淺析血站系統(tǒng)中對血型鑒定的規(guī)范化

摘要：本文中對血型鑒定的基礎理論進行了概述，分別從血型初篩、常用方法以及鑒定模式3個方面對血型鑒定的常規(guī)程序進行介紹，從預防性控制和回顧性控制2個方面對血型鑒定的質量控制工作進行探討，并對血站系統(tǒng)血型鑒定規(guī)范化的重要性工作進行強調并得出相應的結論，以期能夠更好地促進血型鑒定工作的發(fā)展。

關鍵詞：血站；血型鑒定；回顧性；預防性；規(guī)范化

隨著社會的發(fā)展和國家經濟的進步，科學技術的長足的發(fā)展，越來越多的先進技術在醫(yī)學領域得到推廣和應用。讓醫(yī)學研究工作有了突飛猛進的進步。

血型鑒定工作是醫(yī)學領域中一個重要的研究和應用環(huán)節(jié)。對血型鑒定的研究及對血型鑒定結果可靠性的評價是臨床輸血安全的重要輔助性工作。在綜合考慮各方面因素的前提下進行血型鑒定工作。這其中，較為重要的便是規(guī)范化的血型鑒定標準和程序，以及良好的血型鑒定試劑的質量。必須通過行之有效的措施對血型鑒定工作進行規(guī)范，在保證血型鑒定得到正確結果的前提下提出更有效的可行性建議勢在必行。為此，本文將針對這一問題進行詳細的論述，①對血型鑒定的基礎理論進行概述，②分別從血型初篩、常用方法以及鑒定模式3個方面對血型鑒定的常規(guī)程序進行介紹，③從預防性控制和回顧性控制兩個方面對血型鑒定的質量控制工作進行探討，④對血站系統(tǒng)血型鑒定規(guī)范化的重要性工作進行強調并得出相應的結論，以期能夠更好地促進血型鑒定工作的發(fā)展。

1血型鑒定的理論基礎

血型檢測時主要通過Rh（D）血型系統(tǒng)和ABO血型系統(tǒng)進行的，這兩種血型系統(tǒng)都與臨床輸血有著密切的關系。其中，ABO血型系統(tǒng)主要是通過對血紅細胞表面上的ABH血型抗原物質進行區(qū)分得到的，若紅細胞上和血清中含有的分別為A抗原和B抗原，則為A型血；若紅細胞上和血清中含有的分別為B抗原和A抗原，則為A型血；若抗原A、B只在紅細胞上出現(xiàn)，而不再血清中出現(xiàn)，則為AB型血；若紅細胞上既沒有抗原A也沒有抗原B，但有抗原H，而血清中卻含有抗體A、B，則為O型血。同時，在這樣的ABO血型系統(tǒng)之中，還存在A1、A2、A3等與A型類似的A亞型，B1、B2、B3等的B亞型等。

在Rh（D）血型鑒定中，主要是通過對紅細胞表面上的D血型抗原物質進行區(qū)分的，表面上有D抗原物質的紅細胞能夠與抗D血清發(fā)生凝集，這種情況在臨床上劃分為Rh（D）血型陽性；而紅細胞表面上無D抗原，不能同抗D血清發(fā)生凝集的在臨床上通稱為Rh（D）血型陰性。并且在Rh（D）血型系統(tǒng)中，還存在DⅥ、DU等不完全D抗原或弱D抗原，這些抗原較正常的D陽性紅細胞抗原相比要弱一些，但依然存在抗D的可能性，因此在臨床上對這一類情況統(tǒng)稱為弱D型，但成為受血者時便當做Rh（D）血型陰性對待，當成為獻血者時，則作為Rh（D）血型陽性對待。

2血型鑒定的常規(guī)程序

常用鹽水凝集法檢測紅細胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗體，依據抗原抗體存在的情況判定血型。常規(guī)的方法有：①正向定型：用已知抗體的標準血清檢查紅細胞上未知的抗原。②反向定型：用已知血型的標準紅細胞檢查血清中未知的抗體。結果判定：凡紅細胞出現(xiàn)凝集者為陽性，呈散在游離狀態(tài)為陰性。

