胃癌組織中LKB1和ARID1A的表達及其臨床意義

白艷紅+胡濤

【摘要】 目的 研究胃黏膜組織中LKB1和ARID1A基因表達與胃癌發生和發展的關系。方法 32例手術切除的胃癌組織標本、10例正常胃組織及18例胃炎組織標本利用組織芯片技術， 通過免疫組織化學方法， 檢測LKB1和ARID1A的陽性表達率。結果 在胃癌組織中LKB1和ARID1A陽性率（15.63%、34.38%）較胃炎（66.67%、55.56%）和正常胃組織（80.00%、60.00%）明顯降低（P<0.05）。胃癌伴淋巴結轉移患者LKB1和ARID1A陽性率與胃癌無淋巴結轉移患者比較， 差異有統計學意義（P<0.05）；胃癌不同浸潤深度LKB1和ARID1A陽性率比較， 差異有統計學意義（P<0.05）；胃癌不同病理組織分型LKB1和ARID1A陽性率比較， 差異無統計學意義（P>0.05）。結論 LKB1和ARID1A在胃癌組織中的表達缺失， 與胃癌轉移和浸潤密切相關， 且在胃癌發生發展的不同環節可能為相對獨立而又相互作用的調控基因。

【關鍵詞】 抑癌基因；LKB1；ARID1A；胃癌

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.25.028

獨有的分子生物學背景促使了胃癌的發展演變， 而新近發現LKB1和ARID1A兩種抑癌基因的突變率在胃癌相關組織中可高達70%～80% [1]。為進一步探討LKB1和ARID1A兩種抑癌基因在胃癌組織中的表達及預后關系， 選取本院60例胃黏膜組織標本， 采用組織芯片技術并通過免疫組織化學方法對LKB1和ARID1A進行檢測分析， 現報告如下。

1 材料與方法

1. 1 材料 選取菏澤市榮軍醫院病理科2009～2013年經石蠟包埋處理的胃癌組織樣本蠟塊共32例， 其中， 男22例， 女10例， 年齡18～55歲， 平均年齡（39.1±7.3）歲。所有入選患者的病理組織切片均符合國家胃癌協會合作組織復核標準， 另選10例正常胃組織及18例胃炎組織標本作為對照。

1. 2 組織芯片制作方法 ①空心蠟塊的制作：向空心模具內注入融化的石蠟， 待石蠟凝固后一次性制作成空心蠟塊。②目標組織的定位：先將選取好的樣本蠟塊用德國Leica病理切片機切片， HE染色， 光鏡下， 根據其形態學變化標注目標組織。③目標組織取樣：將標記好的目標樣本蠟塊標注部位入放組織芯片取樣機， 利用樣本取樣機鉆取蠟塊的目標組織。④制備樣本蠟塊：將鉆取樣本組織放入組織芯片制備機中， 將已溶化的石蠟注入樣本蠟塊制備機中， 冷凝后， 目標芯片蠟塊制備完成。

1. 3 判定標準 采用雙盲法對實驗結果進行閱片， 陽性表達主要以棕黃色顆粒存在于細胞的胞漿或胞膜， 無染色者（+）， 陽性表達率<10%者（++）， >10%部分表達者（+++）， 全部細胞膜染色或>10%胞漿中度以上表達者（++++）。

1. 4 統計學方法 采用SPSS19.0統計學軟件進行統計分析。計數資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2. 1 LKB1和ARID1A在不同胃黏膜組織中的表達 LKB1陽性表達率最高的是正常胃組織為80.00%， 其次是胃炎組織陽性表達率為66.67%， 均顯著高于胃癌組織的15.63%（P<0.05）；ARID1A的陽性表達率在胃癌組織中為34.38%， 顯著低于正常胃組織的60.00%和胃炎組織的55.56%（P<0.05）。

2. 2 胃癌有無淋巴轉移LKB1和ARID1A陽性率比較 胃癌無淋巴轉移者LKB1陽性率為36.36%（4/11）， 高于胃癌伴淋巴轉移者的4.76%（1/21）（P<0.05）；胃癌無淋巴轉移者ARID1A的陽性率為72.73%（8/11）， 高于胃癌伴淋巴轉移者的14.29% （3/21）（P<0.05）。

2. 3 胃癌不同浸潤深度LKB1和ARID1A陽性率比較 胃癌不同浸潤深度LKB1和ARID1A陽性率比較， 差異有統計學意義（P<0.05）。其陽性表達與胃癌浸潤深度負相關。見表1。

2. 4 胃癌不同病理組織分型LKB1和ARID1A陽性率比較 胃癌不同病理組織分型LKB1和ARID1A陽性率比較， 差異無統計學意義（P>0.05）。見表2。

3 討論

LKB1主要使細胞增殖停滯在細胞周期的G1期， 從而促進細胞的凋亡， 另外LKB1對胚胎血管形成還有細胞誘導等多個方面都是具有生物學意義， 同時其還是一種重要的抑癌基因。本研究中檢測到胃癌組織中LKB1基因存在表達下調， LKB1蛋白的缺失表達與胃癌關系緊密聯系， 且LKB1抑癌作用機制有可能出現一些負性的調節效果。在本研究中， 通過免疫組織化學方法驗證了LKB1在胃癌發生發展中可能起著重要的抑制作用， 并且這種基因的表達可能對患者的預后有著重要的幫助作用， 對胃癌患者在延長其術后總體生存時間方面也具有積極作用。

ARID1A基因對腫瘤的抑制作用需要P53蛋白的參與， 而P53蛋白又通過調節CDKN1A和SMAD3因子使一種染色質重塑因子發生失活性突變導致腫瘤細胞的再生受到抑制， 從而抑制腫瘤細胞發生發展[2]。本研究發現， 在胃癌組織中ARID1A基因蛋白的表達陽性率明顯低于正常胃組織及炎癥組織， 分析認為其陽性表達與胃癌浸潤深度和淋巴轉移負相關， 而胃癌不同病理組織分型LKB1和ARID1A陽性率差異無統計學意義（P>0.05）。

總之， 胃癌形成發展過程可能與胃癌組織中ARID1A基因凋亡調控作用減弱或消失有關。腫瘤的發生是多基因參與的復雜過程， 在胃癌發生發展中， ARID1A和LKB1可能為相對獨立而又相互作用的抑癌基因， 目前研究較為零散， 二者的抑癌機制仍需進行系統研究。

參考文獻

[1] 夏雷， 莫伏根， 李剛， 等.胃癌中HER-2和HER-3的表達及臨床意義.實用老年醫學， 2013， 27（11）：903-907.

[2] 閆毓秀， 張淑萍， 滑靜. p53基因研究進展.北京農學院學報， 2009， 24（2）：74-77.

[收稿日期：2016-01-29]