不同碳源對白靈菇菌絲生長的影響

張鎖峰等

摘 要：以‘白靈6號為供試菌株，通過對各處理的菌落直徑、菌絲生長速率和菌絲生長指數進行比較，探討7種碳源對白靈菇菌絲生長的影響。研究結果表明：白靈菇有較廣的碳源譜，從生長速率來看蔗糖、麥芽糖和可溶性淀粉是最優的選擇，從生長指數分析，果糖、葡糖糖和蔗糖菌絲生長效果較好，分別為16.43、12.34和12.02，結合市場價格，最佳碳源選擇蔗糖。對菌落直徑、長勢評分、生長指數進行偏相關分析，結果表明：無控制變量時，長勢評分與菌落直徑顯著負相關，與菌絲生長指數顯著正相關；在控制變量分別為菌落長勢評分和菌落直徑時，菌落直徑與菌絲生長指數顯著正相關，菌落長勢評分與菌絲生長指數顯著正相關。

關鍵詞：白靈菇；碳源；生長速率；菌絲生長指數

中圖分類號：S646 文獻標志碼：A 論文編號：2014-0478

Abstract： In this experiment， Pleurotus nebrodensis ‘No.6 as the tested materials， we compared the colony diameter， mycelia growth rate and mycelia growth index among the various processing， to study the effects of seven carbon sources on the growth of Pleurotus nebrodensis hypha. The results showed： Pleurotus nebrodensis had a broader spectrum of carbon sources， and the sucrose， maltose and soluble starch was the optimal choice from the growth rate， and fructose， glucose and sucrose for the hypha growth effect was good from the analysis of the growth index， 16.43， 12.34 and 12.02， respectively. Combined with the market price， the best carbon source selection was sucrose. We conduct partial correlation analysis on the colony diameter， growth scores， and growth index， the results showed： when there was no control variables， the growth scores was negatively correlated with the colony diameter， and positively related to the mycelia growth index； when the control variables were the colony growth scores and the colony diameter， the colony diameter and the colony growth score was respectively positively related to the colony growth index.

Key words： Pleurotus nebrodensis； Carbon Sources； Growth Rate； Mycelia Growth Index

0 引言

白靈菇，學名白靈側耳，屬擔子菌亞門（EnmycopHyta）、擔子菌綱（Basidiomycetes）、傘菌目（Agaricales）、側耳科（Pleurotaceae）、側耳屬（Pleurotus）[1]，是南歐、北非、中亞內陸地區春末夏初發生的品質極為優良的一種大型肉質傘菌。在中國僅分布于新疆干旱的沙漠戈壁里，故又有“天山神菇”、“西天白靈菇”之稱[2]。該菇子實體顏色潔白、脆嫩可口、香味濃郁，還具有很高的藥用價值。經研究發現，該菇子實體富含的礦質營養和真菌多糖可有效提高人體的免疫力，真菌多糖入藥有消積、殺蟲的作用，對腹部腫痛、腹部腫塊、心血管病、婦科腫痛、癌癥等疾病有預防和治療功效[2-3]，是一種營養和保健價值均高的珍稀菇品。在食用菌生產過程中，菌種制作和培養是生產的前提和基礎，是食用菌栽培能否成功的關鍵因素之一，前人對白靈菇培養基篩選的研究較多[4-8]，但結果不盡相同，一般采用液體培養測菌絲體干重法[4]和培養皿培養測菌絲生長速率[8]的方法，均存在一些弊端，不能全面地反映菌絲的生長速度和菌絲的旺盛狀況。筆者通過引入菌絲生長指數的概念采用培養皿培養的方法，全面地評價不同碳源對白靈菇菌絲生長的影響，并通過偏相關分析，研究菌絲生長速率、長勢評分與生長指數間的相互關系，以期為白靈菇的工廠化生產栽培種進一步優化培養條件提供更科學的方法和依據。