ABO血型系統(tǒng)通常利用紅細胞凝集試驗，通過正（細胞試驗）、反（血清試驗）定型準確鑒定ABO血型，正定型試驗是指有已知抗體的定型試劑（通常為單克隆抗體試劑）和被檢紅細胞反應所檢測出的ABO血型；反定型試驗則是被檢者血清和已知ABO抗原的試劑紅細胞反應所檢測出的ABO血型，通常正反定型結果相互參照，確保定型試驗的正確可靠，正反定型不符時常表明存在ABO亞型及某些特殊病理狀態(tài)；Rh（D）血型也是采用紅細胞凝集試驗，用單克隆抗D（IgM）血清和被檢紅細胞反應所檢測出Rh（D）血型陽性或Rh（D）血型陰性，Rh（D）血型陰性者，應進一步做Rh（D）確認試驗，以排除Rh（D）弱D型。

需要注意的是：①所用器材必須干燥清潔、防止溶血，凝集和溶血的意義一樣。為避免交叉污染，建議使用一次性器材。標準血清從冰箱取出后，應待其平衡至室溫后再用，用畢后應盡快放回冰箱保存。②加試劑順序：一般先加血清，然后再加紅細胞懸液，以便核實是否漏加血清。③雖然IgM抗A和抗B與相應紅細胞的反應溫度以4℃最強，醫(yī)學教育網收集整理但為了防止冷凝集現(xiàn)象干擾，一般在室溫20℃～24℃內進行試驗，而37℃條件，可使反應減弱。④幼兒紅細胞抗原未發(fā)育完全、老年體弱者抗原性較弱，最好采用試管法鑒定血型。⑤平板法反應時間不能少于10 min，否則較弱凝集不能出現(xiàn)，造成假陰性。⑥正、反定型結果一致才可發(fā)報告。⑦反定型法：先天性免疫球蛋白缺陷，長期大量應用免疫抑制，血型抗體可減弱或消失；血清中存在自身免疫性抗體、冷凝集素效價增高、多發(fā)性骨髓瘤、免疫球蛋白異常均可造成反定型困難；新生兒體內可存在母親輸送的血型抗體，且自身血型抗體效價又低，因而出生6個月以內的嬰兒不宜做反定型。老年人血清中抗體水平大幅度下降或被檢者血清中缺乏抗A及（或）抗B抗體，可引起假陰性或血型鑒定錯誤。

2.1血型初篩 在進行流動采血和獻血點采血時，血站系統(tǒng)應當對獻血者進行嚴格的身體檢查并對合格者進行血液初篩工作，并在這一過程中保留血液標本。在進行血液初篩時主要進行包括血型初篩在內的一系列工作，一般通過平板法對ABO血型進行手工篩查。受到血站科室分工不同的影響，不同的血站在進行血型初篩工作室安排有不同部門的工作人員，檢測結果作為篩查結果。

2.2血型鑒定的常用方法 血型鑒定應嚴格按照最新版的《血站技術操作規(guī)程》附則中規(guī)定操作，規(guī)定ABO血型可采用試管法和微板法，微板法可采用全自動儀器進行。這些方法通過不同的途徑和原理來實現(xiàn)對血型的檢驗，全自動血型鑒定系統(tǒng)由于其血液標本、標準血清、試劑紅細胞等均可由全自動加樣儀或全自動酶免儀完成，加樣精度高保證了實驗結果的重復性，全自動血型儀由于具有樣本條形碼自動化掃描和判讀系統(tǒng)，能夠實現(xiàn)對血型鑒定結果的數(shù)字化判讀，產生的結果中不僅有最終評定，還有原始影像的相關記錄，便于對結果的追蹤和查詢，能夠很大程度上減少或避免鑒定中對結果的誤讀等錯誤的發(fā)生，通過局域網將結果傳輸?shù)綄嶒炇业墓芾硐到y(tǒng)中，不僅能夠實現(xiàn)降低錯誤率的重大突破，還能夠在一定程度上節(jié)省試劑，增大樣本處理效率，具有多方面的優(yōu)點。

