血清中維生素C含量與淋巴細胞DNA損傷的相關性探討

摘要：目的：研究維生素C對淋巴細胞損傷的影響。方法：通過檢測血清中維生素C的含量和淋巴細胞DNA的損傷程度。選取某皮包廠接觸甲苯約100人，采集全血分，離淋巴細胞。DNA損傷程度的分析采用“彗星”電泳技術；血清中維生素C的測定采用高效液相色譜法。結果：血清中維生素C的含量大于60μmol/l，與血清中維生素C的含量低于20μmol/l，彗星尾長有顯著性差異（p<0.01）。結論：對于接觸甲苯的工人，體內維生素C含量在一定的范圍時，可以有效地防止DNA損傷，當體內維生素C含量不足時，體內細胞DNA的損傷增加。對于長期接觸低濃度甲苯的工人，每天補充一定的維生素C，可以有效地防止DNA損傷。

關鍵詞：DNA損傷；維生素C；彗星電泳

Effects of the concentration vitamin C in serum on the lymphocytes DNA

（the 12th people hospital of Guangzhou Sun Zao，Xu Qi-rong ）

Abstract：

Objective This study aimed at studying the effect of the concentration vitamin C （VC ）in serum on the lymphocytes DNA. Method DNA damages were measured by comet assay and the concentration of VC by high performance liquid chromatography（HPLC），100 workers occupational exposed toluene were from a factory producing bags. Results The DNA damage had obviously changing in different groups and the DNA damage obviously increased in the group with low concentration of VC（<20μmol/l） and the DNA damage reduced obviously in the group（VC>60μmol/l）；Conclusion To a certain extant the concentration of VC in serum could reduce the lymphocytes DNA damage.

Key words：DNA damage vitamin C comet assay

【中圖分類號】

R453 【文獻標識碼】B 【文章編號】1002-3763（2014）07-0017-01

為了深入了解維生素C抗氧化作用，選擇長期接觸甲苯的作業工人作為研究對象，測量其體內的維生素C的濃度，同時通過彗星電泳的方式，測量其淋巴細胞的損傷情況。

1 對象與方法

1.1 選擇20～40歲女性100人，無癌癥、心臟病、糖尿病、胃潰瘍等病史，接觸苯系物1年時間以上。

1.2 職業衛生學調查：車間毒物濃度（8小時加權平均濃度）苯（<0.6mg/m3），甲苯（2.5～28.6 mg/m3），二甲苯（<0.4mg/m3）。均未超過職業接觸限值。

1.3 血清維生素C水平分析：取受試者全血3mL、4℃保存于冰箱，收集血清。血清中維生素C的測定采用高效液相色譜法分析。

1.4 DNA損傷分析： 采用彗星電泳的方法檢測細胞DNA損傷情況；將采集的血樣（0.5 mL）經淋巴細胞分離液分離后，包埋于瓊脂糖中，進行裂解、電泳。再用熒光電泳鏡及Comet。 4.0圖像分析軟件隨機計數60個淋巴細胞的彗星距（Tail Moment，TM），取中位數，作進一步分析。

1.5 數據分析：所有TM值（中位數）均經自然對數轉換，血清中維生素C的濃度分為3個梯度，大于60μmol/l，小于20μmol/l，20μmol/l≤C≤60μmol/l，經spss軟件分析。F檢驗。

2 結果

2.1 血清中維生素C（VC）濃度測定情況

2.2 血清中維生素C濃度對TM的影響： 將血清中維生素C濃度分為3個梯度組，A組代表VC<20（μmol·L-1），B組代表VC≧60（μmol·L-1），C組代表20≤VC<60（μmol·L-1）. A組彗星距（TM）（0.67±0.16μm）>C組彗星距（TM）（0.49±0.11μm）（P）>B組彗星距（TM）（0.45±0.13μm），可見對于長期接觸低濃度甲苯的工人體內維生素C的濃度與細胞DNA損傷有一定的關系，血清中維生素C的濃度越高，體內細胞DNA損傷越小。。

2.3 血清中維生素C濃度與TM分析

3 討論

DNA損傷是DNA復制過程中發生的DNA核苷酸序列發生改變，可以導致遺傳特征改變，引起多種疾病。有研究報道認為：職業性接觸低濃度的苯系物會引起血細胞DNA的損傷^[1]。朱志良等應用新型彗星圖像分析系統檢測某制鞋工廠112名接觸甲苯作業的工人的DNA，結果表明DNA有損傷。Hiraku Y，Kawanishi S等人認為DNA受到損傷是因為體內產生了過多的過氧化物，維生素C是一種抗氧化的水溶性維生素，近年來很多報道關于研究維生素C與DNA損傷的關系[2] [3]。Konopacha，M報道：維生素C可以清除活性氧族，防止DNA受到損傷；維生素C不僅是一種抗氧化劑，它還能調節某些基因的表達，參與細胞凋亡和DNA修復過程^[4]。Sram RJ等人研究報道；血清中維生素C的濃度高于50μmol/L時，維生素C開始有保護作用，維生素C可以減低DNA損傷的頻度，特別是對于那些職業性接觸致癌物質而且維生素C攝入不足的人群，同時維生素C也能夠降低致癌的敏感程度^[5]。但也有研究認為維生素C的抗氧化作用和毒性與劑量有密切關系。他們認為過高劑量的維生素C可能對人體造成傷害^[6]。趙小燕等人研究報道高劑量的維生素C對DNA有損傷^[7]。本文隨機抽取接觸甲苯的工人的血樣分析，發現維生素C的含量與DNA損傷有一定的關聯。數據分析時，維生素C的濃度分3個梯度是基于平均值加減一個標準差。我們也嘗試了其它分段，結果發現維生素C濃度分為2.2A、B、C3組梯度更較為合理。

參考文獻

[1] 張耘，等 職業接觸低濃度苯系物人群血細胞DNA損傷的研究。中國工業醫學雜志；2008，21（4）：258-260.

[2] 朱志良等 甲苯作業工人外周血細胞DNA損傷的檢測。現代預防醫學；2002，29（4）：248-252。

[3] Hiraku Y，Kawanishi S. Oxidative DNA damage and apoptosis induced by benzene metabolites.[J]Cancer Res.1996， 56（22） ：5172-5178.

[4] Konopacha，M. Role of vitamin C in oxidative DNA damage. Postepy Hig Med Dosw. 2004，58（3）43-48.

[5] Sram RJ，Binkova B，Rossner P Jr. Vitamin C for DNA damage prevention. Mutat Res.2012，733（12）：39-49.

[6] Poljsak，B，Raspor P. The antioxidant and pro-oxidant activity of vitamin c and trolox in vitro ：an comparative study.[J]，The FASEB Journal， 1999， 13（9）：1007-1024.

[7] 趙小燕，沈深，左長青等.大劑量維生素C對DNA損傷及榭皮素-7-硫酸酯鈉的保護作用。中南醫學科學雜志.40（3）：248-252.