HPLC法測定阿莫西林膠囊中阿莫西林的含量

【摘 要】阿莫西林又名安莫西林或安默西林，分子式為C16H19N3O5S，是一種最常用的青霉素類廣譜β-內(nèi)酰胺類抗生素。固定相為：依利特hypersil BDSC18色譜柱（4.6*250*5u ），乙腈-甲醇-0.1mol/L的磷酸二氫鉀溶液-冰醋酸（10∶10：80：0.1）為流動相，檢測波長為254nm；阿莫西林在100～350μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。阿莫西林的平均回收率為99.5%。本法簡便、重現(xiàn)性好、回收率高，可用于阿莫西林膠囊中阿莫西林的含量測定。

【關(guān)鍵詞】阿莫西林膠囊；阿莫西林；測定

阿莫西林又名安莫西林或安默西林，分子式為C16H19N3O5S，是一種最常用的青霉素類廣譜β-內(nèi)酰胺類抗生素。阿莫西林殺菌作用強，穿透細(xì)胞壁的能力也強，是目前應(yīng)用較為廣泛的口服青霉素之一。阿莫西林適用于溶血鏈球菌、肺炎鏈球菌、葡萄球菌或流感嗜血桿菌所致中耳炎、鼻竇炎、咽炎、扁桃體炎等上呼吸道感染、溶血鏈球菌、葡萄球菌或大腸埃希菌所致的皮膚軟組織感染、急性單純性淋病、溶血鏈球菌或葡萄球菌或流感嗜血桿菌所致急性支氣管炎、治療傷寒、傷寒帶菌者及鉤端螺旋體病等。本文用高效液相法對阿莫西林膠囊中的阿莫西林的進行了含量測定。

1.儀器與試藥

KHW-D-1LC精密拉伸水浴鍋（上海科恒實業(yè)發(fā)展有限公司）；UPLC 超高效液相色譜系統(tǒng)（沃特世科技（上海）有限公司）；R-1001-VN旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（鄭州長城科工貿(mào)有限公司）TU-1901 雙光束紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）；QT3120K脫氣可調(diào)型超聲波清洗器（天津市瑞普電子儀器公司）；TGL-18C高速臺式離心機（上海楚柏實驗室設(shè)備有限公司）；XYG-H帕恩特痕量分析級超純水機（北京湘順源科技有限公司）；DOA-P504-BN無油隔膜真空泵（上海洽姆儀器科技有限公司）；瑞士梅特勒-托利多MS精密天平（梅特勒-托利多中國公司）。甲醇（深圳市中原化工科技有限公司）、冰乙酸（衡陽市迅源化學(xué)試劑有限公司）、乙腈（蓋州市鵬圣化工有限公司）、磷酸（南京盛慶和化工有限公司）、醋酸（山東高密高源化工有限公司）、磷酸二氫銨（深圳市中原化工科技有限公司）、鹽酸（深圳市中原化工科技有限公司）。

2.含量測定

2.1色譜條件

依據(jù)查閱文獻及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[1-11]。色譜柱為依利特hypersil BDSC18色譜柱（4.6*250*5u ）；乙腈-甲醇-0.1mol/L的磷酸二氫鉀溶液-冰醋酸 （10∶10：80：0.1） 為流動相；檢測波長為254nm；流速1.0mL·min-1；柱溫：30℃。理論板數(shù)按阿莫西林峰計算應(yīng)不得低于2000。

2.2供試品溶液的制備

取阿莫西林膠囊內(nèi)容物適量，研細(xì)，精密稱定至容量瓶內(nèi)，加流動相適量超聲溶解，放涼，流動相定容，過0.45μm的濾膜，即得。

2.3對照品溶液的制備

精密稱取阿莫西林對照品約5mg，置5毫升棕色容量瓶中，用流動相超聲波振蕩溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取1毫升，置10毫升棕色容量瓶中，用流動相超聲波振蕩溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得（每1mL溶液中含阿莫西林0.1mg）。

2.4陰性干擾試驗

按方中比例取阿莫西林膠囊輔料，按照制備工藝方法制成陰性制劑，按2.3項下方法制成供試品溶液，按色譜條件測定。結(jié)果表明：在選定條件下測得的陰性液吸收曲線在與阿莫西林相同保留時間處不存在吸收峰，說明此方法具有較強的專屬性。

2.5標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

制備濃度為100、150、200、250、300、350μg·mL-1的對照品溶液，分別精密吸取10μL注入HPLC，記錄色譜圖。以峰面積積分值A(chǔ)（μg）為橫坐標(biāo)，進樣量為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算回歸方程。試驗表明，阿莫西林對照品在100～350μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.6精密度試驗

精密吸取阿莫西林對照品溶液10μL重復(fù)進樣6次，測定峰面積積分值，對照品峰面積積分值的RSD為0.43%。結(jié)果表明，本實驗精密度良好。

2.7重現(xiàn)性試驗

分別稱取同批阿莫西林膠囊樣品6份，分別制備成供試品，按色譜條件測定含量，并計算樣品的RSD值為0.55%，結(jié)果表明，此含量測定方法的重現(xiàn)性良好。

2.8穩(wěn)定性試驗

取供試品溶液，分別在0，1，2，3，4h精密吸取供試品溶液注入液相色譜儀，進樣測定，供試品阿莫西林峰面積積分值的RSD為0.53%。結(jié)果表明阿莫西林至少在4h內(nèi)穩(wěn)定。

2.9回收率試驗

采用加樣回收試驗，取已知含量的同一批供試品各6份，精密稱定，分精密添加一定量的阿莫西林對照品，按供試品制備所述方法制備供試品溶液，測定含量（同時測定樣品含量），計算回收率。6次測定的平均回收率為99.5%，RSD為0.69%。

2.10樣品含量測定

依照上述含量測定方法，測定阿莫西林膠囊三批樣品中阿莫西林的含量，結(jié)果三批樣品的含量分別為標(biāo)示量的100.2%、99.3%、99.8%。

3.討論

分別考察乙腈-甲醇-0.1mol/L的磷酸二氫鉀溶液-冰醋酸 （10∶10：80：0.1），乙腈-甲醇-0.1mol/L的磷酸二氫鉀溶液-冰醋酸 （10∶20：70：0.1），甲醇-乙腈-水-冰醋酸（10：10：80：0.01），磷酸鹽緩沖液（ pH值6.0）-乙腈（80：20），0.2mol/L磷酸二氫銨溶液-乙腈-甲醇（60：25：15），甲醇-水-三乙胺（18∶85：0.1），磷酸二氫鉀溶液-甲醇-冰醋酸（85：15：0.1）不同比例的流動相，結(jié)果以乙腈-甲醇-0.1mol/L的磷酸二氫鉀溶液-冰醋酸 （10∶10：80：0.1） 為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用乙腈-甲醇-0.1mol/L的磷酸二氫鉀溶液-冰醋酸 （10∶10：80：0.1） 為流動相。本實驗方法是一種簡便、準(zhǔn)確、安全的測定阿莫西林膠囊含量的方法。阿莫西林膠囊中阿莫西林的含量為標(biāo)示量的95-105%。 [科]

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