2.3血型鑒定的模式 《血站技術操作規(guī)程》中僅是從檢測方法上和程序上規(guī)定ABO血型和Rh（D）血型的鑒定，而未規(guī)定具體怎么做，血站系統(tǒng)應如何進行血型鑒定及保證血型鑒定結果的準確可靠？各個血站從各自理解角度或為保證結果的準確可靠所總結的實踐經驗中，摸索并采用相應模式來做血型鑒定。《血站技術操作規(guī)程》中規(guī)定血型鑒定應當經過2次檢測結果的比對，一致時才能做出血型檢測最終結論。在采供血系統(tǒng)，采用的模式常有3種：A模式：街頭獻血點或流動采血車上檢驗員采用平板法手工鑒定ABO血型正定型和Rh（D）血型，以此為初篩結果錄入血站信息管理系統(tǒng)，血站檢驗科血型鑒定崗復檢崗對血液標本微板法做ABO血型反定型和Rh（D）血型，以此為復檢結果錄入血站信息管理系統(tǒng)與初檢比對，初復檢結果相符則為血型鑒定最終結論；B模式：采血后的針頭血辨由采血點人員采用平板法手工鑒定ABO血型正定型和Rh（D）血型，血型結果與針頭血辨上所標識的血型是否相符并記錄，以此為初篩結果錄入血站信息管理系統(tǒng)，，檢驗科采用微板法做ABO血型正反定型和Rh（D）血型，以此為復檢結果錄入血站信息管理系統(tǒng)與初篩結果比對，初復檢結果相符則為血型鑒定最終結論C模式：檢驗科采用微板法系統(tǒng)做ABO血型正反定型和Rh（D）血型，血型鑒定結果過局域網自動傳輸?shù)窖拘畔⒐芾硐到y(tǒng)中，血庫在血液入庫時用平板法核對血辨血型，與血站信息管理系統(tǒng)中血型結果比對，結果相符為血型鑒定最終結論。3種模式中初復檢結果一致可確定血液標本的血型，初復檢結果不一致時再檢方式基本一致，都是由第三者采用試管法對標本血樣和重新留取的辨子血樣進行平行雙樣ABO血型鑒定和Rh（D）血型鑒定，以辨子血樣鑒定的血型作為獻血者最終的血型。同時，在用全自動血型鑒定系統(tǒng)做ABO血型反定型時，也有的血站檢驗科采用血液標本稀釋血漿與反定型試劑A、B紅細胞反應，而不做O紅細胞孔。個人認為，應加做O紅細胞孔，如O細胞孔凝集，則說明有冷凝集素和/或意外抗體的干擾，需做進一步的試驗，更能確保血型鑒定結果的準確可靠。

3血型鑒定的質量控制

對血型鑒定的質量控制主要可以分為預防性質量控制和回顧性質量控制兩種，下面將分別對這兩種進行分析和介紹。

3.1預防性質控 預防性質量控制（預防性質控）主要通過一系列和一整套完善的科學管理來保證檢驗結果的準確性，這些質控措施主要分布在標本、試劑、器材、方法以及結果等方面的管理上。其中，對標本主要需要采集、送檢和預處理，標本必須充分抗凝，一般標本留取后顛倒混勻5～6次以保證抗凝效果；標本需在2℃～8℃的儲存，在1 w之內進行檢測，將紅細胞與血漿離心分離；對試劑主要需要選取規(guī)格、按要求配置、合理貯存、適當使用及鑒定，通過綜合評定找到信譽度較好的生產廠家，在篩選之下找到合格并符合相關標準的試劑，通過正反鑒定并相互驗證最終選擇合適的試劑按照說明說投入使用并進行貯存；對器材主要需要進行日常維護和保管、適當矯正并合理使用，要對微板、試管等器材進行必要的清潔和干燥，通過與廠家聯(lián)系讓其對全自動血型儀、全自動加樣儀等儀器進行校正，做好相關的保養(yǎng)和必要的維護工作，對血型鑒定專用離心機及顯微鏡等精細設備進行必要的保養(yǎng)和維護。平板法方法在操作時必須要人手工來完成，比較耗費時間和工作人員勞動力，且速度較慢，觀察結果的難度較高，對結果的判斷正確率也較低，比較容易產生血型的誤判，只適用于篩查試驗；相比而言，試管法已經成為當前血型鑒定的最廣泛使用并可信的方法，但是這一方法同樣容易產生人為失誤，對人力物力的耗費較大，為此全自動血型鑒定系統(tǒng)（微板法）便應運而生，成為了血型檢測的主要方式，這一方法極大地降低了人為操作對血型檢驗的出錯影響， ABO血型系統(tǒng)要求做正反定型鑒定，正反定型鑒定相符時可發(fā)出血型報告，正反定型鑒定不相符需進一步檢測是否存在ABO亞型或抗體減弱、不規(guī)則抗體存在、冷凝集素的影響等；Rh（D）血型結果判定較簡單，只是在鑒定為Rh（D）血型陰性者，需應進一步試驗，以排除Rh（D）弱D型。報告發(fā)出前需初復檢工作人員相互核對，核對后由審核員審核，確信無誤后才能發(fā)出血型報告。

