淺談空氣微生物的檢驗技術

摘要：目的： 探討空氣微生物的檢驗措施。方法： 通過實驗室的科學檢驗，掌握空氣微生物的屬性與致病因素，總結出系統的檢驗措施和相應的控制方法。結論： 科學準確的掌握空氣微生物的檢驗措施，把握致病規律，才能為有效的控制和預防相關疾病提供可靠的依據。

關鍵詞：空氣微生物；檢驗；細菌

【中圖分類號】R446.5 【文獻標識碼】B 【文章編號】1672-8602（2014）01-0188-01

存在于空氣中的微生物。是主要的空中浮游生物。對較干燥環境和對紫外線具有抗性的種類，主要有附著于塵埃上的從地面飛起的球菌屬（包括八疊球菌屬在內的好氧菌）；形成孢子的好氧性桿菌（如枯草芽孢桿菌）；色串孢屬等野生酵母；青霉等霉菌的孢子等。下面將空氣微生物的檢驗技術分析匯報如下。

1各類微生物的基本檢驗程序

空氣中微生物檢驗主要分為細菌、病毒、真菌、立克次體類的檢驗。

2幾種常見空氣微生物采樣

方法及細菌菌落總數測定

2.1Andersen采樣器

2.1.1構造： 新型采樣器是Andersenl958年研制而成由采樣膠體、流量劑、壓力計和抽氣泵組成。

2.1.2特點： ①采集空氣微粒范圍寬；

②采樣效率高；

③生物失活率低；

④敏感性高；

⑤操作簡便；

⑥應用范圍廣，常用于空氣致病微生物的采集。

2.1.3操作步驟：①消毒

采樣器的消毒方法有3種：75%酒精；高壓蒸氣滅菌：用于采樣頭的消毒；環氧乙烷消毒。

②有關參數設定：

流量，28.3L/min，固定流量抽吸空氣，流量準確與否是該采樣器操作的關鍵所在，流量不準或未經校正的采樣器不可使用。真空度，0.1354kPa。若真空度不夠，可影響氣流速度，從而影響采樣效率。

③平皿制備

采樣用培養基平皿要提前一天準備好，每個樣品需6個平皿，預置37℃18～24h培養，無細菌生長，即可用于采樣。

④采樣高度

根據采樣目的而定，一般置于人的呼吸帶高度，大約1.0～1.5m左右，并且采樣人員應遠離采樣頭。采集時間要根據現場微生物污染程度而定。

⑤培養

打開采樣器，蓋上平皿蓋。細菌培養37℃培養48h，真菌培養28℃培養72h。

⑥菌落計數：計數方法可以采用分段計數及菌落計數器進行。一般以菌落形成單位表示。一般每個平皿最多不超過250cfu。

2.2THK-201型采樣器

2.2.1構造： THK-201型采樣器是在JWL型采樣器基礎上改進而成?；緲嫵砂ǎ翰蓸宇^、流量計、抽氣泵、可調電路。

2.2.2特性： ①采樣頭的篩孔（隙）為可調式；

②捕獲率高；

③適應范圍廣，在不同環境通過調節篩孔來采集不同大小的微粒提高了其應用范圍，可采集細菌、真菌、病毒、立克次體、原生動物、植物、花粉、藻類等，適用于環保、生物工程、醫療衛生、衛生防疫、工農牧業、食品加工業等；

④功能齊全。

2.2.3操作步驟： ①平板制備

制作平皿培養基應注意厚薄均勻，保證無菌。瓊脂濃度要較其他采樣方法略高一點（≤2.4%），過高過低均會影響采樣效率。

②儀器相關參數

電源，工作電壓：220V；轉速，選檔，定時范圍；流量，5～35L/min；采樣篩頭，最小狹縫≤20μm，最大500μm。根據需要分級調節，使用時要對環境中微生物有一個大略估計，以便進行篩孔調節。

③培養

方法和時間同Andersen采樣器。

2.3自然沉降采樣法

2.3.1特點：①簡便易操作，不需特殊采樣器，只需采樣的平皿培養基。

②能反映沉降細菌的數量，特別是醫院的燒傷外科、手術室、人流室等一些相對空氣流動性不大，但空氣中微生物在靜止時下落到物表，造成污染，更嚴重的造成院內感染。

③可用于粗略反映空氣中細菌污染狀況。

④此法不足之處：用下落菌推算空氣中懸浮菌量，有推理上的錯誤。比較公認的是奧梅梁斯基的公式來推算濃度，他認為在100cm2培養基表面，5min內能落下約10L空氣中所含菌量。標準細菌種類較少。采樣條件要保證無菌狀態，十分難以控制[1]。

2.3.2自然沉降法采樣的操作步驟：①培養基的制備：

一般采用9cm直徑平皿制作。細菌用普通營養瓊脂，真菌用沙堡培養基或察氏培養基。制備好的平板應置35～37℃預培養18～24h，選無菌生長的平皿用于采樣。

②選擇檢測點：

室內面積≤30m2沿一對角線上取三點，即中間一點兩端各距墻1m處各取一點，室內面積>30m2，設東、南、西、北、中5個點，各點均距墻1m，采樣高度0.8～1.5m。若使用采樣器監測時，采樣器應距地面高度33cm，離門窗及人員流動1m以上，且采樣器與采樣者要保持一定距離（50cm），防止采樣者自身細菌被吸入采樣器而影響檢測結果。室外采樣要根據該地區氣象、交通、大氣污染程度、建筑物布局、有無樹林等進行合理選點，選點數不定，每個點采樣高度1.5m以上。可以一個點同時放置兩個平皿，以平均菌落數代表該點的菌落數。

③暴露平血時間：

原則是保證客觀反映采樣點情況，采樣后平皿中生長的菌落數要便于準確計數，太多以至于無法計數將造成較大偏差，一般潔凈室內暴皿時間可在5～30min，一般室內較潔凈的地方，多采用暴皿5min即可。

④培養：

細菌樣品35～37℃培養48h，真菌樣品置28℃培養72h。

2.4JWL型采樣器

2.4.1結構： 由采樣頭、流量計、抽氣泵、電源電路4部分構成。

2.4.2特點： ①采樣的平皿可以轉動，使平皿上菌落均勻分布；

②交一直流兩用，應用簡便；

③自動按時采樣，可采細菌和病毒；

④但對空氣中占大多數的粒子捕獲率低。

2.4.3操作步驟： ①平皿制備

細菌用普通瓊脂，真菌用選擇性培養基（如察氏培養基）。平皿要求厚薄均勻，表面水平，加培養基量4.5ml，瓊脂濃度1.8%～2.4%為宜。

②采樣相關參數的調整

電源，220V，備24V直流蓄電池；流量調節，25～30L/min；空氣壓力，采樣系統98～245kPa，電氣系統為86.6～106.6kPa；采樣時間，一次不得超過15min；采樣高度，1.0～1.5m[2]。

③培養

同Andersen采樣法。

參考文獻

[1]吳冬檸，韋彩嬌，余波.百色城區高校大學生宿舍空氣微生物的監測與分析.右江民族醫學院學報，2013，35（05）：667-667.

[2]談書勤，胡貴方，顧大勇.空氣微生物氣溶膠富集、檢測與空氣消毒技術研究進展.中國消毒學雜志，2012，29（12）：1115-1120.