1 材料與方法

1.1 試驗時間、地點

室內試驗于2014年在山西省農業科學院試驗研究中心實驗室內進行。

1.2 試驗材料

1.2.1 菌種 供試菌種由山東省壽光市食用菌研究所提供，菌種編號為‘白靈6號。

1.2.2 培養基 基礎培養基：馬鈴薯100 g，葡萄糖20 g，蛋白胨10 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，瓊脂粉18 g，去離子水1000 mL，pH自然。

1.3 菌種的制備

取100 g馬鈴薯均勻的切成1 cm3大小，加去離子水煮沸后保持20～25 min，待馬鈴薯塊一捏即碎時過濾，取濾液定容至1000 mL，加入其他的藥品，完全溶后即是基礎培養基，分裝入小試管（18 mm×180 mm）中，121℃高壓蒸汽滅菌30 min制成試管斜面，于斜面中央接入活化的斜面菌種‘白靈6號，在（25±1）℃條件下的恒溫培養箱內暗培養，待菌絲長滿斜面后備用。

1.4 試驗方法

1.4.1 不同碳源對白靈菇菌絲生長的影響 分別用等量的供試碳源代替基礎培養基中的葡萄糖，以不加碳源為對照，研究不同碳源對白靈菇菌絲生長的影響，每個處理重復8次。供試培養基碳源為：葡糖糖、蔗糖、麥芽糖、可溶性淀粉、乳糖、果糖、D-木糖等。

1.4.2 白靈菇培養條件及菌落長勢評分標準 采用平板培養法，測定不同培養基上白靈菇的菌落直徑，并對菌落長勢進行評分，研究供試碳源對白靈菇菌絲生長的影響。所有試驗均采用直徑90 mm的培養皿，培養基用量30 mL/皿，防止培養基因過少在培養的過程干掉，每個平板上定量接種直徑約5 mm的菌餅1塊，在（25±1）℃條件下的恒溫培養箱內暗培養，采用劃線法標記菌落直徑，共培養10天，測量菌落直徑，計算菌絲生長速率，并對其菌落長勢進行評分。菌落長勢評分標準為：5分—菌絲長勢濃密，顏色潔白；4分—菌絲長勢較濃密，顏色潔白；3分—菌絲長勢較稀疏，顏色白色；2分—菌絲長勢較稀疏，顏色淺白色；1分—菌絲長勢稀疏，顏色淺白色。

2 結果與分析

2.1 不同碳源對白靈菇菌絲生長的影響

由表1、圖1可以看出，白靈菇菌絲在7種碳源培養基上均能生長。但在不同碳源培養基上，菌絲的濃密程度、菌落的長勢、顏色是不一致的，從顏色和濃密程度來看，果糖和木糖培養基生長的白靈菇菌絲濃密、顏色潔白，菌落長勢評分最高為5分，其次是乳糖和葡萄糖培養基，菌落長勢評分為4分，然后是蔗糖和麥芽糖培養基，菌落長勢評分為3分，可溶性淀粉培和空白培養基，菌絲稀疏、顏色較淺。

2.2 不同碳源對白靈菇菌絲生長速率的影響

由表2可以看出，在不同培養基上統一培養10天后，菌落直徑表現為蔗糖>可溶性淀粉>麥芽糖>空白>果糖>葡糖糖>乳糖>D-木糖，不同培養基上的菌絲生長速率快慢與菌落直徑表現相同，且蔗糖、麥芽糖、可溶性淀粉培養基上的菌絲生長速率極顯著高于其他培養基，果糖和空白培養基極顯著高于乳糖、木糖培養基，顯著高于蔗糖培養基。

2.3 不同碳源對白靈菇菌絲生長指數的影響

由圖2可以看出，白靈菇菌絲在不同碳源培養基上菌絲生長指數不同，表現為果糖培養基上菌絲生長指數最大，在0.05水平上顯著高于其他培養基，其次為葡萄糖培養基上的菌絲生長指數，在0.05水平上顯著高于乳糖、可溶性淀粉和空白培養基，葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、D-木糖培養基菌絲生長指數間差異不顯著。