3.2回顧性質控 對于回顧性質量控制（回顧性質控）還可以分為室內質控和室間質控兩種。

3.2.1室內質控 室內質控是目前普遍采用的質量控制方法，但是由于血型鑒定是一種定性方法，結果呈多樣性，不似定量試驗能準確定量及酶免實驗結果能以數(shù)值判斷，難以采取一種絕對的質控方式。

目前血型鑒定的室內質控采用在具體方法共識上主要有3種，①是在進行血型檢驗之前對ABO血型進行正反鑒定試劑的相互驗證，②是在檢驗過程中將其結果與已知的標本進行對照和比較，如果其與對照相符合說明該血型鑒定結果有一定的可靠性和有效性，③則是將上述兩種方法相結合。目前市場上有血型鑒定質控品出售，分兩管，規(guī)格為5 mL，紅細胞濃度在2%～3%，一管為ARh（D）+，一管為B Rh（D）-，比較適用于全自動血型鑒定儀，可同步監(jiān)測血型鑒定的整個過程，有效提供室內質控結果。

3.2.2室間質評 室間質控是通過參加衛(wèi)生部臨檢中心和省臨檢中心的盲樣考核來對實驗室進行檢驗，在考核結果公布之后對結果進行認真對待，總結經驗，并加以改正和完善。

4血站系統(tǒng)血型鑒定規(guī)范化的重要性

血型鑒定工作是醫(yī)學領域中一個重要的研究和應用環(huán)節(jié)。從已有的研究中能夠發(fā)現(xiàn)，很多血型鑒定工作的問題都處在標本采集、標本加樣以及對結果的填寫和判讀上，偶爾也會出現(xiàn)錄入錯誤和核對錯誤等非技術性失誤產生的問題。血型鑒定工作和質量控制模式有著多樣化的特點。眾所周知，《血站實驗室質量管理規(guī)范》、《血站質量管理規(guī)范》、《血站技術操作規(guī)程》三個文件是血站系統(tǒng)中重要的指導和規(guī)范性文件，應當在這三個規(guī)范的指導下，對血型鑒定的程序進行規(guī)范，對每一個具體的環(huán)節(jié)進行明確，從標本的采集一直到結果的公布，不論是程序、方法、模式還是質控都應當規(guī)范化進行，這樣才能夠從根本上保證血型鑒定結果的準確性和可靠性。

5結論

作為血站系統(tǒng)日常工作中最重要的部分，血型鑒定工作與每一個患者的生命安全息息相關。規(guī)范化血型鑒定工作是血站系統(tǒng)工作效果提升的必要途徑，因此，我們應當切實加強血站血型鑒定工作的質量管理，強化規(guī)范化意識，及時認識到出現(xiàn)差錯的影響嚴重性，對工作進行定期檢查，合理管理薄弱環(huán)節(jié)，持續(xù)監(jiān)管和改進有關工作，對操作規(guī)程進行必要的規(guī)范，通過合理而有效的考核和審查制度嚴格監(jiān)管血型檢驗和鑒定工作，進而確保臨床血液應用工作的安全[1-10]。

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編輯/肖慧