摘要:目的 探討用全自動生化分析儀進行項目測定時,葡萄糖(GLU)試劑對血清肌酐(CR)測定產生影響,造成的交叉污染及避免的方法。方法 選取健康體檢人員50名的血清標本制成混合人血清分成三組做肌酐測定。第1組先單獨測定CR作為對照組,第2組先測GLU后測CR,第三組在GLU和CR之間穿插ALT(丙氨酸氨基轉移酶)測定。結果 第2組與第1組測得肌酐值有顯著性差異(P<0.01),第3組與第1組測得的肌酐值無差異(P>0.05)。結論 自動生化分析中,用先測GLU后測CR的分析順序時,GLU試劑對CR的測定結果有影響,可導致CR的測定結果偏高,葡萄糖試劑對肌酐測定有交叉污染,可導致肌酐的測定結果偏高。
關鍵詞:葡萄糖(GLU);肌酐(CR);順序;交叉污染
全自動生化分析儀發展迅速,具有多項目、多樣本的處理能力,其分析技術提高了臨床生化檢驗質量和速度,提高檢測精密度,減少人為誤差,實現了臨床檢驗標準化,但由于共用吸樣針、試劑針、攪拌棒以及比色杯,還有生化儀長期使用致其清洗能力下降、比色杯老化后引起吸附力增加、生化儀內污垢的積聚、檢測順序安排不當,且常規清洗不能有效消除交叉污染時,就會增加試劑間化學污染的可能性,引起測定結果偏高或偏低[1-3]。在日常工作中,我們發現當葡萄糖(GLU)測定排在肌酐(CR)測定前面時,可造成肌酐測定結果偏高,且做了清洗程序,也沒能消除這種影響,考慮可能為試劑之間的交叉污染。為此,我們用科華卓越350全自動生化分析儀進行了相關實驗,并探討了避免交叉污染的方法。
1 材料與方法
1.1一般資料 隨機選取黃浦婦幼保健所50名健康體檢人員,年齡20~50歲。所有對象均用無添加劑真空管抽血。
1.2儀器和試劑 儀器采用科華卓越350全自動生化分析儀。葡萄糖(氧化酶法)、肌酐(肌氨酸氧化酶法)、丙氨酸氨基轉移酶(紫外-乳酸脫氫酶法)試劑均為科華配套試劑。
1.3方法 從50份樣本中提取血清混合制作成人混合血清50ml,充分混勻分成3分,作為3個不同的測試順序組的測試樣本。第一份10ml,分成50例,作為第1組單獨測CR;第二份20ml,分成50例,作為第2組先GLU后CR的測試順序(GLU-CR)的樣本;第3份20ml,分成50例,作為第3組在GLU和CR之間穿插ALT的測試順序(GLU-ALT-CR)的樣本。所有樣本均在儀器狀況良好,質控數據在控的情況下測試。
1.4統計學方法 統計學方法應用SPSS19.0軟件處理數據。計量資料以x±s表示,采用配對t檢驗,以P<0.05為差異有統計學意義。
2 結果
第2組測得的結果與第1組測得值作配對t檢驗,P<0.01,有統計學意義。可以看出,葡萄糖試劑對肌酐測定結果存在明顯正干擾,使CR的測定值偏高。第3組和第1組測得的結果做配對t檢驗,P>0.05,無統計學意義。由此可見,在GLU和CR測試之間穿插ALT可排除這種試劑間的交叉污染(見表1)。
3 討論
對3次不同的檢測順序得出的結果作了統計后,發現葡萄糖試劑對肌酐測試結果干擾嚴重,其原因之一應該是葡萄糖和肌酐的檢測,它們的最終生成物均是紅色化合物醌亞胺,把葡萄糖測試放在前面時,生成的這種最終產物在隨著全自動生化儀器使用時間的增加,儀器使用多年使其的清洗能力有所下降,從而增加了攜帶污染的影響,產生了疊加作用,使肌酐測定結果偏高。
根據幾年使用下來的經驗,我們認為在隨著生化儀器使用時間的累加,而使儀器狀態欠佳時,使試劑間的交叉污染、攜帶污染對測定結果影響變大,這些干擾總結下來大致有以下3個方面:①試劑中含有高濃度的被干擾項目的待測物;②試劑成分參與反應:上一個試劑所要測定的底物有作用,繼而干擾下一個反應的測定結果;③反應進程相同:上一個試劑所引導的反應對下一個項目的反應進程帶來間接的干擾,下一項目所測定的是前后兩個項目反應的綜合作用結果。
在本實驗中,使肌酐測定值偏高的另一原因是:葡萄糖反應產物均有過氧化氫,而肌酐測定試劑必須使用過氧化氫酶,使用前面的葡萄糖反應而產生過氧化氫的測試項目,則會消耗部分過氧化氫酶,導致肌酸和肌氨酸不能有效消除,使測定結果偏高[4-5]。當改變儀器檢測順序,在葡萄糖與肌酐之間任意穿插其他項目進行檢測時,所得結果與對照組比較無顯著性差異。解決以上自動生化分析儀試劑針攜帶污染所致的干擾方法有:①安排項目順序時要求兩個項目間至少要有一個非干擾項目,或將被干擾項目放在干擾項目之前測試;②設定試劑針、樣品針和比色杯的補充清洗程序,從而減低試劑之間的交叉污染;③加強儀器的日常保養和維護,定期對儀器進行清洗和維護。
參考文獻:
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編輯/王敏