腦出血后血漿凝血酶及MMP—9的動態變化及相關性

摘要： 目的 探討腦出血患者凝血酶、MMP-9在腦出血急性期經時動態變化及二者相關性，為急性期腦出血的治療奠定臨床的理論基礎。方法 分別于發病后不同時間點抽取45例腦出血患者靜脈血檢測凝血酶及MMP-9水平。同時檢測15例正常受試者的血漿凝血酶及MMP-9的水平，分析二者是否存在相關性。結果 一般正常人體內會有少量凝血酶及MMP-9的表達，經EL1SA法測定，腦出血患者凝血酶與MMP-9血漿含量動態變化的相關性檢驗，二者的峰值（第5d）呈正相關（P<0.01），兩者經時動態變化的全過程仍然具有高度相關性（P<0.01）。結論 ①正常人血漿存在凝血酶與MMP-9少量表達。②腦出血患者從發病24h內血漿凝血酶水平即迅速升高，至第5d后達高峰，第15d下降顯著與24h相比變化不大，已下降至發病早期水平，但仍高于正常。③腦出血患者于發病24h內血漿MMP-9水平增高，至第5d左右達高峰，第10d時MMP-9顯著低于高峰期水平，但仍高于24h水平，第15d下降更加顯著，較24h明顯下降，僅輕度高于正常人血漿MMP-9水平。④在整個變化過程中，凝血酶含量越高，MMP-9水平越高。凝血酶水平與MMP-9水平呈正相關性。后期凝血酶下降速度慢于MMP-9的下降速度。

關鍵詞：腦出血；凝血酶；基質金屬蛋白酶-9

目前國內外大量動物實驗證實腦出血后凝血酶參與了腦水腫的發生與發展過程，同時凝血酶的活化又使水腫期另一關鍵致病因素MMP-9的表達上調，這兩者相互促進，加重腦出血后腦水腫的發生、發展過程。

腦出血占腦血管病的10%～15%，血腫周圍水腫是導致腦出血患者病情加重及致殘的重要原因。腦出血后血漿、顱內血腫液凝血酶增高機制為腦出血后激活了外源性凝血途徑，增加血漿凝血酶的含量。凝血酶的激活又啟動了另一種腦水腫致病因子，基質金屬蛋白酶類（MMPs）異常表達與血腦屏障（BBB）被破壞直接相關，是導致血管源性腦水腫和繼發性腦組織損傷的另一關鍵因素。MMP-9是MMPs中的主要明膠酶，可特異性地降解基底膜的主要成分。研究探明凝血酶，MMP-9在腦出血急性期動態變化規律。

研究條件：搜集2008年～2009年初在吉林大學第一醫院住院的腦出血患者45例，正常對照組15例。

研究方法：45例腦出血患者在24h內，第5d，第10d，第15d分別抽取靜脈血，檢測血漿凝血酶及MMP-9的含量，同時正常采集對照組15例健康受試者清晨空腹靜脈血1次。將所有數據用統計學方法進行統計分析，討論凝血酶與MMP-9是否具有相關性。

研究結果：在整個變化過程中，凝血酶水平與MMP-9水平呈正相關性。后期凝血酶下降速度慢于MMP-9的下降速度。

1資料與方法

1.1一般資料 45例腦出血組患者符合1995年全國腦血管病會議制定的腦出血診斷標準。對照組15例為本院健康查體者。兩組男女比例為40：20例，平均年齡（54.3±10.8）歲，與年齡、性別構成比無統計學意義（P>0.05）。

1.2方法

1.2.1觀察時間 血液標本收集與測定分別于發病24h內、第5d、第10d、第15d采取空腹肘靜脈血各取3ml，靜置30min，離心（3000r/min）15min，取血清標本待測。正常對照組采集清晨空腹靜脈血1次。采用ELISA法原理測定凝血酶及MMP-9的靜脈血含量。

1.2.2凝血酶及MMP-9檢測方法 所有患者于發病后24h內、第5d、第10d、第15d抽取空腹靜脈血3ml，枸櫞酸鈉抗凝，1h內離心分離血漿至-40℃冰箱保存待測。凝血酶的測定采用ELISA法。

1.2.3統計方法 所有數據均采用SPSS11.5軟件進行統計分析，計量資料采用均數±標準差（x±s）表示，以P<0.01為差異有統計學意義。

2結果

2.1腦出血患者血漿凝血酶的動態變化 經ELISA法檢測顯示，第5d與24h相比凝血酶含量增多，第10d時凝血酶含量較第5d顯著減少，差異有統計學意義（P<0.01），與24h相比，差異無顯著性（P>0.01），見表1。

2.2腦出血患者血漿MMP-9的動態變化 經ELISA法檢測顯示，第5d與24h相比血漿MMP-9水平增高，第5d與第10d相比，第15d下降顯著，與24h比，與第10d比，差異具有顯著性（P<0.01），見表2。

2.3腦出血患者血漿凝血酶與MMP-9變化的相關性 腦出血患者凝血酶與MMP-9血漿含量動態變化的相關性檢驗，兩者的峰值呈正相關，兩者隨時間動態變化的全過程仍然具有高度相關性（P<0.01），見圖1。

3討論

3.1腦出血后凝血酶動態變化 早期凝血酶升高是由于凝血功能增強，凝血酶參與到凝血機制中，同時活化的凝血酶經過腦脊液以及腦靜脈系統吸收入血，造成凝血酶的表達上調。隨著病情發展，纖溶功能逐漸增強，纖維蛋白溶解，與纖維蛋白交聯而失活的凝血酶開始逐漸釋放并激活，釋放的凝血酶開始作用于腦組織細胞，造成腦細胞水腫，壞死。同時由于凝血酶對BBB的破壞，促進血管源性腦水腫的發生。腦出血急性期凝血酶含量與腦水腫呈正相關性。

3.2腦出血后MMP-9的動態變化 因血腫直接壓迫周圍腦組織和小血管，引起局部血流量降低，組織細胞缺血缺氧，導致細胞功能發生改變；缺血-缺氧作為一種信號，刺激炎性細胞、神經元、內皮細胞和膠質細胞，從而激活了MMPs系統導致MMP-9表達上調。在腦出血第5d時，血漿MMP-9的水平處于峰值，隨后由于血腫體積縮小，凝血酶的含量下降，MMP-9的水平迅速下降，甚至快于凝血酶。國內外的動物試驗發現腦出血模型組的MMP-9的mRNA與蛋白表達呈正相關性。

3.3腦出血后凝血酶與MMP-9表達相關性 在整個腦出血的動態變化過程中，凝血酶含量越高，MMP-9水平越高。凝血酶下降速度慢于MMP-9下降速度，達峰值后血漿凝血酶在15d水平與其24h內含量相比無明顯差異，而MMP-9的水平已較24h內含量明顯減少。隨著新生血管對腦供血增強，缺血缺氧等刺激因素減少，腦組織表達MMP-9的水平迅速下降。

4結論

4.1正常人血漿存在凝血酶與MMP-9少量表達。

4.2腦出血患者從發病24h內血漿凝血酶水平迅速升高，至第5d后達高峰，第15d下降與24h相比變化不大，下降至發病早期水平。

4.3腦出血患者于發病24h內血漿MMP-9水平增高，至第5d左右達高峰，第10d時MMP-9顯著低于高峰期水平，但仍高于24h水平，第15d下降更加顯著，較24h明顯下降，僅輕度高于正常人血漿MMP-9水平。

4.4在整個變化過程中，凝血酶含量越高，MMP-9水平越高。凝血酶水平與MMP-9水平呈正相關性。

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編輯/申磊