臨床檢驗操作規程》第3版操作，采用迪爾微生物鑒定儀鑒定，藥敏試驗按照美國臨床實驗室標準化協會（CLSI）2011年推薦的紙片擴散法測試，結果依據CLSI2011年標準判定耐藥、中介、敏感。

1.5統計方法 用WHONET5.5軟件進行分析。

2結果

2.1銅綠假單胞菌的標本分布 2013年共分離到非重復銅綠假單胞菌129株，按標本來源來分以痰液最多83株（64.3%），見表1。

2.2銅綠假單胞菌的科室分布 129株銅綠假單胞菌的科室分布以呼吸內科最多55株（43%），骨科19株（15%），普外科19株（15%），ICU株（6.2%）等，見表2。

2.3銅綠假單胞菌對常用抗生素的耐藥性分析 銅綠假單胞菌對頭孢噻肟的耐藥率較高34.1%，其次為替卡西林/克拉維酸21.7%，頭孢哌酮17%，亞胺培南16.3%。敏感率最高的為阿米卡星98.4%，其次為妥布霉素96.9%，哌拉西林/他唑巴坦95.3%。129株菌株對抗菌藥物耐藥性見表3。

2.4多重耐藥及泛耐藥銅綠假單胞菌的檢出 129株銅綠假單胞菌檢出3株多重耐藥菌，1株泛耐藥銅綠假單胞菌。

3討論

銅綠假單胞菌為條件致病菌，是醫院感染的常見致病菌之一。我國銅綠假單胞菌的耐藥性仍然處于較高水平，不同醫院抗菌藥物的耐藥性相差較大，應加強監測，指導臨床合理使用抗菌藥物并控制醫院耐藥菌感染的流行[2] 。

本次統計數據顯示，銅綠假單胞菌臨床分離菌株標本來源主要為痰液83株（64.3%），傷口分泌物18株（14%），這可能與廣譜抗菌藥物，激素及免疫抑制劑的廣泛應用有關。同時也表明呼吸道手術切口為醫院感染高發部位，應注意加強防范。科室分布主要為呼吸內科55株（43%），骨科為19株（15%），普外科為19株（15%）。呼吸內科患者多存在嚴重基礎性疾病，病程較長，多有長期應用廣譜抗菌藥物和腎上腺皮質激素的情況，常有氣管插管、霧化通氣、人工吸痰等醫療措施，使得感染的機會大大增加，各種嚴重外傷、惡性腫瘤、胸腹腔等大手術后患者，這些患者機體抵抗力弱，多接受大劑量抗菌藥物、激素、放療、化療，以及氣管切開及各種導管等浸入性治療，這些患者均為醫院感染的高危人群。

銅綠假單胞菌是引起醫院感染最常見的病原菌，近年來其耐藥性不斷上升，呈現多重耐藥和泛耐藥菌現象，給臨床診斷帶來許多困難，銅綠假單胞菌對抗菌藥物的耐藥主要是產生多種β-內酰胺酶、氨基糖苷類修飾酶、外膜通道蛋白D2（OPrD2）缺少及外排機制等[3，4]。由表3藥敏試驗結果顯示，三代頭孢菌素中頭孢他啶耐藥率為13.2%，頭孢哌酮耐藥率為17.0%，頭孢噻肟耐藥率34.1%，其中頭孢噻肟中介率為48.8%，這可能與該類藥物在我院臨床廣泛應用有關，需加強對銅綠假單胞菌耐藥率有計劃的連續監測，替卡西林/克拉維酸的耐藥率也占有一定比例為21.7%，應引起臨床足夠的重視。我院也已出現一定比例耐亞胺培南的菌株，耐藥率達到16.3%，其耐藥機制非常復雜，主要與以下機制有關：①外膜通透性降低，銅綠假單胞菌外膜蛋白（OPrD2）是亞胺培南進入菌體的特異性通道，該蛋白的表達降低或缺失，會使亞胺培南在菌體內達不到有效藥物濃度，使引起銅綠假單胞菌對亞胺培南耐藥主要原因。②β-內酰胺酶的水解，尤其是碳青霉烯水解酶，如Ampc酶、金屬β-內酰胺酶等能水解亞胺培南化學結構，使其失去活性。③多重耐藥外排系統高表達。當外膜蛋白的調控基因發生變異時，外排泵蛋白表達增加，排除亞胺培南增多，使其在菌體內有效濃度降低，從而產生耐藥。三種機制或單獨或協同在亞胺培南耐藥機制中發揮重要作用[5]。

氨基糖苷類藥物的耐藥率較低，如阿米卡星耐藥率1.6%，妥布霉素耐藥率3.1%，是因為氨基糖苷類藥物雖然有抗銅綠假單胞菌的活性，但此類藥物對老年人及腎病患者有增加腎毒性的危險，主要用在聯合治療時使用，臨床較少單獨使用。氟喹諾酮類藥物環丙沙星、左氧氟沙星的耐藥率均低于其他三代頭孢菌素，表達出較好的抗菌活性。β-內酰胺酶抑制劑的復合藥物可抑制細菌產生質粒介導的廣譜β-內酰胺酶，使因產酶而致耐藥的菌株轉為敏感，其抗菌作用顯著優于單藥成分，如哌拉西林/他唑巴坦對哌拉西林的耐藥率從11.6%降至4.7%，頭孢哌酮/舒巴坦對頭孢哌酮的耐藥率從17.0%降至7.0%。

我們從129株銅綠假單胞菌檢測出3株多重耐藥菌，1株泛耐藥菌。由于銅綠假單胞菌的耐藥機理非常復雜，它幾乎包括于現在已知的所有耐藥機理[6]。

綜上所述，對存在以上相關危險因素的患者所處的醫院環境應加強消毒隔離措施，減少各種浸入性操作，注意醫療器械的消毒和滅菌，增強患者的免疫功能，嚴格控制抗菌藥物的使用，加強院內感染的管理和監測，從而有利于防止銅綠假單胞菌的感染與傳播。

參考文獻：

[1]倪語星.2005年中國CHINAET銅綠假單胞菌耐藥性分析[J].中國感染與化療雜志，2007，7（4）：274-278.

[2]孫景勇，倪語星，汪復，等.2007年中國CHINAET銅綠假單胞菌耐藥性監測[J]中國感染與化療雜志，2009，5（3）：192-195.

[3]植志全，何志恒，江鵬，等.多耐藥銅綠假單胞菌β-內酰胺酶和氨基糖苷類耐藥基因研究[J].中華檢驗醫學雜志，2005，28（11）：1211-1214.

[4]顧兵，童明慶，趙文君，等.銅綠假單胞菌多重耐藥機制研究[J].中華檢驗醫學雜志，2006，29（12）：1097-1102.

[5]駱俊，朱德妹.銅綠對碳青霉烯類抗生素耐藥機制的研究進展[J].中國感染與化療雜志，2008，8（1）：76-79.

[6]褚海青，李惠萍，何國鈞.銅綠假單胞菌的耐藥機制[J].中國抗感染化療雜志，2003，3（1）：54-56.

編輯/申磊