慢性牙周炎與口腔幽門螺桿菌的關聯性分析

朱柯　付深利　陳業

摘要：目的 探討慢性牙周炎患者與其口腔中的幽門螺桿菌（helicobacter pylori，HP）的相關性。方法 將我院收治的80例患者，分為觀察組和對照組，觀察組41例牙周炎患者，對照組39例同期健康人，采集受試對象的牙菌斑和含漱液標本，運用二氧化硅微粒法提取DNA并進行PCR 擴增，電泳及銀染色，檢測Hp 陽性率，比較兩組的檢測結果及牙周炎組不同程度炎癥之間的Hp 陽性率比較。結果 觀察組中HP陽性35例，陽性率85.37%，對照組中陽性18例，陽性率46.15%，兩組比較差異有統計學意義（P<0.05）；不同類型牙周炎患者中，輕度牙周炎患者低于中、重度型牙周炎患者（P<0.05）。結論 HP參與了慢性牙周炎的致病過程，抑或是加強了其它因素的致病過程，HP 與牙周炎有相關性。

關鍵詞：牙周炎；幽門螺桿菌；相關性

慢性牙周炎是口腔科最常見的慢性疾病，其病因十分復雜，牙菌斑是最重要的致病因素。Hp是一種革蘭陰性微需氧菌，是消化道潰瘍的重要致病因子。近年來研究顯示，在胃炎患者的牙菌斑、唾液和牙周袋中HP有較高的檢出率[1]而口腔牙菌斑是HP的第二個重要貯存地[2]。牙周病變有可能增加HP感染，而后者的增加會導致慢性胃炎、胃潰瘍及胃癌發生，本文旨在觀察牙周病與HP的相關性。

1 資料與方法

1.1一般資料 將我院收治的80例患者，分為觀察組和對照組兩組。觀察組41例（男24例，女17例），年齡22～62歲，平均（42.4±18.7）歲，其中輕度13例，中度19，重度9例。健康組39例（男21例，女18例），年齡21～65歲，平均（44.2±16.7）歲。入選標準： <12個月未接受牙周治療；全口牙≥24顆；3個月內未服用抗生素；無上消化道主訴癥狀，無胃腸疾病史及其他全身系統性疾病。兩組的性別、年齡等無明顯差異（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法 牙菌斑和含漱液標本采集： 要求所有患者至少>12h未作任何口腔清潔及護理工作。每例取4個象限的第一磨牙頰側近中位點（第一磨牙缺失記錄第二磨牙）的齦溝內菌斑及含漱液。檢測并記錄患者取樣牙的探診深度（PD）、出血指數（BI）、菌斑指數（PLI）。所有患者的臨床檢查與標本的取樣均由同一位口腔臨床醫師操作。牙菌斑的采集：消毒棉卷隔濕、消毒三用槍吹干后，用消毒牙簽取齦上牙菌斑混合放置于1.5砌的無菌Ep管（內事先放有0. 9%的生理鹽水）中，做標記與記錄，80℃保存，待提取DNA。含漱液的收集： 讓患者口含0.9%生理鹽水，含漱20s，用5mlEp管收集4ml含漱液，做標記與記錄，80℃保存，待提取DNA。

檢測方法：采用二氧化硅微粒法提取DNA。將凍存標本自液氮中取出后立即放在冰上，加標本體積3倍的結合液A及10/A玻璃奶，置于55℃恒溫器上5min并每分鐘搖動1次，以促進DNA和玻璃奶的結合。然后用離心機10000rpm離心20s，棄上清，再加入洗滌液0.5ml，用震蕩器使玻璃奶重懸。如此重復洗滌共3次，短暫離心后吸盡洗滌液，放在55℃恒溫器上至完全干燥。再加入TE緩沖液30ml，混勻后在55℃恒溫器上放置2min，12000rpm離心3min，小心吸出上清，4℃保存。然后進行PCR擴增，引物根據尿素酶C基因和CagA基因進行設計。最后進行聚丙烯酰胺凝膠電泳，凝膠中的DNA片段用銀染方法顯色。

1.3統計學方法 所有所得數據錄入統計學分析軟件SPSS17.0進行統計學分析與處理。計數資料均采用χ2檢驗，檢驗水準為a=0.05，P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

觀察組中，牙齦上菌斑檢測陽性28例，含漱液檢測陽性18例，總陽性35例，陽性率85.37%；對照組中，牙齦上菌斑檢測陽性14例，含漱液檢測陽性7例，總陽性18例，陽性率46.15，兩組陽性率比較差異有統計學意義（P<0.05），見表1。

輕度牙周炎患者HP陽性檢出率為38.46%，中度牙周炎78.95%，重度牙周炎77.78%；輕度牙周炎患者HP陽性檢出率明顯低于中度和重度牙周炎患者，差異有統計學意義（P<0.05），中度牙周炎患者和重度牙周炎患者陽性檢出率無明顯差異（P>0.05），見表2。

牙周病是目前人類最常見的口腔疾病之一，在世界范圍內均有較高的患病率。慢性牙周炎也叫成人牙周炎或慢性成人牙周炎，此類牙周炎最常見于成年人，其主要癥狀是牙周袋形成、牙齦炎癥、牙周附著喪失、牙槽骨吸收，是導致老年人牙齒喪失的主要原因。近年來相繼有文章報道自口腔中檢測到Hp，但對其來源及作用觀點不一。有學者認為，Hp寄居于口腔內，是健康人口腔中的常駐菌群；但也有學者認為，牙菌斑和唾液不是HP永久的寄居地，HP無規律地分布在口腔不同的生態龕中，它的獲取是間歇性的，與胃食管返流有關，而且口腔中的厭氧環境不利于HP的生長[3]。

本組研究結果顯示，39例健康人中僅有18例檢測出Hp，占牙周健康組患者的46.15%，支持Hp可能不是健康人口腔中的常駐菌群的觀點。而且輕度牙周炎患者HP陽性檢出率明顯低于中度和重度牙周炎患者，差異有統計學意義（P<0.05），中度牙周炎患者和重度牙周炎患者陽性檢出率無明顯差異（P>0.05），說明Hp的陽性率與牙周炎的輕重程度密切相關，二者呈正相關。

綜上所述， HP可能與牙石、食物嵌塞等局部因素和全身因素共同作用引起牙周病，同時牙周病患者可能易感染系統性疾病，是消化道疾病的危險因素。因此，作為口腔科醫生不應僅局限于牙周病的治療還應著眼于全身系統性疾病的預防和治療，阻斷HP在消化道疾病及牙周病反復發作中的橋梁作用。

參考文獻：

[1]Gebara EC， Pannuti C， Faria CM， et al. Prevalence of chain reaction in the oral cavity of periodontitis patients [J].Oral Microbiol Immuno，2004，19（4）.

[2]高靜，李毅，王慶才.慢性胃病患者口腔與胃內幽門螺桿菌的研究[J].臨床口腔醫學雜志，2006，22（9）：524-525.

[3]Asikainen S， Chen C， Slots J. Absence of helicobacter in determined by polymerase chain reaction[J].Oral Microbiol Immunol，1994，9：318-320.

編輯/劉小燕