膠體金試紙條法和ELISA法在乙肝表面抗原檢測中的效果分析

摘要：目的 系統評價ELISA法和膠體金試紙條法在乙肝表面抗原檢測中的靈敏度和特異性，探討ELISA法和膠體金試紙條法在乙肝表面抗原檢測中的應用價值。方法 隨機選取我院檢驗科在2012年5月～2013年2月收集的普通門診或住院病例，以及體檢數據，共計500例血樣標準。標本收集后分別采取酶聯免疫吸附法（ELISA），以及膠體金試紙條法（GICA），對兩者的檢測結果進行比較和統計學分析。結果 膠體金試紙條法和酶聯免疫吸附法檢測乙型病毒性肝炎表面抗原的靈敏度和特異度不全相等，酶聯免疫吸附法的靈敏度和特異度高于膠體金法（χ2=6.056，P=0.035；χ2=4.316，P=0.041）。結論 ELISA法檢測HBsAg具有靈敏度高，特異性強，重復性好，可以半定量等優點，但ELISA法在操作過程中有許多影響因素。

關鍵詞：ELISA法；膠體金試紙條法；靈敏度；特異度

在臨床檢測過程中，目前，用于檢測乙型病毒性肝炎表面抗原的方法主要有酶聯免疫吸附法（ELISA）、膠體金免疫層析法（GICA）、時間分辨焚光免疫法（TRFIA），以及微粒子酶免疫分析法（MEIA）和化學發光免疫分析法（CLIA）等不同方式和不同作用原理的檢測方式[1]。本研究通過對我院在乙型病毒性肝炎表面抗原檢測過程中，通過采用ELISA和GICA所取得的結果進行統計學描述性分析，并且對兩種不同檢測方法的優勢及不足進行進一步的闡述和分析，通過系統評估酶聯免疫吸附法和膠體金試紙條法在檢測乙型病毒性肝炎表面抗原的效能，并對其方法進行對比分析，為有關學者進一步做相關的研究提供科學的理論依據。

1資料與方法

1.1一般資料 本研究的臨床標本均來自我院檢驗科在2012年5月～2013年2月收集的普通門診或住院病例，以及體檢數據，共計500例血樣標準。標本收集后分別采取酶聯免疫吸附法（ELISA），以及膠體金試紙條法（GICA），同時，在結果出來之前，血樣標本存放于零下20℃的醫用冰柜中保存。

1.2主要儀器和試劑：微粒子酶免疫分析儀，酶標儀，洗板機，酶聯免疫吸附法（ELISA）試劑，由上海科華生物技術有限公司生產的乙型病毒性肝病毒表面抗原檢測試劑盒，試劑批號為：20121107；膠體金試紙條法（GICA）試劑，由艾博生物醫藥有限公司生產的乙型病毒性肝病毒表面抗原檢測試劑盒，試劑批號為：20121215。

1.3方法 依據第三版的《全國臨床檢驗操作規程》，本研究人員嚴格按照檢驗操作規程，獲取500例全血標本，通過離心機離心10min后，吸取適量血清來進行臨床檢驗檢測。

1.4統計學方法 利用SPSS 18. 0軟件進行數據分析，計量資料采用均數±標準差（x±s）表示，采用方差分析的方法比較多組組間均數兩兩比較。設定P<0.05為有統計學意義。

2結果

2.1兩種檢測方法陽性率比較 酶聯免疫吸附法乙型病毒性肝炎表面抗原的陽性率為45.8%，膠體金試紙條法乙型病毒性肝炎表面抗原陽性率為43.3%，見表1。

2.2兩種檢測方法靈敏度和特異度比較 對500例研究對象進行回訪調查，其中確診為乙型病毒性肝炎的感染患者為234例。以此為標準計算膠體金試紙條法和酶聯免疫吸附法兩種檢測方法的靈敏度和特異度。這兩種方法測定乙肝病毒表面抗原的靈敏度和特異度不全相等，再做χ2分割檢驗可得出酶聯免疫吸附法的靈敏度和特異度高于膠體金法（χ2=6.056，P=0.035；χ2=4.316，P=0.041），見表2。

3討論

通過本研究結果表明膠體金試紙條法檢測HBsAg具有簡便、快速、不需特殊設備等優點，已廣泛應用于門診患者快速檢查，血站采血車快速檢測等[2]。但是，膠體金試紙條在HBsAg檢測中也有一定的欠缺，由于膠體金顯色需要較高濃度的標記物，故其靈敏度會受到一定限制，在HBsAg濃度較低時易出現假陰性[3]。因此，盡管該操作簡便、快速、無需特殊設備，肉眼可以直接觀察結果，但對于低滴度HBsAg早感染者極易造成漏檢。酶聯免疫吸附法（ELISA法）檢測HBsAg具有靈敏度高，特異性強，重復性好，可以半定量等優點，但ELISA法在操作過程中有許多影響因素，如血清分離，標本保存，試劑在使用前平衡至室溫，加樣有無氣泡、濺出，加樣加在孔壁部非包被區，孵育時間方式，洗板情況等等，每步的操作都會影響試驗的結果。另外，ELISA法反應時間長，需要特殊設備等，不太適合門急診和無償獻血的HBsAg初篩工作[4]。從本次試驗研究可以看出，雖然酶聯免疫吸附法（ELISA法）檢測乙肝表面抗原的陽性率、靈敏度和特異度高于膠體金法，但兩種方法具有密切的相關性，且存在差異性較小，兩者都可以滿足臨床診斷需要，兩種方法各有利弊，應當根據實際工作需要選擇適合的方法。

參考文獻：

[1]安紅霞.ELISA 法與金標法相結合提高乙肝表面抗原檢測準確度的探討與應用[J].中國傷殘醫學，2013，21（6）：295-296.

[2]劉榮靜，尤芳芳，習浩，等.乙肝表面抗原檢測確認試驗方法的建立[J].中國熱帶醫學， 2011，11（7）：815-817.

[3]黎東，龍云霞.乙肝表面抗原檢測中酶聯免疫反應加速儀的應用評價[J].醫學檢驗與臨床， 2011，22（4）：111.

[4]陳永堅.高考學生體檢乙肝表面抗原檢測結果分析[J].醫學信息（下旬刊），2010，23（7）：314-314.

編輯/申磊