2.4 不同碳源條件下菌絲生長指數、菌落直徑、菌落長勢評分間的偏相關分析

對菌絲生長指數、菌落直徑、菌落長勢評分3個因素進行偏相關分析，如表3所示。在不進行變量控制的情況下，菌落長勢評分與菌落直徑顯著負相關，與菌絲生長指數顯著正相關，而菌落直徑與菌絲生長指數無顯著相關性。在控制變量為菌落長勢評分的情況下，菌落直徑與菌絲生長指數顯著正相關，控制變量為菌落直徑時，菌落長勢評分與菌絲生長指數顯著正相關。

3 結論

在本研究中，白靈菇菌絲對供試的7種碳源均能利用。但在不同培養基上，菌落長勢是不一致的，從顏色和濃密程度來看，果糖和木糖培養基上的白靈菇菌落長勢最好，其次是乳糖和葡萄糖培養基，然后是蔗糖和麥芽糖培養基，可溶性淀粉培和空白培養基最差。從菌絲生長速率來看，蔗糖、麥芽糖和可溶性淀粉培養基是最優的選擇。引入生長指數來分析，果糖是白靈菇菌絲生長的最佳碳源，其次是葡萄糖和蔗糖，二者之間并沒有顯著差異性，但與可溶性淀粉之間差異極顯著。

通過對菌絲生長指數、菌落直徑、菌落長勢評分3個因素進行偏相關分析，結果表明，在不進行變量控制的情況下，菌落長勢評分與菌落直徑顯著負相關，與菌絲生長指數顯著正相關。在控制變量為菌落長勢評分的情況下，菌落直徑與菌絲生長指數顯著正相關，控制變量為菌落直徑時，菌落長勢評分與菌絲生長指數顯著正相關。

4 討論

（1）筆者研究不同碳源對白靈菇的影響，在供試的7種碳源中有單糖、雙糖和多糖，白靈菇均能利用，表明對碳源的利用廣泛[11]，單從生長速率來看蔗糖、麥芽糖和可溶性淀粉是最優的選擇，結果同趙秀芳、周長青等研究一致[12-15]，葡萄糖、果糖菌絲生長速度較緩慢，結果與宮志遠等的研究一致[16]；而結合濃密程度和顏色，用生長指數來分析，果糖做白靈菇菌絲生長所需碳源最優與前者的研究不同[12]，其次是葡萄糖和蔗糖，二者之間并沒有顯著差異性，但與可溶性淀粉之間差異極顯著（P<0.01），說明白靈菇對單糖和雙糖沒有選擇性，而對多糖有一定的選擇性，

（2）菌絲生長指數是從白靈菇菌落生長濃密程度、顏色等方面來評價菌落長勢的指標，比以往單純的從某個角度分析更有優勢，能更全面地反映實際生產情況[10]。在本研究中，結合菌絲濃密程度和顏色，用生長指數來分析菌絲的生長情況，結果表明果糖是白靈菇菌絲生長所需的最優碳源，此結果與前人研究不盡相同[12-16]。其次是葡萄糖和蔗糖，二者之間并沒有顯著差異性，但與可溶性淀粉之間差異極顯著（P<0.01），此結果說明，本研究中白靈菇對單糖和雙糖沒有選擇性，而對多糖有一定的選擇性。結合市場價格來考慮，為了降低實際生產成本最好選擇蔗糖作為白靈菇菌絲培養的碳源。

（3）以往的研究中，有關白靈菇菌絲生長指標間的相關性研究報道較少。筆者引入了菌絲生長指標間的相關性分析，通過對菌絲生長指數、菌落直徑、菌落長勢評分3個因素進行偏相關分析，結果表明，在不進行變量控制的情況下，菌落長勢評分與菌落直徑顯著負相關，與菌絲生長指數顯著正相關。在控制變量為菌落長勢評分的情況下，菌落直徑與菌絲生長指數顯著正相關，控制變量為菌落直徑時，菌落長勢評分與菌絲生長指數顯著正相關。

（4）本研究僅用了1個白靈菇菌株作為試驗對象，該菌株與其他不同來源的白靈菌株是否有差異，尚需進一步研究；本研究未涉及最適碳源在生產用菌種培養基中的最佳用量，以及碳氮比試驗，有待于細化研究內容。

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